大鼠肝细胞BRL是一种上皮细胞样的贴壁生长细胞，来源于大鼠的肝脏组织。为了成功培养这种细胞，以下是一些操作步骤和注意事项：

细胞培养

在超菌台上，用75%酒精对培养瓶进行消毒。将细胞转移到T25培养瓶或6cm培养皿中，无需离心。加入约5ml含有FBS的培养基，然后放入培养箱中过夜培养。检查细胞的汇合度，如果未达到80%，继续换液并继续培养。如果汇合度超过80%，可以进行传代。

传代步骤如下：

1. 弃去培养液，用不含钙、镁离子的PBS洗涤1-2次。

2. 在培养瓶中加入1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），将培养瓶倒置放入37℃培养箱中预热1-3分钟。然后将培养瓶翻转，让胰酶与细胞接触10-30秒。在倒置显微镜下观察细胞的消化情况，如果大部分细胞变圆，迅速将培养瓶拿回操作台，轻轻敲击几下，然后加入少量完全培养基以停止消化。

3. 加入6-8ml完全培养基，轻轻混合后吸出一半，分装到新的培养瓶中。通常，第一次传代是一传三的比例。

参考文献

[1] 姚娟娟，周晓蓉，牛廷勇；单壁碳纳米管对大鼠肝细胞株BRL的毒性作用。《毒理学杂志》。