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自制对照品标定方法是?   标签:中药对照品 古朵生物 标准品   自制对照品标定方法是?   常用的 对照品 标定的方法如下:   1,常规标定检测内容包括:   ①色谱纯度,HPLC的纯度检查时选择紫外波长需考虑对照品中杂质以及主化合物的吸收强弱,以减少色谱纯度的误差;   ②水分,一般用KF滴定少用LOD;   ③溶剂残留,有时用LOD测水分时残留溶剂也已被挥发减重,故采取LOD测水分时可不测RS);   ④炽灼残渣,主要测无机盐类杂质成分;   ⑤其他杂质,此方法的缺点可能会有些无紫外吸收的杂质不能被检测到,或者含有的无机盐ROI后计量不准,所以此方法要求对照品纯度尽量高些。   2,滴定法:选择合适的滴定方法跟需标定物质定量反应,计算滴定度从而得出该组分含量,此方法需基准物质标定用于反应的滴定液,且待标定对照品中不含跟该滴定液反应的杂质。   3,核磁共振:核磁标定可用加入已知量的高纯度内标物后准确定量待标化物中含有的特征氢的摩尔量及该物质的量;此方法标定对照品,消耗量很少、实验简单快速,但需要高纯度内标,且内标物与待标化物不发生反应,且用于定量计算的特征氢无干扰,不影响积分。    标准品 与 对照品 的区别:   1.标准品,即是标准物品,作为一种衡量标准,如果用在药物方面,则为含量测定中的标准含量。标准品包括化学计量标准品、冶金标准品和药检标准品。采用生化方法来测定,目前国家规定的标准品共有15种,林可酶素、新霉素、大观酶素、太乐菌素、链霉素、卡那霉素、绒促性素、盐酶素、杆菌肽锌、吉他酶素、安普酶素、红霉素、合成缩宫素、庆大霉素、渡毛化苷G。   2.对照品,是指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质。采用化学方法来测定,即是一般仪器的都叫做对照品,国家规定的有107种,包括地塞米松、土霉素、阿莫西林等等。    自制对照品 标定方法是?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。 查看更多
您知道DNA碱性转移缓冲液使用说明书?   关键词: DNA碱性转移缓冲液 古朵生物 缓冲液   您知道DNA碱性转移缓冲液使用说明书   中文名: DNA碱性转移缓冲液   规格:500ml   分类:核酸杂交   保存:室温,12个月   用途:DNA碱转移至尼龙膜   适用范围:限于科研实验,不作临床。   DNA碱性转移缓冲液说明书:   DNA碱性转移缓冲液用于将DNA碱转移至尼龙膜上,由1.0MNaCl、NaOH等组成,不含蔗糖,可用于核酸杂交,尤其适用于Southernblot实验。   操作注意事项:   1.按实验具体要求操作;   2.如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用;   3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;   4.请严格按照产品说明书上的要求进行规范化的操作;   5.注意无菌操作,避免微生物污染。   您知道 DNA碱性转移缓冲液 使用说明书上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音译,寓意是质量好,品牌好,服务好!欢迎新老客户洽谈!古朵生物公司作为其产业中的一分子的使命————为这科研实验提供材料与服务,为科研领域的发展作出更多贡献。 查看更多
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CAS:107668-79-1_草乌甲素操作步骤是?   关键词: 草乌甲素 古朵生物 滇西嘟拉碱    CAS:107668-79-1_草乌甲素操作步骤是?   中文名:草乌甲素   中文别名:滇西嘟拉碱   英文名称:Bulleyaconitine A   CAS号:107668-79-1   CBNumber:CB9291737   分子式:C35H49NO9   分子量:627.76   性状:白色粉末   溶解性:易溶于乙醇、三氯JIA烷、乙MI中,在水中不溶;在稀盐酸、稀硫酸中极易溶解。   熔点:160~165   存储方法:2-8℃,避光保存。   适用范围:限于科研实验,不作临床。   CAS:107668-79-1_草乌甲素试样制备:   1、称取供试品:精密称取本品试样20mg。   2、对照品溶液的制备:精密称取草乌甲素对照品20mg,加流动相分别制成每1mL含0.02mg的溶液。   3、供试品溶液的制备:将供试品用流动相稀释,制成每1mL含0.02mg的溶液,为供试品溶液。   CAS:107668-79-1_草乌甲素用途:   1、采用液相色谱法测定草乌甲素(C35H49NO10)的含量。   2、适用于草乌甲素。   CAS:107668-79-1_草乌甲素操作步骤:   分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长260nm处测定草乌甲素的吸收值,计算出其含量。    CAS:107668-79-1_草乌甲素操作步骤是? 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音译,寓意是质量好,品牌好,服务好!欢迎新老客户洽谈!古朵生物公司作为其产业中的一分子的使命————为这科研实验提供材料与服务,为科研领域的发展作出更多贡献。 查看更多
