本文将介绍盐酸阿考替胺三水合物含量测定的方法，以便准确、可靠地确定盐酸阿考替胺三水合物的含量。

简述：盐酸阿考替胺三水合物 (acotiamide hydro-chloride trihydrate，1)，化学名为 N-[2-( 二异丙基氨基 ) 乙基 ]-2-[(2- 羟基 -4,5- 二甲氧基苯甲酰基 )-氨基 ] 噻唑 -4- 甲酰胺盐酸盐三水合物，是由日本泽里新药株式会社研发的一种促进胃蠕动的毒蕈碱 M 1 和 M 2 受体阻断剂，2013 年 2 月在日本上市，临床用于治疗功能性消化不良及其他胃肠道疾病，如胃麻痹、胃食管反流、肠易激综合征和便秘等。

1. 合成：

以2，4，5- 三甲氧基苯甲酸为起始原料，以氯化亚砜作缩合剂，成酰氯后与 2- 氨基噻唑 -4- 甲酸乙酯缩合得到 2-[(2,4,5- 三甲氧基苯甲酰基)氨基]-4-噻唑羧酸乙酯，以盐酸吡啶为原料，选择性脱甲基得到 2-[(2- 羟基 -4，5- 二甲氧基苯甲酰基)氨基]-4- 噻唑羧酸乙酯，经 N,N- 二异丙基乙二胺胺解，最后与盐酸成盐得盐酸阿考替胺。

2. 含量测定：

盐酸阿考替胺三水合物是一种用于改善胃肠蠕动的药物，常用于治疗功能性消化不良。作为一种新药，关于其分析测定方面的报道相对较少。已有的报道采用高效液相色谱（HPLC）方法，以甲醇-磷酸二氢钾-辛烷磺酸钠为流动相进行测定。然而，由于采用了离子对试剂辛烷磺酸钠，导致分析过程相对耗时且保留时间不够稳定。

周圩群等人基于盐酸阿考替胺三水合物为两性化合物，建立了测定其含量的高效液相色谱分析方法。测定方法采用 C18 色谱柱(4.6 mm ×150 mm，5 μm)，以甲醇 －20 mmol/L 乙酸铵水溶液 =45 ∶ 55(V/V)为流动相(pH =6.8)进行等度洗脱，紫外检测波长选择 280 nm，盐酸阿考替胺三水合物的保留时间合适且峰形较好，出峰时间为 8 min，总分析时间为 23 min。实验方法如下：

（1）色谱条件

色谱柱:Ultimate XB-C18 柱(4.6 mm × 150mm，5 μm)；柱温 30℃;流动相:甲醇-20 mmol/L 乙酸铵水溶液=45∶55(V/V);流速 1.0 mL/min;进样量 10 μL；检测波长 280 nm。

（2）对照溶液及样品溶液的配制

精确称取盐酸阿考替胺三水合物对照品 25 mg于25 mL 容量瓶中，以流动相溶解，并定容，配制成1 mg/mL 的储备溶液，分别用流动相稀释成0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.02、0.01、0.005、0.002、0.001、0.0006、0.0005 和 0.0001 mg/mL 的系列标准溶液，待用。精确称取盐酸阿考替胺三水合物粗品 10 mg 于25 mL 容量瓶中，以流动相溶解并定容。

结论：在优化色谱条件下，盐酸阿考替胺三水合物的浓度在 0.0006 ～1.0 mg/mL 范围内线性关系良好，检出限为 0.0002 mg/mL，日内、日间测定的相对标准偏差(ＲSD)均小于 1.0%。采用该方法无需添加离子对试剂，有助于色谱系统快速平衡，提高了实验的重复性和操作性，可用于快速分析盐酸阿考替胺三水合物工业品，实现对原料药的质量控制。

参考文献：

[1]刘晓莲,马宁宁,杨藏军等. 盐酸阿考替胺三水合物合成工艺研究 [J]. 煤炭与化工, 2023, 46 (04): 119-122+160. DOI:10.19286/j.cnki.cci.2023.04.031.

[2]周圩群,乔俊琴,练鸿振. 高效液相色谱法测定盐酸阿考替胺三水合物工业品含量 [J]. 岩矿测试, 2014, 33 (06): 871-875. DOI:10.15898/j.cnki.11-2131/td.2014.06.018.