人细胞色素C(CYT-C)ELISA KIT是一种采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)的检测方法。该方法通过在预先包被抗原的包被微孔中加入标本、标准品和HRP标记的检测抗原,经过一系列操作流程,可以检测出待测样本中人细胞色素C的含量。
人细胞色素C(CYT-C)是一种重要的线粒体蛋白,参与细胞呼吸链和凋亡途径。
该研究旨在观察大黄素在体外对肝癌细胞凋亡以及线粒体细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C)和线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO(Smac)表达水平的影响,进一步探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。
研究方法:首先培养人肝癌SMMC-7721细胞株,然后将细胞分为不同组别,分别用不同浓度的大黄素进行处理,并设置阳性对照组。通过流式细胞仪、荧光定量PCR和蛋白印迹技术等方法,检测细胞凋亡率、Cyt C和Smac mRNA的表达以及Cyt C和Smac蛋白的表达情况。
研究结果显示,大黄素处理后的肝癌细胞早期凋亡率增高,活细胞率减少。同时,Cyt C和Smac mRNA的表达增强,Cyt C和Smac蛋白的表达也增加。这表明大黄素通过促进Cyt C和Smac的转录合成,并促进它们从线粒体膜间隙向细胞质内的释放,从而通过线粒体Caspase依赖凋亡通路诱导肝癌细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。
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