间充质干细胞无血清培养基通过避免传统含胎牛血清的培养基所带来的异源成分和成分不明确等缺点,采用一系列可替代胎牛血清的组分,包括必需和非必需氨基酸、维生素、激素、生长因子、有机和无机化合物以及其他补给成分。
1. 在实验开始前一小时,将无血清添加剂成分放置于2-8°C进行溶解,并轻轻摇晃试剂瓶使冻融的成分充分混合。
2. 使用75%酒精消毒试剂瓶的开口外壁。
3. 待试剂瓶上的酒精挥发干净后,无菌打开各个试剂瓶。
4. 将添加剂加入间充质干细胞无血清基础培养基中。
5. 无菌吸取基础培养基洗涤添加剂瓶,尽可能将添加剂的所有成分完整地加入基础培养基中。
6. 重复上述步骤两到三遍。
7. 轻轻摇晃基础培养基瓶子,使各种成分充分混匀,并将配制好的完全培养基放置于4℃保存。
该培养基适用于多种来源的人类间充质干细胞的生长,如脐带(UCM-hMSC)、骨髓(BM-hMSC)、脂肪组织(AT-hMSC)等。
[1] 杨婷、陈广华、薛胜利、乔曼、刘慧文、田竤、乔淑敏、陈峰、陈志哲、孙爱宁 吴德沛。血清和含胎牛血清培养基培养的脐带间充质干细胞生物学特性比较研究。中华血液学杂志