本文主要讲述 Trinder's反应中3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠等四色原物质的比较，Trinder's反应常用于底物氧化酶催化的生化检测项目，色原物质的选择十分必要

简述：3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠，英文名称：Sodium 3，5-dichloro-2-hydroxybenzenesulfonate，CAS：54970-72-8，分子式：C6H3Cl2NaO4S，外观与性状：白色结晶粉末。3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠是Trinder 试剂的组分，用于与过氧化物酶一起测量过氧化氢的产生。3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠用于尿素、胆固醇比色测定以及用作过氧化氢酶光度法测定用的显色底物。

1. Trinder's反应中四种色原物质的比较：

（1）报道一

李研等人对应用于Trinder's反应中的苯酚、3，5-二氯-2羟基苯磺酸钠(色原1)、N-[2-[乙基(3-甲基苯基)氨基]乙基]乙酰胺(色原2)和N-乙基-N-乙磺酸钠间甲苯胺(色原3)进行呈色比较。

方法为：配制不同浓度的H2O2溶液分别与4种色原物质反应，进行吸收峰扫描。苯酚的最大吸收峰为505nm，范围460～555nm；色原1的最大吸收峰为515nm，范围480～545nm；色原2的最大吸收峰为555nm，范围520～585nm；色原3的最大吸收峰为555nm，范围520～585nm；吸收峰扫描发现4种色原的呈色反应均稳定至少45min以上；反应浓度为8.71μmol/L的H2 O2与苯酚、色原1、色原2和色原3的最大吸光度分别为0.262、0.921、0.581和0.617OD；呈色能力强弱依次为色原1、色原3、色原2和苯酚。Trinder's反应常规用于底物氧化酶催化的生化检测项目，色原物质的选择十分必要。

（2）报道二

张孝山等人评价色原对Trinder'方法测定微量葡萄糖的呈色效果。方法:应用苯酚和3种人工合成色原:3，5-二氯-2羟基苯磺酸钠(色原1)、N-2-[乙基(3-甲基苯基)氨基]乙基乙酰胺(色原2)及N-乙基-N-乙磺酸钠间甲苯胺(色原3)对葡萄糖氧化酶偶联过氧化物酶法测定微量葡萄糖的作用特点进行研究。

结果:使用4种色原物质测定葡萄糖的反应曲线均类似，但呈色强度不同，苯酚呈色强度最差，色原1最强，色原2和3类似；反应曲线为类似0级反应模式；两点定标测定优于单点定标测定；批内不精密度范围，苯酚:0.为%～8.61%，色原1:0.62%～1.28%，色原2:0.83%～2.60%，色原3:0.37%～3.80%，色原之间差异无统计学意义。

应用举例：

（1）应用一

梁朝阳等人报道了一种定量测定人体血清中低密度脂蛋白胆固醇含量的试剂，该试剂由分别放置的试剂I和试剂II组成，其中，试剂I含有GOOD'S缓冲液、聚阴离子、胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、4-氨基安替吡啉；试剂II含有GOOD'S缓冲液、3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠、过氧化物酶、表面活性剂。该试剂盒及检测方法只需几微升血清，无需离心或电泳等分离处理，操作简便，可满足全自动化分析的要求，适用于大规模样品的及时准确检测。

（2）应用二

翟彤宇等人报道了一种快速检测糖尿病试剂盒，包括酶试剂、酚试剂和已知浓度的葡萄糖标准溶液，酶试剂为含有4-氨基安替比林，过氧化物酶，葡萄糖氧化酶的磷酸盐缓冲溶液，酚试剂为含有4-氯间苯二酚和3，5-二氯-2-羟基苯磺酸钠的水溶液。该试剂盒解决了国产葡萄糖氧化酶试剂反应速度慢的问题，使其由原来37℃、近30min完成测定缩短为室温、3～4min完成测定；检测灵敏度提高2倍。

参考文献：

[1] 张孝山，李研，李立新，等. 微量葡萄糖测定中不同色原的作用研究[J]. 天津医药，2004，32(12):746-748. DOI:10.3969/j.issn.0253-9896.2004.12.009.

[2] 李研，李立新，李娜，等. Trinder's反应中四种色原物质的比较[J]. 中国医学检验杂志，2004，5(5):407-409.

[3] 浙江凯成生物科技有限公司. 一种低密度脂蛋白胆固醇的定量测定方法、试剂及试剂盒. 2015-06-03.

[4] 河北农业大学，:CN200910158344.4[P]. 2011-01-12.