A549细胞是一种人肺泡腺癌基底上皮细胞，最早于1972年由D.J.Giard等人从癌性肺组织中分离并培养得到。这些细胞在自然界中呈鳞状，负责肺泡扩散的物质传递。在体外培养条件下，A549细胞以单层细胞形式生长，并附着在培养瓶上。

A549细胞的培养条件是什么？

A549细胞的培养条件包括37℃的恒温环境、5% CO₂浓度和无菌环境。细胞的增殖能力受到培养技术和条件等多种因素的影响。为了确保细胞具备良好的增殖能力，需要按照正确的方法进行细胞的复苏、传代和冻存。

如何进行A549细胞的传代？

1. 当细胞融合度达到90%以上时，进行细胞传代。

2. 预热培养基至37°C。

3. 在超净台上，弃掉培养基，加入2-5ml的PBS清洗细胞，然后加入1ml的胰酶进行细胞消化。

4. 当观察到细胞变圆且开始脱离瓶壁时，加入5ml的培养基终止消化。

5. 用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞，使其吹散。

6. 将细胞转移到离心管中，以1000rpm离心5分钟。

7. 弃掉上清液，加入5ml含有10% FBS的培养基，将细胞重悬后转移到T25瓶中。确保细胞贴壁后的融合度在25-50%之间，细胞密度为1×10⁴ cells/cm²（2.5×10⁵ cells/T-25瓶），混匀细胞悬液以确保细胞均匀分布。

8. 将培养瓶放置在37°C、5% CO₂的无菌培养箱中进行培养。

主要参考文献

[1] 雷怀定 刘先军 涂明利 熊畅 刘为舜；苦参碱对体外人肺癌A549细胞的抑制作用。《实用医学杂志》 2006年15期。