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细菌培养基的组成成分您知道吗?   标签:细菌培养基 古朵生物 培养基 固体培养基   细菌培养基的组成成分您知道吗?   培养基的组成成分包括三大类:营养物质、凝固物质、抑制剂和指示剂。下面是古朵生物技术的一些详解,仅供参考:    (一)营养物质   尽管不同的细菌对营养的要求不同,但细菌需要的营养物质应含有水、氮源、碳源、无机盐类和生长因子等,常用的营养物质如下:   1.蛋白胨:蛋白胨是制备培养基时最/常用的成分之一,提供细菌生长繁殖所需要的氮源。是动物或植物蛋白质经酶或酸碱分解而成。植物胨和动物胨各有优点,配制培养基常将两者按一定比例混合使用,提高培养基的营养价值。蛋白胨易溶于水,遇酸不沉淀,不因受高温而凝固,并为两性电解质有缓冲作用。但吸水性强,应注意干燥密封保存。   2.肉浸液:是用新鲜牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物医|学教育网搜集整理(肌酸、黄/嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌/呤核苷酸、谷氨/酸、甘氨/酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、无机盐类等)。还有一些生长因子。肉浸液可为细菌提供氮源和碳源,但肉浸液中所含氮物质过少而不能满足细菌的需要,因此在制备培养基时应再加入1%~2%的蛋白胨和0.5%氯化钠。   3.牛肉膏:由肉浸液经长时间加热浓缩而制成。糖类在加热过程中被破坏,所以其营养价值低于肉浸液,但因无糖可用作肠道杆菌鉴别培养基的基础成分。由于使用方便,常用于制备培养基。   4.糖类、醇类:为细菌生长提供碳源和能源。制备培养基所用的糖类、醇类有多种,常用的糖类有单糖(葡萄糖、阿拉伯糖等)、双糖(乳糖、蔗糖等)和多糖(淀粉、菊糖等);常用的醇类有甘露/醇、卫茅醇等。除葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源的基本成分外,其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做的发酵反应。   5.血液:血液中既含有蛋白质、多种氨基酸、糖类、无机盐类等营养物质,又能提供辅酶(如V因子)、血红素(X因子)等特殊生长因子,所以培养基中加入血液用于培养营养要求较高的细菌。另外,还可根据细菌在血液培养基中的溶血现象而进行鉴定。   6.无机盐类:提供细菌生长的各种元素,如:钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫等。用于制备培养基的无机盐类有多种,其中最/常用的有氯化钠和磷酸盐,前者对维持酶的活性、调节菌体内外的渗透压非常重要,后者是细菌良好的磷源,并在培养基中具有缓冲作用。   7.鸡蛋和动物血清:虽然不是构成培养基的基本成分,但却是某些细菌生长所必需的营养物质,所以仅用于制备一些特殊的培养基,这些细菌直接从鸡蛋和动物血清中获取营养。如培养结核分枝杆菌的鸡蛋培养基和培养白喉杆菌的吕氏血清培养基等。   8.生长因子:是细菌生长所必需的,但需要量很小。在制备培养基时,常在肝浸液、肉浸液、酵母浸液和含血液培养基中加入维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生长因子。    (二)凝固物质   制备固体培养基时,需要在液体中加入凝固物质。最/常用的凝固物质为琼脂,特殊情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。   琼脂是从石花菜中提取出来的一种半乳糖胶,当温度达98℃以上时可溶于水,在45℃以下则凝固成凝胶状态,是一种理想的固体培养基赋形剂。因其不被细菌分解利用,故无营养作用。    (三)抑制剂和指示剂   在制备培养基时常加入抑制剂和指示剂,这些并不是细菌生长繁殖所必需的物质,而是由于选择、鉴定及判断结果的需要。 查看更多
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细胞株的保存方法是什么?   标签:细胞株 古朵生物 培养基 细胞冻存液   细胞株的保存方法是什么?   1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。   2. 将所需的培养基,胰/酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰/酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放于斜架上,瓶口对准酒精灯,且放在距离酒精灯近的位置,瓶盖置于酒精灯的另一侧。   3. 将培养瓶瓶口在酒精灯上消毒2-3次,旋开后分别再次消毒瓶口和瓶盖2-3次,盖放于酒精灯右侧后将培养瓶内的培养液悬空倒进污缸,在酒精灯消毒2-3次瓶口,竖直放好。取1ml移液器快速移动在酒精灯上消毒1-2次,然后再装上枪头吸取1.5ml胰/酶液,悬空移入培养瓶内。   4. 将培养使胰/酶浸没整个瓶壁的细胞层,计时约40s,立马竖起对着灯光可观察到细胞与细胞之间有针孔样缝隙,并有1-2个细胞脱落,这时为胰/酶消化的适时机。若看到成片的细胞从瓶壁脱落为胰/酶消化过度;若看不到针孔样缝隙和细胞脱落,则需继续消化,轻轻的迅速平放培养瓶使胰/酶浸没细胞层1s后迅速竖起对着灯光观察细胞情况,可反复几次,直至出现针孔样缝隙和1-2个细胞脱落的消化状态。用移液器将胰/酶吸净。   5. 吸取1ml细胞冻存液于培养瓶内,并用移液器吸取少量的培养基轻柔的反复冲洗培养瓶壁5-8次,使贴壁细胞完全脱落于培养基内再轻轻吹打2-3次,使细胞尽可能处于单个悬浮状态。   6. 将1ml含有细胞的冻存液移入新的保种管内,拧紧瓶盖,做好实验标记。   7. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧,熄灭酒精灯,整理实验台面,取出实验试剂及污缸等,关闭超净工作台。   8. 将保种管先放于4℃冰箱 30min后拿出放置-20℃冰箱过夜,次日再放于-80℃的冰箱内3-4天,后存放于-196℃的液氮灌内长期保存。    注: 此过程也可简化因实际操作过程中经验所得:步骤7结束后将保种管用干脱脂棉包裹后胶带封好直接放于-80℃冰箱内4-5天,即可放于液氮灌保存。但-80℃冰箱也可保存细胞株2-3月。 查看更多
