探究6-二甲基氨基嘌呤在诱导三倍体方面的应用,有助于深入了解其作用机制和潜在的应用前景。
简述:6-二甲基氨基嘌呤,英文名称:N6,N6-dimethyladenine,CAS:938-55-6,分子式:C7H9N5,外观与性状:白色至淡黄色晶体粉末,密度:1.365 g/cm3,折射率:1.713。6-二甲基氨基嘌呤是一种丝氨酸苏氨酸蛋白激酶抑制剂,能够抑制胚泡破裂以及卵母细胞的减数分裂成熟。
应用:
1. 诱导扇贝异源三倍体
杜方勇等人用6-二甲基氨基嘌呤处理栉孔扇贝♀×虾夷扇贝♂受精卵,抑制第二极体释放诱导异源三倍体。水温17 ℃下,分别进行了不同起始处理时间(受精后20~40 min)、不同药物处理浓度(40~80 mg/L)和不同持续处理时间(5~20 min)的实验。起始处理时间实验以受精后35 min开始处理效果最好,三倍体率为51.8%,D形幼虫成活率可达78%;药物处理浓度和持续处理时间最佳组合为60~70 mg/L 6-DMAP处理20 min,三倍体率可达59.65%,D形幼虫成活率为22.05%。综合考虑,诱导扇贝异源三倍体的适宜参数为:当50%受精卵排出第一极体时,以60~70 mg/L 6-DMAP处理20 min。
2. 诱导泥蚶三倍体
吕振明等人用6-DMAP抑制泥蚶受精卵第二极体的释放诱导三倍体的产生。实验设三个6-DMAP浓度梯度,分别为300μmol/L、450μmol/L、600μmol/L,处理时机为受精卵第一极排放体30%,处理持续时间为10min。结果为:三倍体诱导率300μmol/L时为35.5%,450μmol/L时为48.6%,600μmol/L时约为58.5%。
3. 诱导长牡蛎"海大2号"三倍体
程庚等人为探索低渗和6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)诱导长牡蛎(Crassostre-gigas)三倍体最佳条件以及6-DMAP和低渗配合使用诱导三倍体的可行性,本研究通过低渗、6-DMAP以及6-DMAP与低渗配合三种方法诱导长牡蛎"海大2号"三倍体。研究显示,低渗处理组中,当第一极体(PB1)出现40%时,在盐度为8的低渗海水中持续处理15 min,综合评价指数最高,为34.33%,此时2日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为73.77%±1.89%和45.78%±6.23%,8日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为50.65%±4.89%和21.17%±5.54%。6-DMAP处理组中,当PB1出现40%时,75 mg/L的6-DMAP持续处理15 min,综合评价指数最高(36.52%),此时2日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为74.81%±0.68%和46.30%±1.54%,8日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为60.37%±0.61%和30.25%±2.85%。6-DMAP和低渗配合组中,当PB1出现40%时,在盐度为8的低渗海水中,以50 mg/L的6-DMAP持续处理15 min,综合评价指数最高(36.18%),此时2日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为74.34%±3.49%和45.07%±4.41%,8日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为68.23%±2.52%和40.42%±4.30%。综合比较以上三种方法,通过6-DMAP和低渗配合诱导获得三倍体的倍率更稳定,幼虫存活率更高。研究结果可为长牡蛎"海大2号"三倍体培育提供参考资料。
4. 诱导九孔鲍三倍体
当50%九孔鲍受精卵出现第一极体后,用6-DMAP不同的浓度进行不同的持续时间诱导三倍体。结果表明,6-DMAP的诱导浓度为300μmol/dm3、诱导持续时间为10min时,其诱导的三倍体率为90%以上,并且胚胎的孵化率高达85%,幼体的畸形率较低,为50%~55%。
参考文献:
[1] 杜方勇,杨爱国,刘志鸿,等. 6-二甲基氨基嘌呤诱导扇贝异源三倍体[J]. 海洋水产研究,2004,25(4):13-16. DOI:10.3969/j.issn.1000-7075.2004.04.003.
[2] 吕振明,李太武,柴雪良,等. 6-二甲基氨基嘌呤诱导泥蚶三倍体实验[J]. 河北渔业,2002(1):15,20. DOI:10.3969/j.issn.1004-6755.2002.01.006.
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