森林伊人。--盖德问答-化工人互助问答社区

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用passive lysis buffer裂解细胞后？我采用的是共转染，用promega的双荧光素酶报告分析试剂盒测定双荧光素酶的活性，不知用passive lysis buffer裂解细胞后，是否需在冰上放置并在收集培养板中裂解的细胞于EP管后在涡流震荡器上震荡1分钟再离心？以前我做单荧光素酶是这样的，不知双荧光素酶有无影响？请高手解答，谢谢！查看更多 1个回答 . 6人已关注

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用凝胶渗透色谱法（GPC）测寡糖分子量，为什么算不对? 用岛津的凝胶渗透色谱（色谱柱 TSK-gel GW PWXL2500）和软件，算酶解寡糖分子的分子量，结果相差很大，用其他方法算，大约1000-2000Da（数均），而用凝胶色谱法大约只有200-300。几乎就是差一个数量级。但是，多个样品之间的变化规律，两种方法测是一致的，（哪个大，哪个小，大多少，算出来都一样）。怀疑是软件计算出了什么问题，但是我找不出来。我用的是右旋糖酐做分子量标准，是个比较通用的标准了，使用的方法，是测别的糖的方法，和文献里优化的方法不同，但是感觉应该还能用，最主要的几个峰还是有的。标准分子量，六个点，在 180 到 12000 之间，请问大家出的是什么问题？查看更多 1个回答 . 4人已关注

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楔形体自由落体进入粘性较大流体，为什么流体会被吸起来? 最近在做楔形体自由落体进入油脂的问题，油脂的粘度很大，粘度在800左右，楔形体的重量为150g，初始时锥体尖端刚好与油脂表面接触，然后模拟锥体在自重作用下，刺入油脂，看锥体在5s时间内刺入锥体的深度。按照想法，做了数值模拟。发现很奇怪的是，把油脂粘度设为800，才刚计算，锥体不但没有刺入油脂，反而油脂被吸起来了，之后把油脂粘度减到200，初始计算都比较合理，锥体逐步下降，锥体速度开始增大，之后减小，但在计算到4s时，锥体速度发生震荡，实在不明白，求各位大神指教~~~ 油脂粘度800 油脂粘度200，t=4s 油脂粘度200，锥体速度随流动时间变化查看更多 2个回答 . 9人已关注

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为什么即使同一个药物分子的不同对眏体，药效千差万别? 不要告诉简单说构象不同，与靶标结合模式不同。查看更多 3个回答 . 9人已关注

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培养液分泌蛋白质谱前处理，试剂溶液的配置方法，是用二次水还是需要用缓冲溶液配? 我想要用蛋白质谱检测实验组和对照组细胞培养液中的蛋白的表达差异情况，我打算用附件文献中的方法，但文献中只提到了所用溶液的终浓度，并未提及配制方法。现在想问一下关于所用试剂 DTT、IAA、NH4HCO3溶液的配置方法，是用二次水还是需要用缓冲溶液配？还有就是这些试剂的用量，文献中也没有提到用量。或者大家有什么其他protocol也可以交流一下，我们实验室之前没人做过蛋白组学的实验，请大家帮帮忙。查看更多 2个回答 . 6人已关注

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western测nf-kb通路可以只测总蛋白的p-nf-kb吗? western测nf-kb通路可以只测总蛋白的p-nf-kb吗？还是要分开测胞浆跟胞核的nf-kb浓度？查看更多 3个回答 . 15人已关注

#western

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需要根据p-value值，和logFC来筛选目标lncRNA，可是筛选条件设定的依据理由是什么呢? 各位朋友，我们采了病例组和对照组样本的生物标本检测差异表达的lncRNA，回来的结果有非常多探针的表达量和两组比较T检验结果的p-value值，以及两组差异倍数，下面需要根据p-value值，和logFC来筛选目标lncRNA，可是筛选条件设定的依据理由是什么呢？比方说p-value取0.05或0.001，这么决定的理由是什么呢？我查了很多文献，都没有解释理由的。查看更多 1个回答 . 10人已关注

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求助LC3，p62的转膜条件，及CST的抗体稀释比例。？我用0.22um的PVDF膜，湿转，200ma，2h，转膜后用CST的抗体1:1000孵育，二抗浓度为1:1000，最后发光内参还可以，就是LC3及p62的条带颜色很暗，且曝光时间较内参明显延长，想问一下一般LC3，p62的转膜条件：膜孔径类型，电流及时间，以及所用一抗的稀释比例。查看更多 3个回答 . 14人已关注

