在化学合成过程中,Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯(Fmoc-Asp(oBut)-OH)是一种常用的化工中间体,用于氨基酸保护和多肽合成。
制备Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯的方法有多种,下面将介绍其中两种报道的方法。
报道一中的制备方法简化了反应步骤,提高了生产效率。具体步骤如下:
步骤一:将叔丁醇、天冬氨酸和氯化亚砜按照一定的质量比例混合,然后在50-60℃的条件下反应18-30小时,得到Asp.oBut(oBut)溶液。
步骤二:用碱液将Asp.oBut(oBut)溶液调节至中性或弱碱性。碱液可以选择氨水、碳酸钠溶液或氢氧化钠。
步骤三:用乙酸乙酯对Asp.oBut(oBut)进行萃取,然后用浓度为8-12wt%的氯化钠溶液洗涤乙酸乙酯层,随后将洗涤后的乙酸乙酯进行浓缩,得到浓缩液。
步骤四:向浓缩液中加入丙酮溶液和碳酸钠溶液进行皂化,皂化完成后加入Fmoc-OSU反应,得到Fmoc-Asp(oBut)-OH。
步骤五:用乙酸乙酯对步骤四中得到的反应液进行二次萃取,然后用氯化钠溶液洗涤乙酸乙酯层,最后加热浓缩干燥即可得到Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯。
报道二中的制备方法较为复杂,具体步骤如下:
在三口瓶中加入醋酸叔丁酯和天冬氨酸,滴加高氯酸并在低温下反应,然后加入水进行萃取。将萃取液中和至中性,减压浓缩醋酸叔丁酯层,得到Asp(OtBu)、Asp(OtBu)和Asp-OtBu油状物的混合物。
将混合物转入三口瓶中,加入CuSO4·5H2O和盐酸,升温反应后得到Cu[Asp(OtBu)]x(x=1~2)。再加入四甲基乙二胺和二氧六环,调节pH并反应得到Asp(OtBu)。最后加入Fmoc-OSu反应,用乙酸乙酯萃取、酸化、水洗、减压蒸馏、结晶、烘干,最终得到Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯。
通过HPLC分析,Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯的纯度为99.2%,旋光度为-23.5,熔点为147.9~149.5,异构体含量为0.18%。
[1] 中国发明CN201811071184.5一种Fmoc-Asp(oBut)-OH的制备方法
[2] 中国发明CN201310169364.8一种芴甲氧羰酰天冬氨酸-4-叔丁酯的制备方法