标签:细胞裂解液 古朵生物 溶液
产品名称:Triton-NH4OH细胞裂解液
规格:100ml/500ml
分类:细胞组分分离
储存条件:4℃,12个月
用途:裂解缓冲液
主要成分:无菌溶液。主要由0.5% Triton X-100、20mM NH4OH、PBS组成。
【使用方法】
A、组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入3~5倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4℃条件下操作佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃,离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃,离心2~3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
B、血液样本的常规操作
1、取新鲜抗凝血,离心5min,弃上清。
2、 裂解:加入6~10倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4℃条件下操作佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、洗涤: 根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃,离心2~3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
注意: 对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer进行第2步操作,并在4℃或室温裂解4~15min。
裂解缓冲液【简介说明】
在生物科研领域,经常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多种,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Leagene Triton-NH4OH细胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液经过滤除菌,经过Triton-NH4OH Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
【自备材料】
1、胰蛋白酶
2、离心机
3、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
4、胎牛血清
Triton-NH4OH细胞裂解液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。