本文介绍了一种从植物组织中提取高纯度总RNA的方法。该方法适用于富含多酚或淀粉的植物组织，如马铃薯块茎、白松松针或嫩苗以及西红柿叶等。每100 ml试剂可以处理100 mg组织200次。为了提取RNA，需要准备液氮、研钵、无RNase离心管、5 M NaCl（无RNase水配制）、氯仿、异丙醇、75%乙醇（无RNase水配制）和无RNase水。

提取操作步骤

1. 取不多于0.1g植物组织，在液氮中研碎，转移到1.5 ml离心管中，加入0.5 ml提取试剂，轻轻振荡混匀。

注：振荡时要避免过于剧烈，以免导致基因组DNA污染。

2. 将离心管放置在室温下静置5分钟。

3. 在4℃条件下以12000 rpm离心2-3分钟，将上清转移到新的无RNase离心管中。

4. 在上清中加入0.1 ml 5 M NaCl（无RNase水配制），轻轻混匀。

5. 加入0.3 ml氯仿，上下颠倒混匀。

6. 在4℃条件下以12000 rpm离心10-15分钟，将上层水相转移到新的无RNase离心管中。

7. 加入与所得水相等体积的异丙醇，混匀，室温放置10分钟。

8. 在4℃条件下以12000 rpm离心10-15分钟。弃掉上清液，注意不要倒出沉淀。加入1 ml 75%乙醇冲洗沉淀。（沉淀可能很难看见，操作时要小心。）

9. 在4℃条件下以5000-7000 rpm离心3分钟。倒出液体，注意不要倒出沉淀。剩余的少量液体短暂离心，用枪头吸出，室温晾干1-2分钟至沉淀干燥。

10. 加入适量的无RNase水充分溶解RNA，然后在-70℃保存。

注意：本试剂具有刺激性味道，请在通风处进行操作。

主要参考资料

[1] 植物RNA提取试剂产品说明书