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Anti-SIRT1抗体的应用及其在细胞生物学中的作用?

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,销售 2020-08-18回答

Anti-SIRT1抗体是一种多克隆抗体,可以特异性结合Anti-SIRT1,并广泛应用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。

该抗体的检测原理是利用双抗体夹心法测定标本中Anti-SIRT1的水平。通过将纯化的Anti-SIRT1抗体包被在微孔板上,形成固相抗体。然后依次加入Anti-SIRT1和HRP标记的Anti-SIRT1抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色。根据颜色的深浅和样品中的Anti-SIRT1浓度,可以通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中Anti-SIRT1的浓度。

SIRT1是一种NAD+依赖的脱乙酰化酶,与酵母菌沉默信息调节因子Sir2具有高度同源性。它通过对多种非组蛋白和组蛋白的去乙酰化作用,参与多种细胞生物学功能。

Sirtuins家族是一个NAD+依赖的家族,在哺乳动物细胞中广泛表达。该家族共有7个成员,分别为:SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5、SIRT6、SIRT7。它们在细胞中的分布位置和结构上存在差异,从而产生不同的酶活性。Sirtuins家族与衰老相关疾病有关,如神经退行性疾病和心血管疾病。其中,SIRT1是与酵母菌沉默信息调节因子Sir2同源性最高的成员,主要分布在细胞核。

NAD+/NADH结合区是SIRT1的活性中心,决定了SIRT1在哺乳动物细胞中的重要作用。它可以脱去组蛋白H1、H3和H4的乙酰基,同时也可以作用于许多非组蛋白,如p53和PGC-1等,还可以修饰DNA修复蛋白质PARP1和Ku 70。研究表明,SIRT1可以通过调节Wnt/-catenin通路来调节骨代谢。

Anti-SIRT1抗体在SIRT1信号通路中的应用

Anti-SIRT1抗体在大鼠慢性脑缺血致认知损伤研究中的作用

SIRT1(沉默信息调节因子1)是一种NAD+依赖性蛋白脱乙酰酶,在细胞分化、衰老、凋亡、生理节律、代谢调控、转录调节、信号转导和氧化应激等多种生物学过程中发挥重要作用。

最近的研究表明,SIRT1通过抗氧化、抗炎和减少凋亡等机制发挥神经保护作用,并且在控制出生后血管生长的内皮细胞基因表达中起关键调节作用。因此,SIRT1在慢性脑缺血状态下可能仍然发挥重要作用。

通过双侧颈总动脉永久性结扎法建立了大鼠慢性脑缺血的认知损伤模型。利用Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆能力,通过免疫组化和Western blot法检测不同时间点下SIRT1的表达变化。同时,利用激活剂白藜芦醇和抑制剂EX-527对模型进行干预,检测SIRT1信号通路下游底物磷酸化FOXO3α(Ser253)和PGC-1α的表达水平变化,以及SIRT1信号通路对氧化应激的影响。这些研究结果将为SIRT1信号通路在抗血管性认知损伤中的作用提供更多的理论依据。

参考文献

[1] Wenjun Yan, Zongping Fang, Qianzi Yang, Hailong Dong, Yan Lu, Chong Lei, Lize Xiong. Sirt1 Mediates Hyperbaric Oxygen Preconditioning-Induced Ischemic Tolerance in Rat Brain. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 2013(3).

[2] Frankie D. Heyward, R. Grace Walton, Matthew S. Carle, Mark A. Coleman, W. Timothy Garvey, J. David Sweatt. Adult mice maintained on a high-fat diet exhibit object location memory deficits and reduced hippocampal SIRT1 gene expression. Neurobiology of Learning and Memory. 2012(1).

[3] Loredana Zocchi, Paolo Sassone-Corsi. SIRT1-mediated deacetylation of MeCP2 contributes to BDNF expression. Epigenetics. 2012(7).

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[5] 陈罕. SIRT1信号通路通过氧化应激参与大鼠慢性脑缺血致认知损伤的研究. 吉林大学, 2013.

 
 
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