磷酸脂磷酸水解酶1抗体是一种多克隆抗体,可以特异性结合磷酸脂磷酸水解酶1,用于相关实验的检测。
磷酸酶是一种能够去磷酸化底物的酶,通过水解磷酸单酯将底物上的磷酸基团除去,生成磷酸根离子和自由的羟基。磷酸酶的作用与激酶相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子如ATP将磷酸基团加到底物上。碱性磷酸酶是一种在许多生物体中普遍存在的磷酸酶。
磷酸酶与激酶或磷酸化酶的作用相反。磷酸化可以激活或失活酶,也可以影响蛋白-蛋白间的相互作用。因此,磷酸酶在许多信号转导通路中起着重要的调控作用。磷酸化或去磷酸化并不一定对应酶的激活或抑制,一些酶有多个磷酸化位点参与调控。例如,周期素依赖性激酶(CDK)有多个能够被磷酸化的特定氨基酸残基,激活或抑制取决于不同残基的磷酸化。磷酸化在信号传导中的重要性在于它能够调控结合磷酸的蛋白的功能。磷酸酶在去磷酸化中起着重要的反向作用,如果磷酸化是激活作用,去磷酸化就是抑制作用。
以大肠杆菌DH1为宿主菌,在已有生产番茄红素的菌株基础上,通过在初始菌基因组中增加合成番茄红素途径中的关键基因crt EIB拷贝数,成功提高了番茄红素产量。此菌株被命名为lyc011。
大肠杆菌MEP途径中存在一系列磷酸化中间代谢产物,而具有底物广谱性的磷酸水解酶可能对这些中间产物具有催化活性。通过预测和系统生物学的方法,对DH1基因组中可能对番茄红素合成途径中间代谢产物具有催化活性的磷酸水解酶进行了分析和预测,得到了57个磷酸水解酶基因。
利用CRISPR干扰(CRISPR interference, CRISPRi)原理对这些基因对番茄红素生产的影响进行了筛选。通过构建含有双single guide RNA(sg RNA)的质粒,靶向上述57个基因,将pd Cas9质粒和sg RNA表达质粒导入到初始菌lyc011中,成功筛选出了15个对番茄红素产量具有正向作用的磷酸水解酶基因,分别为:yjj G, aph A, nag D, yqa B, yid A, pph A, bac A, glp Q, pgp B, spo T, cpd B, nud J, dgt, pho Q。这项研究可以更深入地理解酶的底物非特异性对代谢系统的影响,特别是对整合的异源途径的影响。
通过解除异源途径和内源代谢的相互作用,这种方法在未来的代谢工程研究中具有潜力作为一种通用策略。
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