螺旋体染色液的操作步骤是什么?

螺旋体是一类细长、弯曲呈螺旋状、运动活波的原核细胞型微生物，具有细菌的基本结构。螺旋体染色液是一种用于显示螺旋体的染色方法，主要用于显示梅毒螺旋体和钩端螺旋体。

产品组成

操作步骤

1、将组织切片置于10%福尔马林中固定2～4天。

2、流水冲洗过夜。

3、95%乙醇浸泡24小时。

4、蒸馏水浸洗并不停摇动，直至组织下沉为止。

5、更换新的蒸馏水浸洗10分钟。

6、入硝酸银溶液，加盖置于37℃恒温箱孵育1天，更换新的硝酸银溶液，继续37℃恒温箱孵育2天。

7、蒸馏水浸洗3次，每次10分钟。

8、入配制好的Levaditi还原液，加盖室温避光孵育2天。

9、蒸馏水浸洗3次，每次2分钟。

10、常规脱水透明，浸蜡包埋。

11、切片厚度6～8μm，贴片，烤干。

12、二甲苯脱蜡2次，中性树胶封固。

染色结果

梅毒螺旋体、钩端螺旋体呈黑色或棕黑色。

注意事项

1、实验所用器皿需用硫酸洗液浸泡，洗干净。

2、步骤4、5的洗片步骤很有必要，一定要把组织中的甲醛和乙醇彻底清除，否则易导致组织内银盐的沉淀。

3、某些细菌和真菌菌丝也会被该染液染成黑色，应注意螺线体为螺旋状形态，并加以鉴别。

主要参考资料

[1]螺旋体染色液(LEVADITI硝酸银法)操作说明