抗原和抗体的区别是?   标签:抗原 古朵生物 抗体   抗原和抗体的区别是?   人们经常在一些搜索时发现,当你搜索抗原时,往往会同时出现抗体,而搜索抗体时,抗原却出现很少,也有很多人问,抗原抗体是不是因为同属一类产品,才会出现这样的现象呢?   到底是因为什么原因造成这样的现象出现,我们跟随古朵生物小编讲述一下抗原和抗体的本质区别是什么    抗原:   抗原(antigen,缩写Ag)为任何可诱发免疫反应的物质。外来分子可经过B细胞上免疫球蛋白的辨识或经抗原呈现细胞的处理并与主要组织相容性复合体结合成复合物再活化T细胞,引发连续的免疫反应。   抗体(英语:antibody),(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。   在某搜索平台上我们发现有这样的一句描写:抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。相信这个答案就很好的解释了前面所讲到的搜索时出现的现象了!   但抗原和抗体是有本质区别的,那 抗原和抗体 的本质区别是什么呢?   抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体,异嗜性抗体,同种抗体和自身抗体。   抗原(Ag)是指所有能诱导机体发生免疫应答的物质。即能被T/B淋巴细胞表面的抗原受体(TCR/BCR)特异性识别与结合,活化T/B细胞.使之增殖分化,产生免疫应答产物(致敏淋巴细胞或抗体),并能与相应产物在体内外发生特异性结合的物质。因此,抗原物质具备两个重要特性:免疫原性(immunogenicity)和免疫反应性(immunoreactivity)。免疫原性即指抗原诱导机体发生特异性免疫应答,产生抗体和/或致敏淋巴细胞的能力。 查看更多
抗生素的适用范围都有哪些?   标签:抗生素 古朵生物 溶液   抗生素的适用范围都有哪些?    抗生素 是在低浓度下就能选择性地抑制某些生物生命活动的微生物次级代谢产物,及其化学半合成或全合成的衍生物。其用途很广泛,所以在很多地方都可以看到它的身影!   抗生素用途   1、对病原微生物具有抑制或杀灭作用;   2、是防治感染性疾病的重要药物;   3、抗菌作用;   4、抗肿瘤、抗病毒、抑制免疫;   5、杀虫作用;   6、除草作用。   抗生素使用原则   关于抗生素的使用原则,其实网上有很多不同的说法,最能得到认同的有以下四点:   1、严格掌握适应证凡属可用可不用的尽量不用;   2、发热原因不明者;   3、病毒性或估计为病毒性感染的疾病不用抗生素;   4、皮肤、粘膜局部尽量避免反应应用抗生素。   抗生素副作用   关于抗生素的副作用和上面所讲到的使用原则一样,网上的说法也是有很多,主要聚中于以下几点:   1、抗生素本身会导致疾病。   2、“破坏统一战线”。   3、“锻炼了敌人”———造就了新的病菌。   4、抗生素会产生毒性反应。   5、抗生素会产生过敏反应。   6、引发二重感染   7、产生耐药性   8、使机体抵抗力降低    抗生素适用范围   适用范围主要体现在两点:   1、预防用药   清洁手术术前应用通常只用一次,通常在麻醉诱导时用。如果手术时间长或出血量大,可在手术中给予第二剂。   2、治疗用药   a、通过培养、涂片、血清学检查、X线等尽可能明确病原体后开始治疗。如系病毒感染不需要用抗生素。   b、在培养结果未出来时,可根据症状、体征、血常规生化和影像学结果判断经验性用药,但用抗生素前必须送痰、血或无菌分泌物做培养。   c、抗生素种类根据病情,轻者口服或肌注,病情较重者可静脉用药,危重患者可联合应用2种抗生素。   d、抗生素应用一般为3天,如不见好转可改用其他抗生素;如培养阳性,药敏对所用抗生素不敏感者,但临床情况好转可继续用,如培养的细菌对药物敏感,而临床不见改善,可改用其他敏感抗生素。 查看更多
标准品多少钱?与对照品的区别是?   标签:标准品 标准物品 对照品 古朵生物   标准品多少钱?与对照品的区别是?   摘要:标准品,即标准物品,是中药标准对照品研究中心代理的作为一种衡量标准;很多的客户总是会问我,标准品是不是对照品,或者说标准品对照品是一个产品,只是叫法不同而已,这种说法是错误的!标准品与对照品是有区别的!   标准品与对照品不仅有区别,而且两者的价格也是不相同的。随着科学的发达,标准品与对照品不仅仅只有国产系列,还有进口系列,这也就是我们常说到的进口标准品,进口对照品!今天古朵生物技术着重讲一下:进口标准品多少钱   我们都知道,标准品的系列有很多,每个系列又有不同的型号,其对应的CAS号也是不同的,比如:鸦胆子素 A 所对应的CAS号:25514-31-2,而莱苞迪苷C 所对应的CAS号则是:63550-99-2,两者价格当然也会不一样!同样,进口标准品的系列也很多,型号也是成千上万,所以价格也是不同,但要问到进口标准品多少钱这个问题,说实话,到目前为止是没有人能给出一个准确的报价,为什么 呢?   前面我们说到过,标准品的系列有很多,进口标准品也不例外,那不相同的产品,价格肯定是不一样的,所以是没有办法报出一个准确的价格,只能说以据你询问的进口标准品系列型号去分别报价,所以说,标准品多少钱,都不一样!    标准品多少钱? 与对照品的区别是?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音译,寓意是质量好,品牌好,服务好!欢迎新老客户洽谈!古朵生物公司作为其产业中的一分子的使命————为这科研实验提供材料与服务,为科研领域的发展作出更多贡献。 查看更多
