牛血清白蛋白(BSA),也被称为第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,具有广泛的生化实验应用。它常被用作稳定剂,用于保存溶液和反应液中的酶,以稳定酶的活性并防止酶的分解和非特异性吸附。
BSA作为稳定剂添加到酶的保存溶液和反应液中,可以提高酶的活性。对于那些在低浓度下不稳定或活性低的酶,加入BSA后可以起到保护或载体的作用。对于不需要BSA的酶,添加BSA一般不会产生影响。BSA可以使酶切割更加完全,并实现重复切割。在37℃下,酶切反应超过1小时时,BSA可以使酶更加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶的存活时间很短。此外,BSA可以结合缓冲液或底物DNA中的金属离子和其他化学物质,抑制限制性内切酶的活性。
标准级别的牛血清白蛋白(BSA, Standard Grade)可以满足大部分常规实验需求,例如免疫封闭剂、组织细胞培养养料和培养成分、蛋白/酶稳定剂以及蛋白定量标准品。
诊断级别的牛血清白蛋白(BSA,Diagnostic Grade)可以满足免疫封闭剂、蛋白/酶稳定剂、稀释剂、载体以及高灵敏度要求的免疫检测、细胞培养和杂交实验等常规实验需求。
无IgG、蛋白酶、DNase的牛血清白蛋白适用于RIA和ELISA检测中的稀释液和封闭剂,也可用于干细胞培养和杂交瘤细胞培养。
无脂肪酸的牛血清白蛋白(Fatty Acid Free BSA)含有极低的脂肪酸含量(0.02%),适用于微量元素、脂肪酸、激素和生长因子的载体蛋白,可加入无血清培养体系。它可以避免脂类或脂肪酸对激素或胆固醇分析检测结果的干扰。
无蛋白酶的牛血清白蛋白(BSA, Protease Free)经过检测,不含蛋白酶残留。它主要用于重组蛋白生产,更适合用作RIA/ELISA实验的封闭剂和抗体稀释液。
低内毒素的牛血清白蛋白(BSA, Low Endotoxin)的内毒素含量低于2.0 EU/mg。在内毒素水平敏感的细胞培养中,该产品可作为天然载体蛋白使用。它适用于无血清或化学成分限定的细胞和组织培养,能有效稳定和稀释敏感蛋白溶液,也可用于ELISA等诊断检测。
牛血清白蛋白,也被称为牛血清蛋白、第五组分、Bovine Serum Albumin(BSA),在生化实验中具有广泛的应用。例如,在western blot中可以作为阻断剂使用,可以加入酶切反应缓冲液中,通过提高蛋白质浓度来保护酶的活性。牛血清白蛋白还可以防止酶的分解和非特异性吸附,减轻酶的变性以及不利环境因素引起的变性。
牛血清白蛋白的前体蛋白全长为607个氨基酸。经过N端的18个信号肽和6个前肽的脱去,形成分子量约为66.5kDa的成熟BSA蛋白,含有583个氨基酸。
牛血清白蛋白(BSA)在免疫诊断法、临床化学试剂、细胞培养基、蛋白质化学研究以及分子生物学实验室中被广泛使用。它常常利用其非特异性结合蛋白质的特性来进行实验。
牛血清白蛋白溶液(1%BSA)是一种由牛血清中的BSA(1%)、防腐剂和去离子水组成的溶液。它主要用于包被和蛋白添加剂等应用。牛血清白蛋白是一种球蛋白,包含607个氨基酸残基,分子量为66.446KDa,等电点为4.7。在生化实验中,牛血清白蛋白有广泛的应用。
牛血清白蛋白是牛血清中的主要成分,除了可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外,还包括白蛋白和球蛋白。它们具有不同的功能,例如纤维粘连素细胞促进细胞附着,α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用,胎牛血清中含胎球蛋白促细胞附着,转铁蛋白能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用。
牛血清中的简单蛋白是血液的主要成分,分子量为68kD,等电点为4.8。它含有16%的氮和0.08%的糖,仅含有己糖和己糖胺,脂肪含量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。
