通过合成和应用6-氯嘌呤核苷，我们可以探索新颖的合成方法和潜在的应用领域。

简述：6-氯嘌呤核苷是一种重要的医药中间体，在制备多种新型核苷类药物方面发挥着关键作用，例如6-甲氧基-9-β-D-嘌呤核苷、6-氯嘌呤-2’,3’双脱氧苯甲氧基核苷等。特别是在合成抗心率失常新药CVT-510（N-[3 (R)-tetra hydrofuranyl]-6-aminopurine riboside）中，6-氯嘌呤核苷作为重要中间体之一，展现出广阔的应用前景。

1. 酶合成：

樊华伟等人利用菌种Lactobacillus helveticus (ATCC 10697 )所产生的N-脱氧核糖转移酶,以底物鸟苷和6- 氯嘌呤为原料通过碱基交换合成6-氯嘌呤核苷。具体方法如下：

1.1 菌种的培养与酶反应

（1）菌种Lactobacillus helveticus ( ATCC 10697 )

（2）培养基 

蛋白胨20 g/ L,葡萄糖20 g/ L,酵 母膏5 g/ L,柠檬酸胺2 g/ L,磷酸氢二钾2 g/ L,十水合硫酸钠8.2 g/ L,硫酸锰0.038 g/ L,pH值6.0。

（3）菌种培养 

将上述培养基200毫升装入500毫升锥形瓶中，经110℃灭菌10分钟后冷却并接种。在40℃的空气摇床中培养24小时。随后将培养液经10000转/分钟×10分钟离心，收集菌体，分别使用pH值为6.5的柠檬酸缓冲液和pH值为6.0的磷酸缓冲液洗涤，再次离心，得到的菌体作为酶源备用。

（3）酶催化反应 

标准反应条件：于25 ml锥形瓶中加入反应液10 ml ,其中鸟苷和6-氯嘌呤的浓度分别为10 mmol/ L和30 mmol/ L ,加入缓冲液NaH2PO4(0.1 mol/ L ,pH值6.0 )5 ml；,菌体加入量8 %(湿重,u = 0.9 ),在40℃空气摇床中反应24 h (scheme1 )。取出反应液以沸水煮5 min 中止反应。使反应液离心(10 000 r/ min × 10 min) ,取上清液进行分析。

1.2 分析检测方法

该实验定性分析及反应跟踪采用TLC-UV (薄层层析法)。以活化硅胶板做载体,二氯甲烷- 甲醇-水(9∶1 ∶0.25 )为展开剂。鸟苷,6-氯嘌呤,鸟嘌呤,6-氯嘌呤核苷的Rf参考值分别为0.10 ,0.23 ,0.46 ,0.73。底物和产物定量分析采用HPLC法,高效液 相色谱仪为Waters 510 ,紫外检测器为Waters 2487 ,色谱条件为：色谱柱Diamonsil C18 ,Φ250× 4.6 mm；流动相为甲醇∶水= 1∶2 ,流速0.9 ml/ min；进样量20μl；检测波长225 nm。

1.3 转化率计算

转化率% =产物摩尔浓度/起始鸟苷摩尔浓度×100 %

1.4 结果

最佳反应条件如下：底物最适反应浓度为30 mmol/ L (鸟苷)和10 mmol/ L (6-氯嘌呤) ,菌体添加量8 % ～10 % (湿重) ,反应温度40℃,0.1 mol/ L磷酸缓冲液(pH值6.0 ),摇床转速120 r/ min ,反应时间24 h ,6-氯嘌呤核苷收率可达到51.6 % ,具有较好的应用前景。

2. 应用：合成6-脱氯嘌呤核苷

对天然嘌呤及嘌呤核苷的修饰与改造是近年来研究的热点, 主要在于修饰与改造后的嘌呤与嘌呤核苷具有很好的药物活性以及作为重要的药物中间体。

以6-氯嘌呤核苷为原料,微波辐射下与水合肼反应生成相应的6-肼嘌呤核苷；6-肼嘌呤核苷在微波辐射下经Wolff-Kishner-HuangMinlon还原反应可得到6-脱氯嘌呤核苷。

参考文献：

[1]郭海明,饶伟浩,牛红英等. 微波辐射下水中6-氯嘌呤(核苷)及8-溴嘌呤核苷的脱卤反应 [J]. 合成化学, 2010, 18 (03): 361-364. DOI:10.15952/j.cnki.cjsc.2010.03.023.

[2]樊华伟,傅绍军,朱利民. 酶法合成6-氯嘌呤核苷 [J]. 药物生物技术, 2006, (02): 127-130. DOI:10.19526/j.cnki.1005-8915.2006.02.012.