FFPE 样本（石蜡样本）要求

A. 组织固定要求（FFPE 蜡块与 FFPE 切片一样）

a)  组织离体时间：缺血离体时间不宜超过1小时，组织块离体后应尽快固定

b)  组织固定液：推荐10%NBF或4%PFA,10%NBF穿透力强，4%PFA穿透力弱一些

c)  固定时间：根据组织块大小而不同，0.5cm直径组织块一般18-24小时。固定时间不宜太长，例如几天，几周，甚至几个月

B. FFPE蜡块要求（如果客户送蜡块样本）

a)  组织固定需符合A中的要求

b)  存放条件：将蜡块放入干燥器中，保持干燥环境，室温保存。干燥器如下图所示

c)  蜡块年龄：小于3年的蜡块nanostring做过实验验证没有问题，3-10年的蜡块nanostringTAP项目做过类似服务可以得到比较理想结果，超过10年的蜡块需要客户自行验证蛋白 与 RNA 的完整性

d)  蜡块切片要求：由于蜡块表面的空气氧化，所以开始的几张切片不用于实验，挑选远离蜡块表面的切片

e)  切片厚度：5μm

f)  组织切片位置：组织切片需位于载玻片中央

C. 切片要求（如果客户送切片样本）

a)  组织固定需符合A中的要求

b)  蜡块的保存与年龄需符合B中的要求

c)  切片厚度：推荐5μm，越薄越好

d)  组织切片位置：组织切片需位于载玻片中央（下图绿色矩形区域，左边为载玻片磨砂区域）

e)  切片存放条件：将切片放入干燥器中，保持干燥环境，放置4度或室温保存

f)  切片有效时间：我们推荐使用新鲜切片，保存时间需小于 14 天

A. FF样本块要求

a)  组织块离体后应立即用液氮或者异戊烷速冻

b)  速冻后的组织块需用OCT包埋剂包埋

c)  包埋后的组织块需在负80度保存

B. FF样本切片要求

a)  FF切片需要冷冻切片机上完成

b)  切片后应立即贴片至载玻片中

c)  切片厚度：推荐5μm，越薄越好

d)  组织切片位置：组织切片需位于载玻片中央（下图绿色矩形区域，左边为载玻片磨砂区域）

e)  切片后，FF组织块切口出需用OCT包埋剂覆盖，防止组织块干燥

f)  切片可在负80度保存数周