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辣根过氧化物酶催化ABTS显色，问题求救！？

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化学学科 工艺技术

辣根过氧化物酶催化ABTS显色，问题求救！？

我现在想利用辣根过氧化物酶催化ABTS显色，来验证试验过程中确实有辣根过氧化物酶产生，ABTS是用pH4.5的醋酸盐缓冲液配制浓度为20mM,在我的试验体系中加入ABTS:12.5ul;过氧化氢浓度20mM,12.5ul;体系总体积是125ul.文献中紫外吸收在405或418nm处，我测出来结果在337nm处。烦请各位高手帮我分析下，是我加入的ABTS和过氧化氢量的问题还是别的什么原因，，实在不懂行。小女不胜感激！ 显示全部
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ξ微醺°ξ微醉°
7人参与回答
小助手
，暂无简介 2023-08-14回答
请问您颜色有变化吗，abts必须拿醋酸缓冲液来溶解吗

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只做风流人
，实习生-操作员 2018-05-16回答
恩恩----好的非常非常感谢，，我再比较下看看。还有我的溶液我加的abts本身都看不出颜色，是不是浓度太低了啊。... 请问你配abts用什么稀释的？
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你入我心
，项目文控 2018-05-16回答
你说你是验证是否有有辣根过氧化物酶产生，我不清楚你反应体系中是否还有其他物质干扰。abts和过氧化氢如果在辣根过氧化物酶催化的情况下，溶液会变绿色或者蓝绿色，最大吸收波长在415 nm左右，你可以观察下是否有颜色变化。即使你生成的酶的量很少，适当延长催化时间也是可以观察到的。但是就你上面所说的我估计是没有什么变化。至于你说的最大吸收是在337 nm，那应该是abts 自身的吸收了。有多个原因，可能是体系本身就没有酶产生；也与可能是abts量或者浓度不合适。另外，就算用纯的辣根过氧化氢酶也不一定是在415 nm 吸收最大，这跟很多因素有关，底物的量，酶的量，反应时间等等都有关。所以我觉得不应该看最大吸收的位置，你应该比较有无你所产生的酶液存在下，415 nm处吸光度值是否有变化就行，前提是酶液中除了辣根过氧化氢酶以外，其他物质不对abts产生干扰，
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词欲
，化工研发 2018-05-16回答
我想问一下你的过氧化氢浓度20mm是怎么配的呢
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专属迷妹
，改性塑料销售 2018-05-16回答
你说你是验证是否有有辣根过氧化物酶产生，我不清楚你反应体系中是否还有其他物质干扰。abts和过氧化氢如果在辣根过氧化物酶催化的情况下，溶液会变绿色或者蓝绿色，最大吸收波长在415 nm左右，你可以观察下是否有颜 ... 恩恩----好的非常非常感谢，，我再比较下看看。还有我的溶液我加的abts本身都看不出颜色，是不是浓度太低了啊。
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清欢作伴。
，化工研发 2018-05-16回答
我想问一下你的过氧化氢浓度20mm是怎么配的呢 上面写错了，是10mm,直接稀释的啊
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一个爱上马的
，给排水工程师 2018-05-16回答
你说你是验证是否有有辣根过氧化物酶产生，我不清楚你反应体系中是否还有其他物质干扰。abts和过氧化氢如果在辣根过氧化物酶催化的情况下，溶液会变绿色或者蓝绿色，最大吸收波长在415 nm左右，你可以观察下是否有颜 ... 请问abts怎么配制
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