在本文中，我们将探讨制备D-天冬酰胺的方法，通过这项研究，我们希望为D-天冬酰胺的高效制备提供可行的解决方案。

简述：D-天冬酰胺是一种重要的药物合成中间体，可用于制备具有良好的催产性和降低血压性的催产素，亦可以用作重要的药物中间体β-Homo-天冬酰胺原料。此外，D-天冬酰胺还常用于药理学方面的研究，研究表明它对雾化氨水刺激引起的小鼠咳嗽以及乙酰胆碱和组织胺引起的豚鼠哮喘有明显的抑制作用，还可用于治疗支气管炎。

制备：

1. 方法一

以L－天冬氨酸为原料，经酯化、消旋、拆分后得到D －天冬氨酸甲酯；D －天冬氨酸甲酯盐酸盐氨解、精制可得到D－天冬酰胺，总收率为49.9％，光学纯度达到99％以上。具体步骤如下：

（1）D-天冬氨酸-β-甲酯·L-DBTA盐的制备

取30 g (0.0594 mol) D-天冬氨酸-β-甲酯·L-DBTA盐， 置于250 mL三口瓶中， 加入150 mL无水乙醇和17 mL三乙胺， 室温下搅拌2 h后过滤， 乙醇多次洗涤滤饼， 干燥得白色粉末状固体6.58 g， 产率74.8%。m.p.184～186℃。

（2）D-天冬酰胺的制备

取10 g D-天冬氨酸-β-甲酯及300 mL无水甲醇加入装有搅拌器及通气装置的三颈瓶中， 充分搅拌均匀， 通入干燥的NH3， 0～5 ℃反应60 min， 升至室温， 继续通NH3 2～3 h后将反应液转移到密闭容器中， 置30℃水浴中静置氨解48 h， 将溶液40℃水浴中减压浓缩至干；残留物用30 mL蒸馏水溶解后加150 mL无水甲醇沉淀， 冷冻结晶， 过滤并用甲醇洗涤1～2次， 抽干得D-天冬酰胺水合物4.8 g， 氨解收率58.5 %。

取4.8 g D-天冬酰胺水合物粗品用30 g热蒸馏水溶解， 加少量活性碳脱色， 过滤， 收集滤液， 在搅拌下加150 mL无水甲醇， 析出大量结晶、过滤、用无水甲醇和无水乙醚各洗一次， 干燥， 得D-天冬酰胺-水合物精品4.1 g， 总收率49.9 %。m.p. 274～275℃。

2. 方法二

（1）148 克邻苯二甲酸酐与 133 克L-天冬氨酸混合，升温至155℃，反应50 分钟，加水 1000 毫升溶解，冷却析出晶体；过滤、干燥得 252克邻苯二甲酰 -L-天冬氨酸；

（2）252克邻苯二甲酰-L-天冬氨酸和0.5克邻苯二甲酰亚胺的钠盐加入到 300 毫升醋酸酐中，回流反应 30 分钟，冷却结晶，过滤、干燥得到邻苯二甲酰 -DL-天冬氨酸酐 226克；

（3）122.5 克邻苯二甲酰 -DL-天冬氨酸酐加入到 200 毫升含氨 5%的四氢呋喃氨溶液中，室温反应2小时，蒸出并回收四氢呋喃，固体物加入600毫升水，用6M氢氧化钠溶液调节 pH值至9使固体物全部溶解，再用6M的盐酸调节pH值至3，重新析出固体产物，过滤干燥得 98 克邻苯二甲酰 -DL-天冬酰胺；

（4）79克邻苯二甲酰-DL-天冬酰胺和20克80%的水合肼分别加入到 300毫升无水乙醇中，回流反应60 分钟，冷却、过滤收集固体物，将所得固体加入到300毫升水中，用6M的盐酸调节 pH值至 3，过滤除去固体，酸性滤液用氨水调节 pH值到6，减压浓缩、冷却结品过滤、干燥得到 36.2克 DL-天冬酰胺；

（5）将E.coli.AS1.588菌株培养在含蛋白胨10克，NaC15克，牛肉膏3克，L-天冬酰胺1克的1000毫升培养基中，维持pH 7.0，温度35℃，摇瓶振荡培养12小时，4000rpm离心 15分钟得湿细胞。将所得细胞加入到含DL-天冬酰胺36克、吐温-800.03克的 600毫升 pH为7的硼酸缓冲液中，37℃振荡反应 36小时，L-天冬酰胺转化率大于 98%。将反应液用 6M 的 Na0H 调 pH 值到 6，升温到 60℃，活性碳脱色，过滤除去菌体，滤液用6M的盐酸调 pH值至 3，减压浓缩到 120 毫升，冷却结品，过滤、干燥得13 克L-天冬氨酸 ；L-天冬氨酸结品母液加水稀释，用6M的NaOH调pH值到5，上大孔强碱性阴离子交换树脂 D201吸附L-天冬氨酸，含D-天冬酰胺的流出液调节pH值到6，活性碳脱色、滤液碱压浓缩至50毫升加入等体积的 95%乙醇，析出晶体，过滤、干燥得15.1克D-天冬酰胺，结晶母液循环套用。

参考文献：
[1]李琼瑶，蒋立建，韩冲，等.D-天冬酰胺和D-高丝氨酸的制备研究[J].氨基酸和生物资源，2009，31(02):43-45.

[2]山东理工大学. D-天冬酰胺的制备方法. 2011-10-26.