免疫荧光染色事项注意您知道吗？

  从事免疫荧光染色该注意哪些方面呢?免疫荧光染色属于常规病理染色，从事这类染色该注意以下几点：

  (1) 古朵生物提醒：由于荧光容易淬灭，一般仅能维持几个小时，因此，荧光二抗应避光保存，即从加入荧光二抗以后的步骤中都要尽量避光操作。封片后应尽早照相，目前有市售的荧光增强剂，可使荧光在4℃保存1-2周仍不淬灭。

  (2) 免疫荧光染色常用的荧光素有以下几种，绿色荧光：FITC、 Alexa Fluor 488和GFP;红色荧光：TRITC、Cy3、Alexa Fluor 568&594和MitoTrackerRed;蓝色荧光：Hoechst、DAPI;黄色荧光：YFP、Fluo-3和Rhoda-minel23等。

  (3)不同的荧光素激发的波长不同，因此，选用滤光片时要注意。一般紫外线的激发波长为334-365nm，蓝光的激发波长为435-490nm，绿光的激发波长为546nm左右。

  (4) 荧光显微镜应提前至少15 min打开汞灯预热。关闭30min后方可再开启。

  (5)免疫荧光染色的组织要求很高，载玻片及盖玻片要干净无杂质。进行荧光染色时，需注意染液的pH、浓度和染色温度，还要避免对荧光有熄灭作用的物质的接触。

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