抗甘露聚糖肽血清是一种国家生物参考品，用于甘露聚糖肽及制剂鉴别和免疫原性检查。每瓶冻干血清需溶解后重新滴定效价，并在4℃保存。该血清的应用主要是在免疫功能低下、呼吸道感染、贫血和肿瘤的辅助治疗中，以减轻放、化疗对造血系统的副作用。

甘露聚糖肽的来源和制备

甘露聚糖肽是从人口腔咽喉部分离的a-溶血链球菌H1 S-33号菌经深层发酵、分离提取而得到的一种具有免疫活性和抗肿瘤作用的多糖类物质。我国现有20多个厂家生产甘露聚糖肽及其制剂，其中免疫原性测定是质量控制的重要指标之一。抗甘露聚糖肽血清是免疫原性测定的必需试剂，但目前国内只有少数几家企业自制，还未统一。因此，迫切需要研制抗甘露聚糖肽血清国家参考品，以便于甘露聚糖肽免疫原性测定用试剂的标准化管理。

主要参考文献

[1]邓利娟；郝苏丽；辛晓芳；范慧红。首批抗甘露聚糖肽血清国家参考品的研制。《中国药事》

       在临床实践中，许多疾病都与免疫功能低下有关。因此，在日常生活中，适当的运动和饮食调节对于维持身体的免疫功能至关重要。据称，甘露聚糖肽片在调节人体免疫功能方面具有显著效果。那么，甘露聚糖肽片到底是什么产品？它是否能够调节免疫能力？下面将对其进行简单介绍。

       甘露聚糖肽片是一种新型的生物免疫增强剂，对于调节人体免疫功能和预防免疫系统紊乱具有良好的效果。它不仅能有效提高人体免疫功能，还能治疗由于免疫能力低下引起的一些疾病。例如，它能有效治疗儿童呼吸道感染，提高身体的抗感染能力和免疫功能，降低感染的复发率，并缩短发热和咳嗽的持续时间。此外，在肿瘤疾病的治疗中，甘露聚糖肽片也表现出良好的效果，能促进癌细胞的凋亡，具有抗癌和减少复发的作用。

       现在，我们对于甘露聚糖肽片是否能够调节人体的免疫功能有了更深入的了解。除了上述作用和功效之外，它还具有抗贫血的效果，能促进造血干细胞的生长，并降低血小板的粘稠度，还具有一定的预防心脑血管疾病的作用。

人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法进行检测。该方法通过将抗体包被于酶标板上，样品或标准品中的抗原与包被抗体结合，然后加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合，生物素与亲和素特异性结合，形成免疫复合物。加入显色底物(TMB)后，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。

使用酶标仪在450nm波长处测量OD值，抗原浓度与OD450值呈正比。通过绘制标准曲线，可以计算出样品中指标的浓度。

如何进行人脂阿拉伯甘露聚糖的检测？

以下是操作步骤：

1. 加入标准品：在标准品孔和样本孔中加入不同浓度的标准品。

2. 加入样品：在待测样品孔中先加入样品稀释液，然后再加入待测样品。加样时要轻轻晃动混匀。

3. 加入酶标试剂：每孔加入酶标试剂，除了空白孔。

4. 温育：封板后置于37℃温育60分钟。

5. 洗涤：揭掉封板膜，加入洗涤液，重复洗涤步骤5次。

6. 显色：加入显色剂A和显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

7. 终止：加入终止液终止反应。

8. 测定：以空白孔调零，依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人脂阿拉伯甘露聚糖的应用

人脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及其在肺结核诊断中的价值

通过提取纯化结核分枝杆菌(M.TB)脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomanan,LAM)，并将其用于血清标本检测，评价其在肺结核诊断中的价值。通过一系列方法，成功提取到LAM抗原，并用免疫金渗滤法检测涂阳肺结核和对照血清标本中的LAM抗体。结果显示，血清LAM抗体检测对肺结核诊断具有较高的敏感性和特异性。

参考文献

[1] Kang PB, Azad AK, Torrelles JB, Kaufman TM, Beharka A, Tibesar E, DesJardin LE, Schlesinger LS. The human macro-phage mannose receptor directsMycobacterium tuberculosisli-poarabinomannan-mediated phagosome biogenesis. The Journal of Experimental Medicine. 2005.

[2] Chan J, Fan XD, Hunter SW, Brenanan PJ, Bloom BR. Lipoara-binomannan, a possible virulence factor involved in persistence of Mycobacterium tuberculosis within macrophages. Infection and Immunity. 1991.