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动物血清是怎么购买的,价位是?   标签:动物血清 无菌脱纤维羊血 古朵生物 大鼠红细胞    动物血清 主要效果是供给根本营养物质、供给激素和各种生长因子、供给结合蛋白、供给促触摸和扩展因子使细胞贴壁免受机械损害、对培育中的细胞的起到某些维护效果。   动物血清因用途广泛、价格实惠及种类众多等得到了越来越多的科研人员的喜爱,在实验中,各种不同种属的动物血清也是实验人员的”心头肉“!动物血清的种类(类别)的很多,所涵盖的动物种属满足于科研实验人员的需求!   动物血清的种类如此众多,那么动物血清多少钱呢?   说到这个问题,我们先简单的给动物血清进行一个分类!更多分类(类别)请参考:古朵生物全新动物血清系列上线,其文章里为您详细介绍了动物血清的类别介绍!   动物血清种类:   胎牛血清,特级新生牛血清,优级新生牛血清,标准新生牛血清,标准马血清,特级马血清,山羊血清,绵羊血清,兔血清,鸡血清,猪血清,大牛血清,小牛血清,狗血清,驴血清,大鼠血清,小鼠血清,豚鼠血清,巴比西鼠血清    动物血清价格 :   动物血清的种类除上述所讲外还有很多不同的种属,价格相对来说,都是不大相同,在这里,小编先为大家报出三个类别的动物血清价格吧。   中文名:无菌脱纤维羊血   英文名:Sterile Defidrinated Sheep Blood   供应商:上海古朵生物   规格:100ml(更多规格请来电)   价格:290元   用途:配套匹克氏肉汤基础、改良MRS琼脂、Skirrow氏基础、血琼脂基础、改良Camp-BAP使用。   适用范围:适应于血平板生产、细菌培养、生物医学研究基础等。   中文名:大鼠红细胞(6% PBS)   英文名:Rat red blood cell   供应商:上海古朵生物   规格:100ml(更多规格请来电)   价格:590元   中文名:兔血清(无菌过滤)   英文名:Rabbit serum (aseptic filtration)   供应商:上海古朵   规格:100ml(更多规格请来电)   价格:230元   更多的动物血清价格请来电联系古朵生物销售人员 18321664727!我们将给您最优惠的价格,为您竭诚服务! 查看更多
糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽Rules技术原理是?   关键词:古朵生物 胰岛淀粉样肽 抗体IgG 多肽抗原   糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽Rules:   (1) the initial reaction to produce antibodies to antigens: when the first to enter the body, need to produce antibodies after certain incubation period can, and antibody production quantity are not many, in the body to maintain the time is short.   (2) once again: when the same antigen antibody reaction to produce second times into the body, at the beginning, as part of the original antibody binding and once again into the antigen antibody, can make the original amount reduced slightly. Subsequently, rapid increase antibody titer, several times more than the initial reaction can be generated to a few times, retained in the body of a lot of time.   (3) recall response to produce antibodies: antibodies produced by antigen stimulation of the body, after a certain period of time can disappear gradually. If the re exposure to antigen, the antibody has faded fast rise. As the body with the same antigen again first, then known as the specific recall responses; and if the initial reactions of different, it is known as a nonspecific recall response. Increased nonspecific memories to elicit antibody responses are temporary, short time soon fall.   中文名称:糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽   英文名称:Amylin(1-37) amide   货号:Y-0158   规格:0.5mg   级别:分子生物学级, 亲和纯化   抗原:多肽抗原   抗原来源:多肽合成   抗体来源:Rabbit   适用物种:hu, mo, rat   可提供抗体IgG的各种标记conjugate:可提供抗体IgG的各种标记 Isotype:可咨询   应用范围:WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500   克隆类型:Polyclonalormonoclonal   交叉反应:Human,Mouse,Rat,Dog,Horse   保存环境:2-8℃ 短期保存或   糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽上海古朵生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明,敬请来电咨询18321664727! 查看更多
