人游离前列腺特异性抗原(FPSA)ELISA KIT是一种采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）的检测方法。该方法通过在预先包被抗体的微孔中加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体，经过温育和洗涤后，使用底物TMB进行显色。根据颜色的深浅和样品中的OD值，可以计算出样品的活性。

操作步骤如下：

1. 从室温平衡20分钟后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔中加入不同浓度的标准品，样本孔中先加待测样本，再加样本稀释液，空白孔不加。

3. 在标准品孔和样本孔中加入HRP标记的检测抗体，使用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60分钟。

4. 弃去液体，使用洗涤液洗板5次。

5. 在每孔中加入底物A和B，37℃避光孵育15分钟。

6. 在每孔中加入终止液，15分钟内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

根据测定结果，可以进行结果判断。

人游离前列腺特异性抗原(FPSA)ELISA KIT的应用

人游离前列腺特异性抗原(FPSA)ELISA KIT可用于PSA的相关变数在PSA灰区患者中前列腺癌诊断的研究。游离前列腺特异性抗原与总前列腺特异性抗原比值(free prostate specific antigen/total prostate specific antigen ratio F/TPSA)、前列腺特异性抗原密度(prostate specific antigen density PSAD)在总前列腺特异性抗原(total prostate specific antigen TPSA)处于4~10ng/ml时对前列腺癌(prostate cancer PCa)患者的诊断应用价值。通过酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay ELISA)方法进行检测，并根据计算出的F/TPSA比值和PSAD值，可以提高对前列腺癌患者的诊断准确性。

参考文献

[1]ProstatecancerIncidenceandMortalitytrendsin37europeancountries:Anoverview.BrayF,Lortet-TieulentJ,FerlayJ,FormanD,AuvinenA.Europeanjournalofcancer.2010

[2]Measurementofprostate-specificantigeninserumasascreeningtestforprostatecancel.CataloneWJ,SmithDS,RatliffTL.Netherlands Journal of Medicine.1991

[3]Usefulness and predictive value of PSA density,adjust by transition zone volume,in men with PSA levels between 2and 4 ng/ml.Janane A,Hajji F,lsmail T,Jawad C,Elondo JC,Dakka Y,et al.Actas Urologicas Espanolas.2012

[4]Epidemiologyofprostatecancerandtreatmentremarks.StefanoArcangeli,ValentinaPinzi,GiorgioArcangeli.WorldJRadiol.2012

[5]孙金涛.PSA的相关变数在PSA灰区患者中前列腺癌诊断的研究[D].青海大学,2015.