DI TNC1大鼠脑间质细胞系的应用及培养方法? DI TNC1大鼠脑间质细胞系是一种用于体外脑间质细胞研究的细胞系。间质细胞是器官内辅助实质细胞,起支持器官功能的作用。DI TNC1大鼠脑间质细胞具有多角形或圆形的形态特征,体积较大,核呈圆形。 DI TNC1大鼠脑间质细胞的培养步骤 为了成功培养DI TNC1大鼠脑间质细胞,需要准备基础培养基、优质胎牛血清以及适宜的培养条件。基础培养基中添加NaHCO3和丙酮酸钠,胎牛血清的浓度为10%。培养条件包括气相的空气和二氧化碳的比例,温度为37摄氏度,湿度为70%-80%。细胞的冻存液由90%完全培养基和10%DMSO组成,存放在液氮中。 细胞处理包括复苏细胞、细胞传代和细胞冻存。复苏细胞的步骤包括解冻、离心、补充培养基和培养过夜。细胞传代在细胞密度达到80%-90%时进行。细胞冻存时,将细胞悬液加入冻存管中,加入少量胰酶,细胞变圆脱落后加入含血清的培养基和DMSO,然后进行冻存。 DI TNC1大鼠脑间质细胞的应用 重组人白细胞介素10基因慢病毒载体的构建及其镇痛效应的研究 该研究旨在构建含有人白细胞介素10基因的重组慢病毒载体LV/hIL-10,并观察其对激活的星形胶质细胞的干预作用以及对慢性疼痛模型大鼠的镇痛效应。研究初步探讨了HMGB1在疼痛敏感性维持中的作用。 研究方法包括合成引物、PCR扩增hIL-10基因、重组质粒、转染293T细胞、包装慢病毒颗粒以及测定病毒滴度。此外,还进行了DI TNC1细胞的培养和处理实验,包括LPS的作用、ELISA测定和PT-PCR测定等。 参考文献 [1] Preversus postformlin effects of ketamine or large-dose alfentanil in the rat:discordance between pain behavior and spinal Fos-like immunoreactivity.Gilron I,Quirion R,Codere TJ,et al.Anesthesia and Analgesia.1999 [2] Kinecticanal-yses of stability of simple and complex retroviral vectors.HigashikawaF,ChangL.Journal of Virology.2001 [3] Nerve growth factor in glia and inflammatory cells of the injured rat spinal cord.Krenz NR,Weaver LC.Journal of Neurochemistry.2000 [4] Activity-dependent neuronalcontrol of gap-junctional communication in astrocytes.Rouach N,Glowinski J,Giaume C.Journal of Cell Biology,The.2000 [5] 贺正华.重组人白细胞介素10基因慢病毒载体的构建及其镇痛效应的研究[D].中南大学,2007.查看更多