白蛋白能与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。在血液中,白蛋白主要起着维持渗透压、PH缓冲、载体和营养作用。在无血清的动物细胞培养中,添加白蛋白可以提供生理和机械保护作用,并起到载体的作用。
牛血清白蛋白(BSA)是一种广泛应用于生化实验中的牛血清中的球蛋白。它包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 Da,等电点为4.7。在western blot等实验中,牛血清白蛋白常被用作阻断剂。
本研究采用光谱法和计算机模拟技术研究了四种血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。通过荧光光谱法研究了ACEI与BSA的猝灭机制、结合常数、结合位点数、结合位点、热力学常数和作用力类型等参数。同时,采用同步荧光光谱法、圆二色谱法和红外光谱法研究了ACEI与BSA结合对BSA二级结构的影响。最后,通过分子优化和模拟计算预测了ACEI与BSA的相互作用力和形态。
研究结果显示,ACEI与BSA的结合过程为低温自发并放热的焓驱动过程。ACEI主要结合在BSA的Site I位点,主要作用力是氢键和范德华力。
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牛血清白蛋白(BSA)是牛血清中的一种球蛋白,具有广泛的生化实验应用。它常被用作稳定剂,用于限制酶或修饰酶的保存溶液和反应液中,以稳定酶活性并防止酶的分解和非特异性吸附。
BSA的作用主要体现在以下几个方面:
牛血清白蛋白根据不同的级别和用途可以分为:
标准级别的BSA可以满足大部分常规实验需求,如免疫封闭剂、细胞培养养料、蛋白/酶稳定剂和蛋白定量标准品。
诊断级别的BSA可以满足常规实验需求,如免疫封闭剂、蛋白/酶稳定剂、稀释剂、载体和蛋白标准品。它还适用于高灵敏度要求的免疫检测、细胞培养和杂交实验。
无IgG、蛋白酶、DNase的BSA适用于RIA和ELISA检测中的稀释液和封闭剂,也可用于干细胞培养和杂交瘤细胞培养。
无脂肪酸的BSA内的脂肪酸含量非常低,通常用作微量元素、脂肪酸、激素和生长因子的载体蛋白,适用于无血清培养体系和脂类或脂肪酸干扰结果的激素或胆固醇分析检测。
无蛋白酶的BSA适用于重组蛋白生产,更适合用于RIA/ELISA实验封闭剂和抗体稀释液。
低内毒素的BSA内毒素含量低于2.0 EU/mg,适用于内毒素水平敏感的细胞培养、无血清或化学成分限定的细胞和组织培养、稳定和稀释敏感蛋白溶液以及ELISA等诊断检测。
牛血清白蛋白是一种在RIA和ELISA检测中常用的稀释液和封闭剂,也可用于干细胞培养和杂交瘤细胞培养。牛血清白蛋白是血液的主要成分之一,分子量较大,含氮量和含糖量适中,含脂量较低。
白蛋白是一种具有多种功能的蛋白质,它在维持渗透压、缓冲PH、运输物质和提供营养方面起着重要作用。在无血清培养中,添加白蛋白可以提供细胞所需的保护和营养。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent。
通过荧光猝灭法和同步荧光法,研究了牛血清白蛋白与格列齐特的相互结合机制。实验结果表明,牛血清白蛋白与格列齐特形成新物质的静态猝灭,结合常数较大,且只有一个高亲和力的结合位点。这种相互作用是通过静电作用力实现的。
利用共振光散射法和紫外吸收法研究了格列齐特与牛血清白蛋白的相互作用机理。实验结果表明,牛血清白蛋白与格列齐特之间是形成新结合物的静态猝灭。与传统荧光光谱法相比,以药物光谱变化为检测对象的方法能更准确地提供体系的结合信息。
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牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,简称BSA)是一种常用的实验室试剂,具有广泛的应用。在免疫实验中,BSA常用作封闭剂,例如ELISA和Western Blot。此外,BSA还可以作为载体蛋白,增强半抗原和其他弱抗原的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中,BSA可作为反应稳定剂,防止酶粘附到管壁和枪头上。此外,BSA还常用于生物制药的生产过程,以及细胞和微生物培养的营养物。
