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,设备工程师 2020-12-15回答

HUTU-80人十二指肠腺癌细胞是从人十二指肠腺癌上皮细胞样贴壁细胞中分离出来的,主要用于人十二指肠腺癌细胞的细胞学实验。十二指肠腺癌是起源于十二指肠黏膜上皮的癌症。它通常是单发的,有时也可以由腺瘤恶变而来。在组织学上,可以观察到腺瘤-腺癌转化和腺癌中的残存腺瘤组织。十二指肠腺癌最常发生在降部乳头周围,约占60%,其次是壶腹下段,球部最少见。

该疾病的早期症状通常不明显,可能出现上腹部疼痛、厌食、恶心、呕吐、贫血和黄疸等临床表现。十二指肠位于胃和空肠之间,成人长度为20~25cm,管径为4~5cm,紧贴腹后壁,是小肠中长度最短、管径最大、位置最深且最为固定的部分。它接受胃液、胰液和胆汁的注入,因此十二指肠的消化功能非常重要。十二指肠腺癌也被称为“勃氏腺”,它位于人体和哺乳动物的十二指肠粘膜下层的腺体。在人体中,它是一种粘液腺,分泌粘液、溶菌酶和碳酸氢盐。它的分泌物呈碱性,可以保护十二指肠粘膜免受胃液的侵蚀。

应用[4][5]

蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞凋亡的比较蛋白质组学研究

蓖麻毒素是蓖麻籽中存在的一种高效蛋白质,它可以使核糖体失活。蓖麻毒素由A链和B链构成,A链具有N-糖苷酶活性,可以抑制蛋白质的合成,导致细胞死亡;B链具有凝集素活性,可以识别和结合细胞表面含有半乳糖结构的受体,帮助A链进入细胞。当蓖麻毒素进入细胞内时,会导致整个细胞的蛋白质合成停止,最终导致细胞死亡。

通过比较蛋白质组学的研究方法,使用蓖麻毒蛋白诱导人十二指肠腺癌细胞(HuTu-80)进行实验,分析全蛋白差异表达的情况,为了解蓖麻毒蛋白在HuTu-80细胞中的作用机制提供新的实验窗口。

1. 采用硫酸铵盐析法从蓖麻种子中提取粗素,经过柱层析纯化后得到纯化的蓖麻毒蛋白。经过SDS-PAGE鉴定,纯化后的蓖麻毒蛋白达到了电泳纯度。通过ICso试验,发现蓖麻毒蛋白可以引起HuTu-80细胞形态的变化,其IC50为200ng/ml。

2. 构建蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞凋亡的模型,通过MTT排除试验、AO/EB染色、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,确定蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞早期凋亡的时间点,并提取细胞组分蛋白进行Western-blot分析,观察HuTu-80细胞在凋亡过程中细胞色素c的迁移情况。

参考文献

[1]iTRAQ‐coupled two‐dimensional liquid chromatography/tandem mass spectrometric analysis of protein profile in Escherichia coli incubated with human neutrophil peptide 1–potential in antimicrobial strategy[J].Yu SiZhou,MouadLamrani,Mary B.Chan‐Park,Susanna Su JanLeong,Matthew ChangWook,Wei NingChen.Rapid Commun.Mass Spectrom..2010(18)

[2]Taurine protects transformed rat retinal ganglion cells from hypoxia-induced apoptosis by preventing mitochondrial dysfunction[J].Ka Chen,Qianyong Zhang,Jian Wang,Fengjin Liu,Mantian Mi,Hongxia Xu,Fang Chen,Kaihong Zeng.Brain Research.2009

[3]Waltonitone induces human hepatocellular carcinoma cells apoptosis in vitro and in vivo[J].Zhang Zhang,Shuo Wang,Hong Qiu,Chaohui Duan,Kan Ding,Zhengtao Wang.Cancer Letters.2009(2)

[4]Quantitative Proteomic Analysis of Mitochondria in Aging PS-1 Transgenic Mice[J].You-Jun Fu,Shuling Xiong,Mark A.Lovell,Bert C.Lynn.Cellular and Molecular Neurobiology.2009(5)

[5]栾世慧.蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞凋亡的比较蛋白质组学研究[D].内蒙古民族大学,2012.

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