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在做联苯酚酰化,用三氯化铝作催化剂,酰氯作酰化剂,但是为啥根本就不反应? 我最近在做联苯酚酰化,用三氯化铝作催化剂 ,酰氯作酰化剂,但是根本就不反应,各位有没什么方法? 查看更多 4个回答 . 20人已关注

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有没有挑过悬浮细胞单克隆的? 本人小菜鸟一枚，现在在养Jurkat细胞，电转质粒后，想流式分选阳性细胞挑单克隆，可是悬浮细胞也是用有限稀释法来挑单克隆吗？因为Jurkat是聚团生长的，会不会单个细胞活不了呢？还有它聚团不是很紧密，稍微一晃就会有细胞游离脱下来，怎么判断是由同一个细胞形成的单克隆呢。。。。有没有做过的大神哪，急求助！！查看更多 4个回答 . 3人已关注

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金电极表面自组装 SAM 膜f的官能团表征？如题：在做金电极表面有机SAM膜的自组装，想做红外表征下有机物组装后在电极表面的官能团保留情况，查阅文献 SAM膜的厚度小于10 nm ,阻抗证明有SAM膜修饰，但表征公司说可能SAM膜太薄红外没有测出来。一些公司给建议了显微红外表征（不太懂这个），查阅文献也有用拉曼、XPS表征的（这些也不太懂），总之，目的是想表征金电极表面SAM 膜的官能团（烷氧基→羟基）在反应前后的变化，请各位道友给与表征方法的建议，感激不尽。查看更多 1个回答 . 14人已关注

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关于碳钢腐蚀余量的问题？ 各位大家好，有一个压力容器设计的问题，我咨询一下：对于除氧空气，设备腐蚀余量可以取0吗，材质是Q345R.查看更多 7个回答 . 1人已关注

#腐蚀余量

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求收留？ 考华中科技大学药学政治57? ?英语一??75? ?? ???药学综合207? ? 总分339 四六级都过了，有相关的实验经历！查看更多 5个回答 . 3人已关注

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碳纳米管表面氧化问题？ HNO3+H2SO4氧化碳纳米管用超声处理 HNO3直接氧化碳纳米管没用处理为什么求助！！！查看更多 1个回答 . 8人已关注

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V型往复式压缩机泄压？想请教下，V型往复式压缩机每次启动前都是怎么泄压的。没有卸荷器，安全阀也没有副线，只能通过排污罐下的排污阀泄压。你们用的也是这样吗，这样符合要求吗，我们是天然气压缩机。查看更多 1个回答 . 10人已关注

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请问有这个物质Na(NH4)(PO3)OH.4H2O存在吗? 做实验中，合成了混合物，经过XRD分析，感觉Na(NH4)(PO3)OH.4H2O对应的峰匹配度最高，但是这种物质存在吗？是什么物质？大家有没有认识的？谢谢大家啦查看更多 1个回答 . 11人已关注

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求助废料中含量较少元素的晶体表征？研究固废中W元素的赋存状态，WO3含量约为6%，经过XPS 测试分峰得出赋存形式为WO3，但是XRD中未发现WO3的晶峰。根据文献调研得知有可能为高分散，非晶态WO3或固溶体，请问有什么表征方法能够确定W元素晶体结构？查看更多 1个回答 . 9人已关注

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有人用多普勒血流仪测大鼠脑血流么？大家在选择位置时是怎么决定的呢? 大家在选择位置时是怎么决定的呢？我一直都是看文献，做MCAo的时候参考MACo的文献，做全脑缺血的时候参考全脑缺血的文献。可今天老师问了我一句，那个位置你剖开颅骨看过有血管么？我蒙了，多普勒血流仪如果不在血管上测到的不是血流么？文献上的位置他们是怎么确定的呢？大家都说说测的是什么血流，位置是哪里吧查看更多 4个回答 . 4人已关注

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碳-14定年法？ 查看更多 1个回答 . 13人已关注

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求教羧酸和胺的酰化？二甲基脲和氰基乙酸做酰基化反应。目前用的是醋酸酐做缩合剂，有个疑问，生成的水和酸酐生成乙酸，虽然工艺是蒸馏把乙酸蒸馏出去，但总会有没来得及蒸不出去的啊，难道不会和氰乙酸竞争反应吗。如果用溶剂回流分水，dmap催化，是否可行。求教查看更多 4个回答 . 15人已关注

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