右旋酮洛芬是一种重要的手性化合物,对其测定方法的研究具有重要的理论和应用价值。
背景:酮洛芬是2-芳基丙酸类非甾体抗炎药,临床应用广泛,此类药物均具有一个手性中心,一般都以外消旋体的形式应用于临床,然而只有其右旋体才有抗炎抗风湿和镇痛作用,左旋体几乎没有药理活性。据文献报道,右旋酮洛芬的药理活性是外消旋体的两倍,且前者的毒性比后者小,因此可减轻肝肾的负荷及胃肠道反应。有许多文献探讨了酮洛芬血药浓度的检测方法, 但少见右旋酮洛芬的有关报道。
1. 血浆中右旋酮洛芬的HPLC测定
1.1 陈亮等人采用高效液相色谱法测定家兔血浆中右旋酮洛芬浓度。方法:用乙醚提取血浆样品中右旋酮洛芬在C18柱上,以甲醇 -50 mmoL·L-1磷酸二氢钠(30∶70)为流动相进行分离,于260 nm检测。结果为线性范围为0.05~25 μg·mL-1,回收率为99,92%~100,54%,日内RSD为0,56%~2,94%,日间RSD为0,6%~2,89%。该法简便、准确,重现性好,用于测定6只家兔口服右旋酮洛芬 -β-环糊精缓释微球血药浓度取得良好结果。
1.2 管潇等人建立HPLC法测定人血浆中右旋酮洛芬的浓度。方法:血浆样品以乙醚为萃取剂,萘普生为内标物;采用Shim-pack VP-ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm); 流动相为乙腈-5 mmol·L-1磷酸缓冲液(22:78,pH=6.8),流速1.0 ml·min-1;紫外检测波长262 nm。结果为右旋酮洛芬血浆样品的线性范围为0.02-20.00μg·ml-1,r=0.9999,n=8。萃取回收率和方法回收率分别为72.28%-75.63%和104.0%-107.8%(n=5),日内、日间RSD分别为0.6%-6.2%。
该方法测定血浆中右旋酮洛芬的浓度,右旋酮洛芬及萘普生与血浆内源杂质峰完全分离,方法简单、快捷、准确、重现性好。
2. 右旋酮洛芬的含量测定
2.1 紫外吸收特征
称取右旋酮洛芬对照品,加入甲醇溶液稀释至适宜浓度,按紫外分光光度法,以甲醇作为空白溶剂,在200-400 nm波长范围内进行紫外扫描,右旋酮洛芬在254 nm处有最大吸收,芳环的共轭K带吸收。参照在《中国药典》2010版选择255 nm作为检测波长。(根据消旋体推测)。
2.2 色谱条件与系统适用性试验
参照《中国药典》2010版酮洛芬检测方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾68.0 g,加水溶解并稀释至1000 mL,用磷酸调节pH值至3.5±0.05)-乙腈-水(2∶43∶55)为流动相;检测波长为255 nm。 柱温为室温;理论板数按酮洛芬峰计算不低于2000。
2.3 含量测定方法
精密称量取本品1.0 mL至25 mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,再取1.0mL稀释10倍,摇匀,以0.22 μm微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试液。另取右旋酮洛芬对照品适量,精密称定,加甲醇溶解配制成浓度为100μg/m L的对照品溶液。精密量取上述两种溶液各10 μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算右旋酮洛芬的含量。右旋酮洛芬质量在0.5-2μg范围内质量与峰面积线性关系良好。
参考文献;
[1]孙巍. 右旋酮洛芬注射液的研究[D].吉林大学,2013.
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