羊多克隆抗体制备是通过免疫羊来收集血清或直接使用抗血清进行检测,或进行纯化以获取纯化的抗体。多克隆抗体是由免疫的宿主通过不同来源(多克隆)的B细胞分泌产生的抗体。多克隆抗体能识别同一抗原的多个不同表位。制备多克隆抗体的原理是抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白,即抗体。
抗体根据靶位点的不同分为单克隆抗体和多克隆抗体。多克隆抗体由多个B淋巴细胞克隆产生,可以与多种抗原表位结合。相比同物种来源的单克隆抗体,多克隆抗体制备成本低、周期短、能同时检测同一抗原的多个表位,适用于免疫沉淀、ELISA等实验,并具有更高的亲合力(avidity)。
抗原有抗原性和免疫原性两个基本特性。抗体是能与特异性抗原结合的免疫球蛋白。制备多克隆抗体时,需要使用完全抗原,即经过一定的改造后才能成为完全抗原。完全抗原的分子量越大、结构越复杂,引起免疫反应的能力越强。
制备羊多克隆抗体的一般流程包括:完全抗原的准备→羊的免疫→效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。
羊多克隆抗体制备可用于小分子、多肽、修饰多肽、蛋白、融合蛋白、修饰蛋白的杂交细胞种类及效价检测。例如,在山羊c-Myc基因的原核表达及多克隆抗体和单克隆抗体的制备实验中,需要羊抗c-Myc蛋白的多克隆抗体以便用于间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞。c-Myc是一种重要的原癌基因,它在维持胚胎干细胞的生物学特性和诱导多性干细胞形成的过程中发挥重要作用。因此,制备其相应的多克隆抗体和单克隆抗体非常必要。
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