胆固醇酯酶是一种重要的酶类,也被称为甾醇酯酶。它在水相中可以催化胆固醇酯的水解,将其转化为胆固醇和脂肪酸。此外,在有机溶剂的存在下,胆固醇酯酶还可以进行酯化和转酯反应。这种酶广泛存在于哺乳动物和微生物中,其中哺乳动物来源的胆固醇酯酶主要存在于胰脏、血液、肝脏和肾脏等细胞中。
胆固醇酯酶属于α/β水解酶家族中的酯类水解酶。与脂肪酶相比,胆固醇酯酶在结构上有明显的差异。脂肪酶的活性中心被“盖子”结构包住,而部分胆固醇酯酶中会有固定在N-末端的“帽子”结构。这两类酶最大的区别在于它们水解的底物种类不同,脂肪酶主要作用于长链脂肪酸形成的酯键,而胆固醇酯酶主要作用于短链脂肪酸形成的酯键,但也可以水解脂肪酶的底物。
胆固醇酯酶在食品、诊断试剂、污水处理、制浆造纸工业和织物脱脂等领域有广泛的应用。
我们提出了一种利用微生物发酵技术制备胆固醇酯酶的工艺。具体步骤是将假单胞菌(Pseudomonas)培养在配方为0.5~1.5%酵母膏、0.5~1.5%甘油、0.2~0.3%尿素、0.05~0.15%K2HPO4、0.02~0.05%KCl、0.02~0.05%MgSO4及各种诱导剂0.2%~0.5%,PH6.7~7.2的发酵培养基中,在湿度30℃~33℃、通气搅拌的条件下培养30~40小时。然后通过分离、提取、盐析和柱层等步骤获得胆固醇酯酶。