五色多重荧光免疫组化染色试剂盒原理是?   关键词:五色多重试剂盒 荧光免疫组化染色试剂盒 鼠兔通用二抗 古朵生物   原理介绍: 酪酰胺信号放大(TSA, Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶 ( HRP) 对靶蛋白进行标记的酶学检测方法, 类似常规免疫组化的 DAB 显色方法 , TSA 技术同样采 用 HRP 标记的二抗, 同样有对应的 “显色”步骤 (HRP 催化加入反应体系的酪胺荧光素底物, 产生 活化荧光底物, 活化底物可与抗原上的酪氨酸等残基共价结合, 使样品上稳定的共价结合酪胺荧光 素。之后用热修复法洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP 复合物, 重复下一种一抗-hrp二抗来第二轮孵 育, 换另一种酪胺荧光素底物, 如此往复就可实现多重标记。   TSA 详细原理是利用酪胺 Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在 HRP 催化 H202 下形成共价键结合位点), 产生大量的酶促产物, 该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、 组氨酸和酪氨酸残基)结 合, 这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积, 结果使其检测信号得到 10-100 倍增强。 简单 来说, 用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的 HRP (而不是直接偶联荧光素) , 来催化后续 添加入体系的非活性荧光素。 荧光素在 HRP 和过氧化氢的作用下被活化, 跟临近蛋白的酪氨酸残基 共价偶联, 使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波或煮沸或者水浴等热修复处理, 前一轮非共价 结合的抗体被洗掉, 共价结合的荧光素稳定共价结合在样本切片蛋白上。 再换个一抗来第二轮孵育 , 周而复始。 等到所有抗体孵育结束, 荧光素都结合好后, 最后去检测结果。 由于每次体系中都只有单 一抗体孵育, 因此无需担心抗体交叉反应, 以及一抗二抗种属匹配问题, 大大减少了实验设计时不同 种属抗体选择匹配的限制。 也就是说, 如果用 TSA 技术, 同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性 高的兔单克隆抗体。 搭配同一支抗兔的 HRP 二抗就可以进行实验, 而且信号放大的倍数大大增强。 本公司开发的试剂盒具体酪胺荧光染料为一下其中一种或者多种: TYR-480, TYR-520, TYR-570 , TYR-620, TYR-690, TYR-780。 此试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用。 可以实现单标、 双标、 三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能, 极大丰富了此试剂盒的内涵。   试剂盒组成: TYR-520 荧光染料(绿光)(即用型, 5mL),-20℃; TYR-570 荧光染料 (红光) (即用型, 5mL), -20℃; TYR-620 荧光染料 (即用型, 5mL), -20℃; TYR-690 荧光染料 (即用型, 5mL), - 20℃; TSA+增强剂, 100ul, -20℃ (可选) ;高敏多聚 hrp 山羊抗兔二抗 (10mL) 4℃。   备注: TYR-520 荧光染料 、TYR-570 荧光染料、 TYR-620 荧光染料、 TYR-690 荧光染料 在-20 度下, 均为固体, 使用之前需解冻。   TSA+增强剂使用方法: TSA+增强剂能够进一步增强荧光信号放大液的放大信号 5-10 倍, TSA+增 强剂: TYR 荧光放大液=1:500, 使用 TSA+增强剂不是必须的选项, 可以根据具体的情况选择添加 或者不选择添加。   操作流程:   1、 石蜡切片脱蜡至水: 依次将切片放入二甲苯 Ⅰ 15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇 Ⅰ5min-无水乙醇 Ⅱ。 取出放在通风厨内, 酒精晾干后放入自来水中稍洗, 蒸馏水洗。   2、 抗原修复: 组织切片置于盛满 PH 9.0 EDTA 碱性抗原修复液或者 PH6.0 柠檬酸修复缓冲液的修复 盒中于微波炉内进行抗原修复 (也可以用高压 1-2min 100 度水煮 15min 95 度水浴 20min等其他 热修复方法) 。 中火 8min, 停火 8min, 转中低火 7min, 此过程中应防止缓冲液过度蒸发, 切勿 干片。 自然冷却后将玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次, 每次 5min。 (修复液 和修复条件根据组织类型以及抗原类型来确定) 。   3 、 阻断内源性过氧化物酶: 切片放入 3%过氧化氢溶液, 室温避光孵育 15 min, 将玻片置于 PBS (PH7.4) 中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次, 每次 5min。   4、 BSA 封闭:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈 (防止抗体流走) , 在圈内滴加用 3%BSA-PBS (或者其他封闭液) 均匀覆盖组织, 室温封闭 30min。   5、 加一抗: 轻轻甩掉封闭液, 在切片上滴加用抗体稀释液稀释好的的一抗 X, 切片平放于避光湿盒 内 4°C 孵育过夜或者 37 度 1-2h。 (湿盒内加少量水防止抗体蒸发)   6、 加 hrp 二抗: 玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次, 每次 5min。 