怎么测定培养基的pH值才准确?

  大多数的培养基的配方都是依据标准来做的，例如国家标准、药典或者其他的国外标准。这些标准对培养基的pH值都有严格要求，一般都是控制在一个很小的范围。所以pH值对于培养基厂家的质量控制以及客户对培养基的验收，都是很重要的。

  校准

  首/先在测量pH值时，我们都会对pH计进行一个校准工作，它的校准准确率对后续的测量有很大影响。pH电极需要有规律的进行校准。每天至少校准一次，是恰当的。

  由于每支电极都有其特征性的零点和斜率，为了得到可靠和的结果，少两点校准是必/不可少的。当要测量大范围的pH值时，则需要进行至少3点校准。大多数的pH仪表可以进行3-5点校准。同时所测量的样品pH值落在所选择标准液范围之内也是非常重要的。

  在电极进行校准时，好等待缓冲液温度在标示温度下校准，这样测出的pH值才是缓冲液标示的值，比如pH 6.86和pH9.12的缓冲液是表示25℃下的pH值，那么你在20℃进行校准，显示的就不是6.86或者9.12。不过一般厂家都会附送一张缓冲液在不同温度下测的pH值。

  用于校准的缓冲液是非常的溶液，拥有固定的数值和精度。缓冲液瓶开封后，为了保证校准的准确性，要注意下面事项：

  1. 次使用缓冲液时，在包装上标明日期，保证缓冲液包装的密封性。

  2. 不要把使用过的缓冲液倒回原瓶，或把不同厂家的缓冲液混合在一起。

  3. 常温下储存缓冲液，储存时避免阳光直射

  4. 校准前请清洗电极，不要在原瓶中直接校准

  5. 不要使用过期的或污染的缓冲液

  6. 缓冲液到期应及时换新的缓冲液

  培养基pH值的测量

  培养基按形态可以分为固体培养基和液体培养基。液体培养基可以选择普通液体的pH电极，固体培养基选择对应的固体pH电极，比如针对凝胶表面的平头电极。如果固体培养基用液体的pH电极测量，得出的结果是没有参考价值的。

  首/先在配置培养基的过程中，一定要注意配制用水一般用蒸馏水或者去离子水。否则可能对之后的pH值有影响。

  其次，按照培养基厂家使用说明配置灭菌。一般培养基外包装标签上的pH标识表示灭菌后25℃测的pH值，所以液体培养基要待溶液温度达到25℃时测量培养基的pH值，固体培养基等其凝固后再用专用的固体pH电极测量，同时测量的温度也要在25度。

  这里有些人可能会说我们的pH计有自动温补功能，是不是可以不用等到25度就可以测量?

  这里需要注意的是自动温补功能只能补偿电极本身，并不能补充待测溶液的温度，所以培养基标准要求在25℃测量，那待测培养基溶液温度就要控制在25℃左右再测。

  维护

  每次测量后用去离子水冲洗电极，切勿用纸擦拭电极。纸张粗糙的表面会刮划并损坏pH敏感玻璃上的凝胶层，并且会在电极上产生静电电荷。静电电荷会导致测量信号非常不稳定。

  测量间隙或电极短时不用，电极需要储存在盛有专用的电极储存液，或电解液(如：3mol/L KCl)或缓冲液pH4或pH7的容器中。确保容器中电解液液面低于电极中填充液的液面。

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