如果已经知道了上游调控机制或者上游通路,当然可以再接着做下去。尝试沉默或者过表达这个基因,看一下细胞转移和侵润性变化,通过测序看一下有哪些通路和基因发生了变化,可以进一步了解这个基因的功能,再做loss of function和gain of function...
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如果已经知道了上游调控机制或者上游通路,当然可以再接着做下去。尝试沉默或者过表达这个基因,看一下细胞转移和侵润性变化,通过测序看一下有哪些通路和基因发生了变化,可以进一步了解这个基因的功能,再做loss of function和gain of function实验;如果这个基因是非编码RNA基因,还可以用其他实验手段了解一下这个基因所转录的非编码RNA的功能,比如说miRNA、lncRNA等。可以分析一下它们的靶基因通路,再利用其他方法探索它们的作用形式,如RIP/CLIP、RNA pull down等,最后可以再进行动物实验。 miRNA有可能在CDS区也有结合位点,但大部分都是结合于3'UTR区域发挥功能。对于肿瘤细胞来说,miRNA的功能并没有太大不同,所不同的是某个关键miRNA表达量出现变化,可能会引起它的靶基因发生变化。如果它的某个靶基因正好是抑癌基因,当miRNA异常过表达,这个抑癌基因就会被非正常下调,促进癌症发生;但也有其他可能,比如说该miRNA的某个靶基因在正常情况下应该低表达,当miRNA被抑制,这个靶基因会被上调,也有可能对其所在通路产生影响,引起癌症发生。