培养基是一种人工配制的混合物质养料,用于支持微生物和生物细胞组织的生长和研究。DMEM和DMEM-12是一种最令人满意的培养基,通过补充生长因子和激素,可以满足多种细胞类型的研究需求。DMEMF-12配方中含有15mMHEPES缓冲液,以补偿因消除血清而导致的缓冲能力损失。这种培养基含有L-谷氨酰胺和15mMHEPES,是一种无菌液体培养基,含有必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子和微量元素,非常适合支持广泛的哺乳动物细胞系的生长。
DMEMF-12培养基含有L-谷氨酰胺和HEPES,仅供研究使用,不适用于人类或动物用途,也不适用于体外诊断程序。
通过实验研究发现,在DMEMF-12培养基中,A系小鼠胚腭突上皮和问充质细胞可以进行原代和传代联合培养,并保持其生物学特性。通过机械分离和胰蛋白酶消化法,可以快速获得高成活率的A系小鼠胚腭突细胞,并通过流式细胞仪、相差显微镜和光镜等观察其DNA和蛋白质合成、细胞骨架及其结构。实验结果显示,联合培养的A系小鼠胚腭突细胞中,腭突上皮和问充质细胞均能较好地生长,细胞形态和细胞骨架结构也得到了保持。流式细胞仪检测结果显示,细胞DNA和蛋白质含量丰富,细胞增殖活跃。因此,A系小鼠胚腭突上皮和问充质细胞联合培养模型可以较好地保持体内胚腭突的上皮细胞和问充质细胞的基本特征。
[1] 中国卫生管理辞典