超滤离心管是一种能够承受高转速压力的简单管子，用于分离样品中的上清液和沉淀物。它由内管和外管两部分组成，内管带有一定分子量的膜。在高速离心时，分子量较小的物质会漏到外管中，而分子量较大的物质则会留在内管中，这就是超滤的原理。超滤离心管常用于样品浓缩。

如何选择超滤离心管的分子量

根据样品量和目标分子量选择适当的离心超滤管。为了获得最高的收率，建议选择截留分子大小的1/3左右作为滤膜的截留分子量MWCO，但不要超过目标分子量的一半。超滤膜上的孔径是平均孔径，离心高压下可能会有渗漏现象，因此截留孔径越小，流速越慢，但截留比例更大。

对于样本浓度低、体积大的情况，可以选择较小容积的离心超滤管多次重复加样离心。如果需要同时脱盐和去除可溶小分子杂质，可以将待浓缩样品稀释到离心超滤管的最大容积再离心，重复2次可除去99%的盐。避免过长时间或过快的离心，虽然产品有防死端设计，但过度离心可能导致膜表面干燥并造成不可逆吸附。避免过度浓缩，因为体积越小，表面吸附的损失率越高。

离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。

是否需要对超滤离心管进行预处理

通常情况下，离心超滤管不需要预处理即可使用。但对于蛋白质样本处理，特别是较稀的蛋白质溶液（<10ug/mL），用超滤膜浓缩回收率常常是不确定的。虽然PES材料可以最小化非特异吸附，但某些蛋白质在稀溶液中可能会有问题。非特异结合程度因蛋白质结构的不同而不同，带电或疏水结构域的蛋白质更容易不可逆地结合到不同表面。

对超滤离心管表面进行钝化预处理可以降低蛋白质在膜表面的吸附损失。大多数情况下，在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率，因为溶液可以填满膜和表面的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用最高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上，然后用蒸馏水彻底冲洗柱子，再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意不要让膜干燥。如果要保存以备后用，需要加入无菌蒸馏水保持膜湿润。

常用的钝化溶液包括：

1、1%牛血清白蛋白磷酸缓冲液溶液

2、5%十二烷基磺酸钠蒸馏水溶液

3、5%Tween-20非离子活性剂蒸馏水溶液

4、5%Triton-X蒸馏水溶液

5、5%聚乙二醇化合物蒸馏水溶液

6、1%免疫球蛋白IgG磷酸缓冲液溶液

由于超滤离心管需要高速离心，某些对剪切力或压力敏感的不稳定样品可能不太适合使用。此外，超滤膜上的孔径是平均孔径，容易堵塞，对于含有微小颗粒或碎片的样品，最好先用较大孔径的离心超滤管过滤一次，然后再进行下一步浓缩。

超滤离心管是否可以重复使用

通常情况下，离心超滤管不能消毒并重复使用。虽然单管价格不便宜，但许多人尝试过重复使用的方法，经验是用蒸馏水多次清洗膜表面，离心一到两次。对于可以反向离心的小管子，可以先用蒸馏水浸泡后反向离心多次，效果会更好。超滤离心管可以重复使用于同一样品，但在不使用时要用蒸馏水浸泡，同时要防止细菌污染。不同样品不要混用。有人建议使用20%酒精、1N的NaOH（氢氧化钠）浸泡，以防止细菌滋生和干燥，但也有人说这样会破坏膜结构。总之，厂家通常不建议重复使用，多次重复使用会堵塞滤膜上的孔径，甚至导致漏液现象，影响实验结果。