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如何分离和培养γδT细胞?

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,暂无简介 2020-02-19回答

最近的研究表明,γδT细胞具有非MHC限制杀伤肿瘤细胞的能力,这使得它们成为理想的细胞制剂原料。它们可以在没有抗原呈递细胞的作用下直接杀伤肿瘤细胞,并且对于低表达MHC分子的肿瘤细胞也具有良好的杀伤效果。然而,目前还没有针对γδT细胞的专门培养方法。将普遍适用的T细胞培养方法应用于γδT细胞的培养并不具备针对性,也不利于γδT细胞的扩增和对肿瘤细胞的杀伤活性。幸运的是,现在有一种Gamma-delta T 细胞分离试剂盒(正)可以简单快速地从血液或组织中分离出纯度高达90%以上的γδT细胞,分离时间约为20分钟。

产品特点

产品性能

该产品是一种白色微珠漂浮于500μL无色澄清液体上的分离试剂,可以用于50ml外周血中Gamma-delta T +细胞的分离纯化。

产品保存

为了保持产品的活性,建议将其存放在2-8°C的避光环境中。

微珠保存溶液的PH值为7.4,含有0.5%BSA和0.02%叠氮钠。

产品使用

以下是使用该产品分离和培养γδT细胞的步骤:

  1. 使用快速单个核细胞分离管Easy Ficoll快速分离单个核细胞。
  2. 将本产品加入步骤1分离后的单个核细胞样品中,使分离微珠与细胞充分混合1分钟。
  3. 加入10ml PBS,静置2分钟,使用针筒移去下层液体。
  4. 重复步骤3一次。
  5. 加入5ml洗脱液,用1ml枪头吸打10次,静置2分钟。
  6. 针筒吸出下层液体即含有目的细胞,可直接供下游实验使用。

主要参考资料

[1] CN201810124819.7 一种γδT细胞的培养方法

[2] Gamma-delta T 细胞分离试剂盒(正)说明书

[3]CN201710084479.5 一种肠γδT细胞的分离方法

 
 
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