切片稍甩干后 在圈内滴加与一抗相应种属的hrp二抗覆盖组织, 避光室温孵育 50min, PBS 洗三次。   7、 荧光染料反应: TYRXXX 荧光染料反应 10-15min, PBS 洗三次。   8、 重复 2-7 步骤 (换用另外一种 TYRXXX 荧光染料)   9、 DAPI 复染细胞核: 玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次, 每次 5min。 切片稍 甩干后在圈内滴加 DAPI 染液, 避光室温孵育 10min。   10、 封片: 玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次, 每次 5min。 切片稍甩干后用抗 荧光淬灭封片剂封片。   11、 镜检拍照: 切片于荧光显微镜/共聚焦/多通道荧光扫描仪/多光谱成像系统下观察并采集图 像。   染料 激发波长 发射波长   DAPI 蓝色 350 420   TYR-480 450 480   TYR-520 绿色 490 520   TYR-570 红色 550 570   TYR-620 590 620   TYR-690 630 690   TYR-780 750 780   文章引用试剂盒/方法: Co-staining of A, B , C and D was performed using a Five-color Fluorescence kit ( GuduoBio Biological Technology, Shanghai, China) based on the tyramide signal amplification (TSA) technology according to the manufacture’s instruction. 查看更多
抗体的分类您知道吗啊?如何选择二抗?   关键词:抗体 辣根过氧化物酶 单克隆抗体第三代抗体 古朵生物   什么是 二抗 ?   二抗是指用于靶向结合一抗的抗体。在多种免疫印迹、ELISA以及免疫荧光等免疫实验中,二抗经常和一抗结合使用以检测目标蛋白。很多二抗都带有标记物,例如Alexa Fluor荧光染料或辣根过氧化物酶(HRP),从而使二抗的信号可以被检测到。   实验中也可以使用带有标记物的一抗,但是二抗有很多优点。无论是使用哪种一抗进行检测,使用二抗可便于换不同的标记物。例如,同样的一抗可以与HRP标记二抗一起用于免疫印迹,也可以与另一种Alexa Fluor 488荧光标记二抗一起用于免疫荧光实验。   另外,二抗结合在抗原位置的标记染料比直标一抗要多,从而增强检测信号。使用二抗可以避免对一抗进行复杂且昂贵的化学标记(偶联),而且偶联反应(具有氨基酸特异性)可能干扰一抗对抗原的识别。   选择合适的 二抗 ?   要选择出一种适用于您的应用和研究的佳二抗,建议考虑以下因素:   种属来源和种属反应性特异性反应交叉吸附多重检测能力抗体类型和亚型完整抗体还是抗体片段标记物   抗体是在病原物刺激下由B细胞增值分化为浆细胞后所产生的一种免疫球蛋白,其能够以高特异性结合抗原。抗体分子由四条多肽链组成,即两条重链和两条轻链。每条重链由450~550个氨基酸残基组成,分为μ、γ、α、δ和ε五种类型。轻链约由210个氨基酸残基组成,分为κ链和λ链。重链和轻链通过二硫键结合在一起,形成抗体的基本分子结构,呈现”Y“形。    抗体 的分类:   1.根据有无抗原刺激划分   天然抗体:天然存在于体液中的抗体,没有明显特异性抗原刺激。免疫抗体:感染或预防接种后产生的抗体。2.根据所对应的抗原划分   异种抗体:由异种抗原免疫所产生的抗体,如微生物抗原异种球蛋白免疫动物产生的抗体。同种抗体:同一种属的两个或两个不同近交系动物之间免疫所产生的抗体。自身抗体:由自身抗原导致机体所产生的抗体。异嗜抗体:不同种属的动植物、微生物间存在的共同抗原引起机体所产生的抗体。3.根据与抗原反应的性质划分   完全抗体: 即二价或多价抗体,它与抗原结合后可在特定条件下出现可见反应。不完全抗体:即单价抗体或封闭抗体,与抗原不能形成抗原抗体复合物,不出现可见反应。4.根据理化性质和功能划分   IgG:血清中丰富的抗体,占人体免疫球蛋白的70-75%。IgG抗体的重链属于γ亚类,并且它具有两个抗原结合位点。IgG使有害物质解毒,并且在白细胞和巨噬细胞识别抗原-抗体复合物中起重要作用。IgG通过胎盘转移到胎儿并保护婴儿,直到其自身的免疫系统发挥作用。IgM:以五聚体形式存在,是体内发现的大抗体(称为巨球蛋白),并且是抗原进入体内后先产生的抗体,约占血清总抗体含量的10%。IgM抗体的重链属于μ亚类,并且具有10个抗原结合位点,能够促进免疫系统的有效激活。IgE:以单体形式存在,是血清中含量少的抗体,占人体免疫球蛋白的比例不超过0.002%。IgE抗体的重链属于ε亚类,具有两个抗原结合位点,它初的作用是防止寄生虫。IgE也称为反应性抗体,在I型超敏反应或过敏反应中起重要作用。IgA:分为血清型和分泌型两种,占人体免疫球蛋白的10-15%。血清型IgA1主要由肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生,以单体形式存在。分泌型IgA2是由消化道、呼吸道、泌尿生殖道等处的固有层中浆细胞产生。IgA抗体的重链属于α亚类,并且它具有四个抗原结合位点。IgA存在于分泌物中,是抵抗微生物和抗原摄入体内的道防线。母乳中的IgA可保护新生儿的胃肠道免受病原体侵害。IgD:占血清总抗体含量不到1%,常在具有IgM的B细胞表面共表达。IgD抗体的重链属于δ亚型,具有两个抗原结合位点,在体内作为单体存在。IgD可能参与B细胞中抗体产生的诱导,但其确切功能仍然未知。5.根据抗体的发展划分   当注射抗原时,一系列抗体生成细胞会不同程度与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体。   由单一B淋巴细胞产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。   将制备单抗的细胞工程技术与生产重组分子的基因工程技术及蛋白质工程技术结合起来,对编码抗体的基因按不同需要进行加工改造和重组安装,转染适当的受体细胞后表达出来的抗体分子,这种经基因重组的抗体称为基因工程抗体。主要包括嵌合抗体、小分子抗体、双特异性抗体、抗体偶联物和抗体融合蛋白等。   代抗体:多克隆抗体第二代抗体:单克隆抗体第三代抗体:基因工程抗体抗体的生物学功能 查看更多
