常见ELISA试剂盒试验技能要点？

  1.准备好所有试验额定所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等;

  2. 依据检测标本数量确认所需试剂的量;

  3. 按阐明书将所用试剂平衡至室温，制造所需试剂;

  4. 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备，尽量分装做备份。短期内无法试验者，留意低温保存。

  试验中为了确认信号和背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预试验中进行彼此相抗的滴 定。同时，应包括在适当范围内的规范品的系列稀释。按试剂阐明书惯例供给的范围进行操作。

  规范品的制造：对于每种细胞因子应仔细阅读阐明书，留意每批的细节。在运用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可 能多地回收其间的细胞因子。依据每批阐明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。

  为了优化灵敏度，主张过夜孵育规范品和标本。若运用过氧化物酶作为显色体系，应禁止在洗液和稀释液中加叠氮 钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。当测定混合液体中的抗原时，如血清，主张在标本稀释液中加不相干的Ig。

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