细胞培养中常见的细胞污染物"黑胶虫"及其分解复合物，对细胞生长和实验结果产生负面影响。目前，许多细胞都存在"黑胶虫"污染现象，这给细胞培养和后续实验带来了很大的困扰。"黑胶虫"污染的细胞具有特征：细胞周围和培养液中有大量的"小黑点"，随着培养时间的延长，"小黑点"数量增多，更换培养液或洗涤细胞无法去除；"小黑点"污染的细胞营养消耗快，需要频繁更换培养液；"黑胶虫"污染的细胞生长缓慢，细胞状态差，甚至可能导致细胞形态改变。为了有效清除"黑胶虫"污染，可以使用特殊成分的"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)。

清除方法

1、根据所培养细胞的特性，将"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)配制成相应的完全培养基。

2、将50～100万个细胞铺到60mm的细胞培养皿内，加入4ml"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)孵育细胞，（也可以与细胞正常培养方法相同，直接将"黑胶虫"清除完全培养加入到培养器皿中孵育细胞）。

3、次日更换新鲜的"黑胶虫"清除完全培养基，并更换新的培养器皿；之后每2～3天更换1次培养液，换液时用无菌的平衡盐溶液洗涤细胞1～2次；期间如果细胞密度过大，请保持细胞密度适当（贴壁细胞可能需要用胰酶消化）。

4、使用"黑胶虫"清除培养基3天之后即可见清除效果，连续使用12～14天即可将"黑胶虫"清除，若"黑胶虫"污染较为严重，可延长处理3～5天。

5、为了避免细胞再次受到"黑胶虫"的污染，建议在清除"黑胶虫"后继续使用"黑胶虫"清除培养基，以达到预防的效果。

参考文献

[1]"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)使用说明