[3] Patel VB, Bhigiee Al, Paruk HF, Singh R. Utility of a novel lipoarabinomannan assay for the diagnosis of tuberculous men-ingitis in a resource-poor high-HIV prevalence setting. Cerebrospinal Fluid Res. 2009.

[4] Hamasur B, Kallenius G, Svenson SB. A new rapid and simple method for large-scale purification of mycobacterial lipoarabinomannan. FEMS Immunology and Medical Microbiology. 1999.

[5] 彭荣, 乐军, 金瑞良, 景玲杰, 韩敏. 脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及其对肺结核的诊断价值. 中国防痨杂志, 2011, 33(03): 149-152.

Human Lipoarabinomannan (LAM) ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法进行脂阿拉伯甘露聚糖的检测。在微量滴定板上包被抗体后，样品或标准品中的抗原与包被的抗体结合，洗去游离成分。接着加入生物素化抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与包被抗体结合的抗原结合，生物素和亲和素特异性结合形成免疫复合物，洗去游离成分。加入显色底物（TMB）后，在辣根过氧化物酶的催化下呈蓝色，加入终止液后呈黄色。

通过酶标仪在450nm波长处测定OD值，抗原浓度与OD450值成正比，通过绘制标准曲线计算出样品中指示剂的浓度。

如何操作Human Lipoarabinomannan (LAM) ELISA试剂盒？

1. 标准品加样：在标准品孔和样品孔中加入不同浓度的标准品。

2. 加样：在待测样品孔中加入样品稀释液和待测样品。

3. 加酶：在每个孔中加入酶标试剂。

4. 孵育：用封膜封板，37°C孵育60分钟。

5. 洗涤：每孔加入洗涤液，重复洗涤步骤5次。

6. 显色：每孔加入显色剂A和显色剂B，37°C避光显色15分钟。

7. 终止：每孔加入终止液终止反应。

8. 测定：在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），测定应在加入终止液后15分钟内进行。

Human Lipoarabinomannan (LAM) ELISA试剂盒的应用

该试剂盒可用于脂阿拉伯甘露聚糖的提纯以及对肺结核的诊断价值的评估。通过从结核分枝杆菌中提取纯化脂阿拉伯聚糖，并使用免疫金过滤法检测涂阳肺结核和对照血清标本中的LAM抗体，可以得出结核病的诊断结果。

研究结果显示，LAM抗原的检测具有理想的灵敏度和特异性，有望成为结核病血清学快速诊断方法之一。

参考文献

1. Kang PB, Azad AK, Torrelles JB, Kaufman TM, Beharka A, Tibesar E, DesJardin LE, Schlesinger LS. Human macrophage mannose receptor directs Mycobacterium tuberculosis-induced cellular activation. Journal of Experimental Medicine. 2005.

2. Chan J, Fan XD, Hunter SW, Brenanan PJ, Bloom BR. Lipoarabinomannan, a possible virulence factor involved in persistence of Mycobacterium tuberculosis within macrophages. Infection and Immunity. 1991.

3. Patel VB, Bhigiee Al, Paruk HF, Singh R. Utility of a novel lipoarabinomannan assay in the diagnosis of tuberculous meningitis in a resource-limited HIV endemic setting. Cerebrospinal Fluid Research. 2009.

4. Hamasur B, Kallenius G, Svenson SB. A rapid and simple method for large-scale purification of mycobacterial lipoarabinomannan. FEMS Immunology and Medical Microbiology. 1999.

5. 彭蓉，乐军，金瑞良，景灵杰，韩敏。脂阿拉伯甘露聚糖的纯化及其对肺结核的诊断价值。中国防痨杂志，2011, 33(03):149-152.

在畜禽营养和饲料生产中，采用单一的木聚糖酶或甘露聚糖酶并不能高效降解饲料中的半纤维素，然而，如果将木聚糖酶和甘露聚糖酶以适当的比例进行添加，就会显著提高半纤维素的降解效率。半纤维素酶的应用方法包括体外蛋白酶降解和体内蛋白酶降解两种方式：体外蛋白酶降解法是指将木聚糖酶—甘露聚糖酶复合饲用酶制剂与畜禽饲料搅拌均匀，在合适的温度和pH 值条件下进行发酵，再将发酵产物饲喂畜禽；体内蛋白酶降解法是指将复合酶制剂直接添加到动物日粮中，借助肠道内环境发挥酶降解半纤维素的功效。

