如何使用对乙氧基苯磺酰氯进行氨基酸衍生? 氨基酸是构成酶和蛋白质的基本单元,对其进行衍生后再进行分析是一种常用的检测方法。本文介绍了使用对乙氧基苯磺酰氯进行氨基酸衍生的制备方法和操作步骤。 制备方法 制备对乙氧基苯磺酰氯的方法如下:将二氯甲烷、9和三乙胺加入叔丁胺中,然后加入冰水,分层后用二氯甲烷进行萃取,最后经过柱色谱分离得到对乙氧基苯磺酰氯。 使用对乙氧基苯磺酰氯进行氨基酸衍生的方法如下:将对乙氧基苯磺酰氯溶解于THF中,加入叔丁醇钾和氨基酸,搅拌反应后蒸干溶剂,经过柱色谱分离得到衍生物。 对乙氧基苯磺酰氯衍生法 对乙氧基苯磺酰氯衍生法操作简单,只需将对乙氧基苯磺酰氯加入含有氨基酸的碳酸氢钾缓冲溶液中,在室温下避光反应一定时间即可完成衍生。该方法适用于临床检测和科研需要,具有简单、快速和样品处理简单的优点。 然而,对乙氧基苯磺酰氯衍生法存在一些缺点,包括反应速度较慢、水解产物干扰测定、衍生产物对紫外光照敏感以及易生成多级衍生产物。因此,在选择衍生试剂时需要考虑衍生速度、分析灵敏度、检测二级氨基酸能力和干扰因素等指标。 参考资料 [1] 瞿其曙,汤晓庆,胡效亚,等.柱前衍生法在氨基酸分析测定中的应用[J,化学进展,2006,18(6):104-108. [2] TANG Tao,SHI Tian-yu,QIAN Kun,et al. Deter-mination of biogenic anines in beer with pre-columnderivatization by high performance liquid chromatogra-phy[J,Journal of Chromatography B,2009,877:507-512. [3]Nishihashi T, Trandafir CC, Wang A, et al.Enbanced reacti-vity to vasopressin in rat basilar arteries during vasospasmafter subarachnoid hemorrhage[J]. Eur J Pharmacol,2005,513(1-2): 93-100.查看更多