你尽情哭--盖德问答-化工人互助问答社区

你尽情哭

影响力0.00

经验值0.00

粉丝7

化工操作

关注已关注 私信

western-blot实验结果影响因素有哪些? 1. 样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。2. 凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝胶的要求较高，分离胶的PH值应在8.8左右，而浓缩胶的PH应在6.8左右，最好不要差过0.5个PH单位，因为这个PH条件是保证电泳液中的甘氨酸不电离的必要条件，也是保证能充分压缩样品的前提。因此，制备凝胶的时候所用Tris-HCl 缓冲液的PH值是否稳定是很重要的。 3. 点样。样品尽量不要与电泳液混合，这样能提高浓缩的效果，因为电泳液PH值为8.3，而样品为7.5，混合后会影响到样品的PH值，进而影响浓缩效果。因此，建议点样最好用长枪头，或者加样器，轻轻的将样品加到孔的底部。 4. 电泳缓冲液。尽量用新鲜配制的。这样能保证PH值和离子强度的稳定。 5. 电压条件。我们经常用的浓缩时80V，分离时100V比较好，条带很平。 6. 转膜。膜的选择主要从实验目的和实验要求来考虑。例如，要做分子量小于20kD的小蛋白，0.45μm的NC膜是不可取的，因为这样可能会使得蛋白因透过膜孔而造成膜结合的目的蛋白量不确定，从而影响到最终结果的可靠性。而如果所分离的蛋白需要进行测序，则非PVDF膜不可，因为只有PVDF膜才能经受住严酷的清洗条件。 7. 抗体杂交与底物显色。一抗尽量选择小鼠或者兔来源的单克隆抗体，还有要注意所用的抗体是否能够识别变性条件下的目标蛋白；二抗一般都是效价很高的，只要室温下杂交1小时就可以了，适当延长也是可以的。另外，要选择灵敏度较高的化学反应底物。如超敏型ECL发光液Enlight-Plus，检测级别可达pg级，发光时间长，稳定。查看更多 1个回答 . 7人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

求问常见气体的红外光谱信息？楼主最近在分析热解产物，目前猜测可能有CO，CO2，NH3，NO，NO2以及氰化物（RCN）等。请问各位专家，有没有文献专门讲这些气体的红外啊？尤其是氰化物，这个东西的红外哪里能查到呢？万谢！金币可再加！查看更多 1个回答 . 19人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

气相平衡管应该如何设置? 假如有一个产品从生产车间用泵输送至罐区（有多个成品罐），罐区在通过泵打至装车鹤管。气相管线怎么设置比较好？是不是车间与罐区的气相管，罐区与装车的气相管要分别设置呢？查看更多 1个回答 . 16人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

自洁素中的絮状物？ 配好的自洁素效果可以，就是兑水后两天后有絮状物析出，有人知道是怎么回事？查看更多 5个回答 . 10人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

关于甲型法兰与乙型法兰？ NB/T47021甲型法兰尺寸没有乙型法兰结构不合适怎么办?设计压力0.375MPa，直径2000，介质除草剂查看更多 1个回答 . 18人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

哪儿有提供摩擦磨损实验的，多谢？ 哪儿有提供摩擦磨损实验的，多谢查看更多 7个回答 . 15人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

丙烯酸酯改性水性聚氨酯求帮助，谢谢？丙烯酸酯改性水性聚氨酯后，吸水率上升挺多，强度伸长率都降低挺多了，感觉丙烯酸酯没有接枝到聚氨酯上，用的丙烯酸酯甲基丙烯酸羟乙酯，甲基丙烯酸甲酯，丙烯酸丁酯，总占wpu35%，引发剂是过硫酸钾，引发时转速到有漩涡，大概400r,能帮忙解决下吗，谢谢查看更多 1个回答 . 13人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

植物组织培养？ 请问只做组培的实验，够写硕士论文吗查看更多 2个回答 . 7人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

化工中级工程师怎么评啊？ 2019年报名时间有谁知道嘛，怎么评，有过来人吗查看更多 1个回答 . 1人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

大家来看看这个反应怎么做啊？ 反应如图所示，原料有大量不反应，基本的不到产物，催化剂是Ru(Ph3P)3COH2，这个反应有什么注意事项吗，文章里只有简短的几句话。 3.png查看更多 4个回答 . 6人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

紫外漫反射数据的处理？ 第一次测固体紫外，数据纵坐标是反射率，想转化为吸光度，但反射率有的值是负值，该如何处理啊查看更多 7个回答 . 17人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

二氯异氰尿酸钠能不能用于洗洁精的防腐? 二氯异氰尿酸钠能不能用于洗洁精的防腐？查看更多 4个回答 . 19人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

请教一个无机物的红外光谱图？红外光谱在2800附近没有ch的伸缩振动峰，应该不是有机物，属于无机物。 3421和1645应该是水的伸缩振动和弯曲振动峰。1432和1114处的峰是啥呢？ catch(08-12-11-31-44).jpg查看更多 1个回答 . 10人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

顺酐结块？ 顺丁烯二酸酐结块了，白色的，颜色没有变化，还能继续使用么？查看更多 1个回答 . 18人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

钛注射成型注射过程中的问题？我是做钛注射成型的研究僧一枚，目前遇到的问题是我在注射的时候无法储料(就是在每次注射完毕下次注射前的一个存料过程，用这边师傅的话来说就是熔胶)，我问师傅原因，师傅说是粉太粗粘结剂粘不上，(我钛粉用的-300目，大概48微米，粘结剂用的石蜡基体系)，我现在想问，1是钛粉太粗的原因吗？2如果是的话原因是什么，为什么粗了就不行？查看更多 1个回答 . 19人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

银分子筛的活化问题？ 请问买来的作为除氧剂用的银分子筛怎么活化？除了银分子筛之外还有什么可以作为除氧柱中的填料吗？查看更多 1个回答 . 4人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

拉曼光谱交流？拉曼谱峰强度不佳？峰位和文献不一致？怎么才能得到一幅较好的拉曼光谱图，本人结合自己拉曼测试经验，拉众多同仁一起，希望可以一起学习拉曼光谱，欢迎拉曼大牛和对拉曼有疑惑的同学一起交流查看更多 1个回答 . 16人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

甲氧氟烷（Methoxyflurane）？ 查看更多 1个回答 . 14人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

地高辛原料药购买？ 请问哪位大佬知道地高辛原料药在哪购买，价格如何?谢谢大家! 查看更多 2个回答 . 9人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

求Nb2O5晶体的CIF文件？麻烦哪位帮我下载Nb2O5晶体的俩CIF文件：pseudo-hexagonal phase (JCPDF No.28-0317), 和 orthorhombic phase T-Nb2O5 (JCPDF No.30-0873)。请发至邮箱：fireice_cool@qq.com 谢谢查看更多 3个回答 . 5人已关注

关注问题已关注 回答

登录后参与回答

上一页1 2 3 4 5 6 7 8 9 10下一页

简介

职业：常州吉恩药业有限公司 - 化工操作

学校：平顶山教育学院 - 数学与财会电算化系

地区：江苏省

个人简介：有时一个人静静的发呆查看更多

喜爱的版块返回首页

已连续签到天，累积获取个能量值

第1天
第2天
第3天
第4天
第5天
第6天
第7天