在哺乳动物细胞内,PARP酶家族包括多个成员,但只有PARP1、PARP2和PARP3参与DNA损伤修复活动。PARP1酶参与细胞内大部分PARP酶活动,而PARP3与PARP1形成异构二聚体参与DDR反应。PARP1和PARP2参与DNA损伤修复,而PARP3在DNA双链损伤修复中起支架作用。
PARP1和PARP2虽然功能有部分重叠,但对底物选择性有差异。PARP3在DNA双链损伤修复中起招募修复蛋白和DSB末端连接复合物的支架作用。PARP是DDR通路的重要DNA断裂分子感受器,在DNA损伤后被激活,PARP可以感受DNA单链损伤缺口,并结合到DNA断裂部位,结合PARP酶后的催化活性增强500倍以上。
PARP通过自身的糖基化来催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)分解为烟酰胺和ADP核糖,再以ADP核糖为底物,使受体蛋白以及PARP1自身发生“PAR化”,形成PARP-ADP核糖支链。这样一方面可以阻止损伤部位周围的DNA分子与损伤的DNA进行重组,同时吸引DNA修复蛋白、组蛋白H1和一系列转录因子结合在DNA损伤处;另一方面,可以降低PARP1与DNA的亲和性,使PARP1从DNA断裂处解离,然后DNA修复蛋白与DNA缺口结合,对损伤部位进行修复。而PARP1的“PAR化”会被其他酶清除,使得PARP1恢复活性。
PARP(剪切的)单克隆抗体是一种用于检测PARP的抗体。该抗体含有氨基酸的合成肽,产品为100 ug无色溶液,浓度为0.5 mg/ml,溶解于包含有50%甘油,1% BSA和0.02%叠氮钠的PBS缓冲液中。
PARP(剪切的)单克隆抗体可用于多种实验,包括WB,IP,IF,ICC,FC等,不同应用浓度不同。该抗体应在-20℃保存,稀释液可以在-20℃或4℃保存,有效期为一年。稀释后的抗体,请在4℃保存。回收的抗体通常可以重复使用5-10次。如果抗体出现轻微混浊现象,可以离心后使用。如果抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则应废弃该抗体。
[1] 郑宇静, 左彤彤, 封宇飞. 靶向 DNA 损伤反应途径: PARP 抑制剂抗肿瘤治疗研究进展[J]. 2018.