多重免疫荧光染色实验需要了解的问题?   关键词:多重免疫试剂盒 荧光染色试剂盒 古朵生物   问:样本可以做成冰冻切片吗?   答 可以的。抗原修复步骤不推荐用加热的方法,推荐用抗体洗脱液   问 所有操作要避光吗?   答 不需要,在常规环境下操作就可以,染料的荧光强度很高。   问 抗体修复液每一轮修复都要换吗?   答 是的,每一轮都要根据抗体选择相应的修复液。   问 染料的选择会影响后染色吗,有共定位的话怎么办?   答 共定位的情况,我们可以通过单一通道观察来好的检测各指标的分布情况,染料不会对染色有影响,串色的情况需要预实验做充足,包括抗体稀释比例,染料与放大液比例,修复条件的确定。   问 多色用的一二抗各是什么种属?   答 多色的优势在于一二抗种属无需特别要求,一抗根据样本种属选择既可,二抗根据一抗选择即可,多个抗体组合,种属不会有影响。   问 抗体洗脱和微波修复哪种方式洗脱?   答 微波修复洗脱稳定,抗体洗脱液对大多数抗体都管用,难洗的抗体延长洗脱时间就可以啦!   问 实验用时真的一天能做完吗?   答 相比普通的组织荧光实验,我们一抗的孵育时间只需室温30min,二抗和信号放大步骤只需孵育10min,能大大节约时间,五色左右可在一天内做完。   问 多色样本的寄送有条件限制吗?   答 正常的石蜡切片和组织芯片很稳定,只要防震盒常温运输即可,冰冻切片的话,需要干冰低温运输。   问 我的组织还有GFP蛋白,给结果的时候能排除干扰吗?   答 可以的,结果分析的时候可以避免绿色通道,分析软件赋予的颜色是伪彩色,可以换其他颜色。   问 我这边提供抗体的话,抗体需要满足什么条件吗?   答 抗体起码要满足IHC/IF的实验应用,各品牌供应商都会提供相应的实验验证的,我司组化抗体经过严格实验验证,是不错的选择。   问 如果我能提供抗体给你们做服务的话,需要的抗体量是多少?   答 需要的抗体量要根据样本数来,但一般来讲,50-100ul的抗体足够完成预实验+正式实验了。问 在指标与染料的搭配以及染色顺序上,有什么规律吗?   答 并没有一个特别的线性关系,和蛋白的种类、表达量以及修复条件都有关系,所以会多因素考虑,多尝试,预实验很重要。   问 TSA技术原理中有抗体洗脱的步骤,但是在你们的试剂盒步骤说明中却没有?   答 试剂盒步骤中的抗原修复过程就是抗体洗脱过程。   问 B细胞、T细胞、DC细胞常用maker能推荐下吗?   答   T细胞:CD3、CD4、CD8、FoxP3(再细化还有:GranzymeB、PD-1、TIM-3、CD45)   B细胞:CD19 ;   DC细胞:CD8α、CD11b 查看更多
新生牛血清蛋白检测指标有哪些? 新生牛血清(Newborn Calf Serum)是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。经大规模混合后除菌过滤制成成品,主要用于动物细胞培养,是医药生物技术产品的重要原材料之一,其质量好坏直接影响细胞生长情况。 总蛋白含量是新生牛血清需要检查的指标。它属于化学成分的初步分析。有人统计过国产新生牛血清的蛋白含量1,在比较各产区各年份后,发现其含量在3.7%~4.4%之间。进口新生牛血清并不与之完全一致。因为国内的血清常采自奶牛,而国外的血清常采自肉牛。蛋白质是新生牛血清的主要成分,在细胞培养中起着维持渗透压、pH 值缓冲、物质运输和提供营养、促进细胞粘附等重要作用。在胎牛血清中,其总蛋白含量要更低。 血红蛋白含量也是新生牛血清一项重要检测指标。它是在血清运输和加工过程中细胞裂解释放到血清中的。之所以检测主要是由于牛血清中血红蛋白具有氧化性,其含量过高会引起羧基的产生和脂质过氧化反应,从而导致生产细胞受损,也会增加下游纯化处理的难度,给药品质量带来安全隐患2。有报道血红蛋白具有神经毒性。 使用时常见问题及解决方法: 一、保存血清-好的方法? 血清应保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 二、如何解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。 三、如何避免沉淀物的产生? 1.解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。 2.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生 3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。 4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 5.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 四、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。 查看更多