低内毒素牛血清白蛋白是细胞和组织培养的理想选择。它可以作为无血清和合成培养基的营养补充剂,同时也可以用于稳定和稀释敏感蛋白溶液,以及诊断和分析工具。
低内毒素牛血清白蛋白经过热休克法处理,并经过活性炭、去离子和透析处理,确保产品中的内毒素含量低于1.0 EU/mg。在内毒素水平敏感的细胞培养中,该产品可以作为内源性脂肪酸、微量元素和生长因子的天然载体蛋白。此外,它还非常适合用作无血清或化学成分限定的细胞和组织培养的营养物质的载体蛋白,以及稳定和稀释敏感蛋白的有效成分。同时,它也可以用于ELISA等诊断检测。
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牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)又称第五组分,但这个名称并不是指牛血清白蛋白的第五组分,而是Edwin J. Cohn教授早期从血液中通过特定的分离技术得到5种组份,其中第五种就是牛血清白蛋白。目前市场上的牛血清白蛋白具有多种产品样式,可满足不同种的应用。本文将简要介绍它们的区别以及挑选方法。
微生物级别:用于细胞培养、动物疫苗生产、传染致病菌培养基添加剂。
低内毒素级别:用于普通细胞培养、组织培养,作为干细胞培养的添加剂,作为无血清培养基载体以及作为营养添加剂。
低IgG级别:用于制备单克隆抗体,Southern和Northern印迹杂交实验,可作为EIA和RIA以及常规免疫实验的封闭液。利用亲和层析方法去除免疫球蛋白,确保在下游实验中不会与抗体结合。在免疫分析实验中不会被检测到。每个批次的牛血清白蛋白的IgG含量不高于0.05 mg/g。
低脂肪酸级别:用于体外胚胎移植,也可作为胚胎移植的饲养层营养物以及表面活性添加剂。可用于常规的细胞培养及组织培养。作为干细胞培养的添加剂,作为无血清培养基载体以及作为营养添加剂。利用亲和层析法去除脂肪酸以及其他小分子。每个批次的牛血清白蛋白的脂肪酸含量不高于0.05 mg/g。
标准级别:对蛋白酶敏感的免疫分析实验,如:RIA,EIA,荧光,化学发光分析;蛋白标准品,稀释液;蛋白,结合物和酶稳定剂;核酸杂交实验;细胞培养。
牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用,例如:
1、在PCR体系中有助于Taq酶的稳定性及活性,可以提高PCR的效率。
2、ELISA中也常常用到,比如封闭液,样本稀释液,酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究,遗传工程和药物研究。
4、血液中的牛血清白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。
5、在动物细胞无血清培养中,添加牛血清白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。
双氢睾酮偶联牛血清白蛋白是一种化学交联获得的偶联物,可溶于PBS(pH7.4)中。该偶联物可用于抗原免疫动物制备抗体,或包被于固相载体用于睾酮及其抗体的检测。
睾酮是一种天然雄性激素,对男性性器官的形成、性征的发育和成熟具有促进作用。它还能抑制子宫内膜生长、卵巢和垂体功能,促进蛋白质合成、骨质形成和红细胞增加,同时增加免疫球蛋白合成和肾小管对水钠的再吸收。
双氢睾酮可由睾丸直接产生,也可由周围组织将雄激素和雌激素转化而来。它对外生殖器和前列腺的发育起到积极作用,促进第二性征的出现和维持,促进精子在副睾中的成熟。临床上,双氢睾酮主要用于治疗性分化异常、良性前列腺疾病的鉴别诊断、前列腺肿瘤的疗效观察、性功能异常、不孕症和女性多毛症等疾病。
双氢睾酮的作用主要包括维持生精作用、促进生殖器官的发育、维持正常的性欲、促进蛋白质合成和促进骨骼生长与红细胞生成。