单胃动物饲料

饲料中主要营养成分来源于植物，如玉米、小麦、大麦和大豆，其细胞壁中的半纤维素会在单胃动物消化道形成非淀粉高黏性多糖，妨碍营养物质（脂肪、碳水化合物和蛋白质）与消化液的接触，降低消化利用率，减少饲料转化效率，最终影响动物健康和生产性能。特别是以半纤维素含量较高的植物做基础饲料时，该种抗营养性尤为明显。然而，研究表明，在日粮中添加半纤维素酶（木聚糖酶和甘露聚糖酶）可显著改善这一问题。

猪饲料

半纤维素酶对猪生长有明显的促进作用。许梓荣等研究了在稻谷日粮中添加0.2%半纤维素酶对“长嘉”二元生长猪生长性能的影响，结果显示，稻谷日粮添加半纤维素酶可明显提高生长猪日增重（8.78%）、饲料转化效率（9.42%）和免疫力。Lv 等研究表明，β-甘露聚糖酶可改善DLY猪（日粮为玉米—豆粕型）日增重、采食量、饲料转化效率和养分表观消化率。饲料中加入木聚糖酶可显著提高DLY 猪生长性能、养分消化率，改善肠道微生态。以上结果均表明，半纤维素酶可明显改善猪的健康状况， 提高猪的生长性能，增强猪的免疫力及维护肠道健康。

鸡饲料

王苑等研究表明，在日粮中添加不同水平饲用木聚糖酶和甘露聚糖酶可提高肉鸡平均日增重和采食量，降低料重比；而且木聚糖酶和甘露聚糖酶具有良好的交互效应，对于改善肉鸡生长性能和提高养分表观消化率的作用优于单一使用酶制剂。Mehri 等研究了日粮中添加β-甘露聚糖酶对肉鸡生长性能、肠道微生物和免疫系统的作用，结果显示，日粮中添加900 g/t β-露聚糖酶可显著提高肉鸡日增重、采食量和饲料转化效率，维护肠道微生物区系和增强免疫力。在蛋鸡营养中，半纤维素酶也能提高蛋鸡的产蛋率和产蛋重。Mirzaie 等在小麦日粮中添加适量的木聚糖酶，当日粮中小麦配比达到69%时，添加木聚糖酶可提高蛋鸡生长性能、产蛋率、蛋重和饲料转化效率。因此，在蛋鸡和肉鸡日粮（玉米—豆粕型和小麦—豆粕型）中添加适宜水平的半纤维素酶可提高肉鸡和蛋鸡相关生产性能，而且两种酶联用时效果更佳。

反刍动物

青贮饲料是经过有益微生物如乳酸杆菌、乳酸球菌等的作用，将作物转化为酸性物质（如乳酸），有利于有益菌的增殖，抑制有害微生物的生长，进而保持作物营养成分。半纤维素酶（木聚糖酶—甘露聚糖酶复合酶制剂）可分解植物细胞壁，促进青贮过程中的乳酸发酵，减少酸性和中性洗涤纤维素水平，增加反刍动物青贮饲料的消化效率，提高反刍动物生长性能。此外，反刍动物日粮中直接添加半纤维素酶，也可提高平均日增重、采食量、饲料转化效率、营养成分消化率。

在自然界中，D-甘露糖广泛存在。为了获得纯净的D-甘露糖产品，可以通过提取和分离提纯植物多糖的方法，也可以通过化学法和生物转化法制备。

1.提取法

咖啡渣和棕树籽是常用的提取原料。咖啡渣中含有丰富的多糖类物质，主要是甘露聚糖，可以通过水解甘露聚糖来获得D-甘露糖。棕树籽经过酸水解、碱中和、酶反应等步骤提取出含有D-甘露糖的液体，经过脱色、浓缩、分离和结晶等步骤后得到纯净的D-甘露糖。

2.化学合成法

化学合成法是利用化学试剂使葡萄糖发生差相异构反应来制备D-甘露糖。这种方法需要严格控制酸的加工浓度和温度。通过水解蔗糖或葡萄糖，再经过一系列反应步骤得到D-甘露糖。

3.生物法

生物法包括生物发酵法和生物转化法。生物发酵法利用微生物对多糖或单糖进行发酵来产生D-甘露糖。生物转化法则是利用酶促反应将果糖或葡萄糖转化为D-甘露糖。这些酶可以从多种来源获得，但转化率和副产物生成是需要考虑的因素。

参考文献：

[1]柳春.D-甘露糖的制备技术及应用研究进展[J].大众科技,2020,22(12):41-44.