最近在研究一种药物是否通过激活PI3K/Akt通路发挥治疗作用，设置了①空白组②疾病组③疾病+药物治疗组④疾病+药物+LY294002组。设置第④组的目的是打算抑制PI3K通路后看药物是否继续发挥作用。但问题出现了：第④组实验确实出现了药效变差的结果，但无法说明到底是①通路被阻断药物起不了作用，还是②LY294002本身抑制了通路，对病情造成了恶化，原发病+恶化的双重打击超出了药物的治疗范围；

还有一个问题：第④组应该以②疾病组还是③疾病+治疗组 作为比较对象，我偏向于第④和第②组进行比较，因为研究的是药效，那么药效必定以原始疾病状态作为参照才能体现，但是这样又出现了第④组相对于第②组出现了两个变量的问题。