本研究旨在探讨G蛋白偶联受体介导的双氢睾酮对前列腺癌细胞快速作用的非基因组机制。
研究方法包括应用钙荧光指示剂检测细胞内钙离子浓度、Western blot方法检测MAPK家族成员的活化水平以及MTT assay检测双氢睾酮对细胞增殖的影响。
研究结果显示,双氢睾酮能够诱导前列腺癌细胞内钙离子浓度的快速升高,并能够快速诱导某些MAPK家族成员的活化。这种快速效应受到细胞外钙离子和G蛋白的调控,并且与细胞膜的通透性无关。
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本文将讲述有关酸性红 92 结合牛血清白蛋白的研究,旨在为研究 AR92 与蛋白质的相互作用提供参考思路。
简述:酸性红92是一种疏水性色粉,是一种红至暗红褐色的粉末,具有良好的着色功能,属于食用合成色素,主要用于各类食品的着色,作出的产品色泽鲜亮、颜色耐光照耐高温、长期放置不会褪色,通常广泛用于糖果、糕点和糖食等产品的应用,也可用于部分彩妆产品的使用。过量的酸性红92会诱导细胞坏死和引发炎症反应,具有有致痘性,皮肤敏感的消费者慎用。该色粉的主要成分为2,4,5,7-四溴?4,5,6,7-四氯-荧光素铝盐,属于有机色粉,在水中不易分散均匀。
酸性红 92 结合牛血清白蛋白的研究:
Qi 等研究发现,过量的 AR92 会诱导细胞坏死和引发炎症反应。因此,研究 AR92 与蛋白质的相互作用具有重要意义。血清白蛋白(SA)作为循环系统中的主要可溶性蛋白成分,在转运药物、脂肪酸和末端氨基树枝状聚合物等多种物质方面扮演着转运蛋白的重要角色。由于牛血清白蛋白(BSA)具有易于纯化、成本低廉的特点,并且与人血清白蛋白(HSA)有着76%的相似性,因此,BSA被广泛应用作为评估蛋白质与有机小分子相互作用的模型。近年来,有关有机小分子与蛋白质相互作用的研究已成为化学生物界研究的热点之一。
曹丽君等人通过荧光光谱、紫外-可见光谱(UV-vis)及傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)研究牛血清白蛋白(BSA)与酸性红 92(AR92)之间的相互作用。实验方法如下:
所有荧光光谱均用配有恒温槽的 Cary Eclipse 型荧光分光光度计(美国,瓦里安)进行测定。BSA 的浓度为 2.0 μM,AR92 的浓度从 0 增加到 1.94 μM。激发和发射狭缝宽均为 5 nm,激发波长 280 nm,波长范围 300 ~500 nm。所有荧光滴定实验均用 50 μL 手动微量注射器完成。在存在和不存在盐(0.30、0.60、0.90 M)或乙醇(5%和 10%,V/V)的磷酸盐缓冲液(0.05 M,pH =7. 4)中进行盐和乙醇对 BSA 与 AR92 相互作用影响的荧光滴定实验。
同步荧光光谱激发和发射波长的间隔 Δλ 分别为 15 nm 和 60 nm,波长范围均为 250 ~350 nm。其它扫描参数与以上荧光滴定实验相同。
采用荧光滴定法研究 AR92 与 BSA 结合的位点竞争实验,即在 3 种位点标记物保泰松(phenylbutazone,PB)、氟芬那酸(flufenamic,FA) 和洋地黄毒苷(digitoxin,DIG)的存在下探讨它们间的相互作用。BSA 和位点标记物的浓度均为 2.0 μM(pH 7.4)。
所有 UV-vis 吸收和 FT-IR 光谱分别通过 UV-3600 分光光度计(日本,岛津)和 Nicolet-6700 FT-IR 光谱仪测定。
结论:荧光猝灭数据及修正后的S-V 图表明 BSA 与 AR92 间通过静态猝灭结合。结合位点数近似等于 1、乙醇影响的研究及位点标记物实验结果均证实 AR92 与 BSA子域 IIA 中的 Trp-212 相结合。热力学和盐影响的结果表明 BSA 与 AR92 间的结合力主要为静电力。此外,UV-vis、同步荧光和 FT-IR 证实 AR92 与 BSA 的结合导致 BSA 的构象发生变化。这些结果可能为实际应用中设计食品色素配比提供一定的参考价值。
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