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HPLC分析?

第一次发帖不太熟,请多见谅。
①本人现在在做的是一种微生物次级代谢产物的分离纯化,根据初步试验发现这种物质对常见的有机溶剂(甲醇乙醇、DMSO等等)均有一定溶解度,但溶解度均偏低,所以在做分析的时候遇到比较多的麻烦,请问各位有什么好的建议?
②这个问题比较重要,这种物质我经过两次正相硅胶柱分离、一次反向ODS柱收集,得到了它的一个组分。HPLC图谱如下,在12.635min为我需要的组分,但是比例仅仅只有65.9%,所以我想问该如何优化后面的实验呢,有没有好的建议。
③HPLC使用的是反相C18柱,梯度洗脱,流动相为乙腈和0.005%TFA 显示全部
2人参与回答
,销售 2019-08-25回答
1 归一化法比例并不能代表真实纯度。
2 可继续尝试正相和反相各一次,对比纯化效果。
3 可重结晶么?在常见有机溶剂中有一定溶解度的话,可尝试热熔自然冷却重结晶看看。
总之,试验之后才能形成结论,建议要形成结论的试验都平行操作。
,化工工艺工程师 2019-08-25回答


 
 
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