实验室溶液、溶剂的有效期到底是多少? 化学试剂不像食品和药品有着严格的保质期,化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限,这化学试剂的保质期受到多方面因素影响有关;要根据化学性质、保存条件等,在结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用。 不同化学溶液使用期限的不同: 1.磷酸盐标准缓冲液 3个月 2.标准缓冲液 3个月 3.醋酸盐缓冲液 3个月 4.磷酸盐缓冲液 3个月 5.醋酸--醋酸铵缓冲液 3个月 6.磷酸盐缓冲液 3个月 7.草酸氰钾缓冲液 3个月 8.氢氧化钠试液 6个月 9.碘试液 6个月 10.硝酸银试液 6个月 11.硝酸汞试液本液应置棕色瓶内,密闭保存 6个月 12.氨试液本液应置橡皮塞瓶中保存 6个月 13.硫化氰试液本液应置棕色瓶内,在暗处保存 2个月 14.对二氨基苯甲醛试液 6个月 15.三氯化铁试液 6个月 16.碘化铋试液 6个月 17.氰化钾试液 6个月 18.溴化汞试液本液应置玻璃塞瓶内在暗处保存 6个月 19.亚铁氰化钾试液本液应临用新制 20.亚硫酸氢钠试液本液应临用新制 21.亚硫酸钠试液本液应临用新制 22.亚硝基铁氰化钠试液本液应临用新制 23.过氧化氢试液 6个月 24.次氯酸钠试液本液应置棕色瓶内,在暗处保存 6个月 25.草酸试液 6个月 26.草酸铵试液 6个月 27.重铬酸钾试液 6个月 28.盐酸羟胺试液 6个月 29.钼酸铵试液 6个月 30.铁氰化钾试液 6个月 31.稀铁氰化钾试液 6个月 32.浓氨试液 3个月 33.高锰酸钾试液 6个月 34.硅钨酸试液 6个月 35.铬酸钾试液 6个月 36.硝酸汞试液本液应置玻璃瓶内,在暗处保存。 6个月 37.硫代乙酰胺试液 6个月 38.硫代硫酸钠试液 6个月 39.硫氰酸铵试液 6个月 40.硫酸亚铁试液本液应临用新制。 41.硫酸钾试液 6个月 42.硫酸铜试液 6个月 43.硫酸镁试液 6个月 44.稀硫酸镁试液 6个月 45.氯化亚锡试液 6个月 46.氯化钙试液 6个月 47.氯化钡试液 6个月 48.氯化钴试液 6个月 49.氯化铵试液 6个月 50.碘化汞钾试液 6个月 51.碘化钾试液 6个月 52.碘化钾碘试液 6个月 53.溴化钾溴试液 6个月 54.碱性枸椽酸铜试液 6个月 55.碱性酒石酸铜试液 6个月 56.碱酸焦性没食子酸试液 6个月 57.碳酸氢钠试液 6个月 58.碳酸钠试液 6个月 查看更多
关于巨噬细胞你了解多少? 巨噬细胞是先天免疫系统的一种特殊的、长寿命的吞噬细胞。巨噬细胞是三种吞噬细胞类型之一,还有粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和树突状细胞(DCs)。 大多数病原体通过呼吸道、肠粘膜、皮肤病变或泌尿生殖道进入宿,NOI个遇到的就是在粘膜下组织中的巨噬细胞,它们通常是NOI个遇到病原体的防御细胞。一旦微生物进入宿主并开始复制,它就被其中一种吞噬细胞所识别,并被吞噬形成吞噬溶酶体,然后再经过酸化和酶处理,产生高活性一氧化氮和超氧自由基来杀死病原体,这一过程称为吞噬作用。 一般来说,巨噬细胞可根据其功能和活化程度分为两个亚型:经典激活的M1巨噬细胞和交替激活的M2巨噬细胞。 M1巨噬细胞主要通过先天性和适应性免疫反应在Th1细胞募集、病原体抵抗和肿瘤控制中发挥作用,在免疫失调疾病例如系统性红斑性狼疮,多发性硬化症,类风湿关节炎等会有高量的M1巨噬细胞存在。 交替激活的M2巨噬细胞在病原体寄生虫清除、抗炎反应和代谢、伤口愈合、组织重塑、免疫调节、肿瘤进展和恶性肿瘤中发挥作用,与M2细胞典型相关疾病就是过敏和哮喘。 查看更多
如何选择纯化过程中使用的色谱柱填料? 不同序列的多肽理化性质及疏水性有很大的区别,多数情况分子量小于4000和亲水性多肽用C18柱分离效果最佳,分子量大于5000和极端疏水性的多肽以C4柱分离效果/最佳,而C8柱介于C18和C4柱之间,其应用效果与C18柱更相似;对一些特殊选择性的多肽,也可选择苯基柱和聚合物色谱柱。 查看更多
为什么流动相中要加入三氟乙酸作为离子对试剂,还有哪些流动相体系或离子对试剂可用于多肽的分离纯化? 目前常用的流动相体系是水加乙腈,以三氟乙酸(TFA)为离子对试剂,根据不同多肽以合适的梯度洗脱分离多肽。加入三氟乙酸能调节洗脱液的PH,同时作为离子对试剂与多肽相互作用,从而增强分离效果,明显改善峰形。其它可用于多肽分离纯化的流动相体系或离子对试剂包括醋酸体系,磷酸体系,盐酸体系,七氟丁酸等通过适当的调节PH都能取得很好的分离效果。 查看更多
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如何溶解多肽?多肽样品在上制备柱前为什么需要进行前处理?有哪些前处理的方法? 多数多肽都可以用超纯水溶解,对于一些难溶的多肽,先要分析其氨基酸序列,对于酸性多肽,可先以小量碱性(如0.1%氨水)溶液溶解,然后稀释至所需浓度,对于碱性多肽,可先以小量酸性(如醋酸,三氟乙酸)溶液溶解,然后稀释至所需浓度,对于疏水性多肽,可用强极性有机溶剂溶解,如DMF,甲醇,丙醇,异丙醇,DMSO等。制备色谱柱子由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,因此有必要对样品进行前处理以有效延长制备柱的寿命。主要方法有5种:萃取、过滤、离心、上预柱、加在线过滤器。 查看更多
多肽含量与多肽纯度有什么区别? 一条多肽产品中除了多肽本身还包括生产过程中带入的水份及有机盐分等杂质,多肽纯度仅指多肽本身所含肽产品的含量及杂质的含量,不包括水份等杂质;而多肽含量则是指目标多肽在产品中的净含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法来检测;因此一条多肽即使纯度达到99%,因为产品中还包含水份及有机盐分等,它的含量可能也只有70-80%。 查看更多
简介
职业:上海古朵生物科技有限公司 - 销售经理
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地区:上海市
个人简介:上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多
企业简介
企业名称:上海古朵生物科技有限公司
企业性质:贸易商,代理商,
主营业务:质粒载体定制,ELISA检测试剂盒,细胞培养,抗体抗原,蛋白纯化,染色液溶液,标准品对照品,微生物培...
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