STR(Short Tandem Repeat)是指基因组中由2-6个碱基组成的短串联重复序列,因其高度多态性被广泛应用于DNA指纹分析和遗传标记识别。检测流程通常包括DNA提取、PCR扩增、电泳分离以及数据采集和分析等步骤。
一、样本准备与DNA提取:?
从血液、唾液、组织或细胞样本中提取基因组DNA,常用方法包括酚/氯仿法或商业化试剂盒?。
检测DNA浓度和纯度,确保样本质量满足后续需求。
二、PCR扩增:
利用聚合酶链反应(PCR)技术选择性地扩增目标STR位点的DNA片段。这一步骤需要设计特异性引物,以便只扩增所需的短串联重复序列。
三、电泳分离与检测?
通过毛细管电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物,荧光标记的片段在电泳中产生信号?。
使用自动化设备(如ABI 3500遗传分析仪)检测片段长度并生成电泳图谱。
四、数据分析与分型
自动化系统采集电泳数据并进行分型;
通过比对STR数据库判断个体身份或细胞系来源。
五、质量控制与结果验证?
重复实验并设置阴阳性对照,确保数据可靠性?。
对于法医或临床样本,需遵循标准化流程(如《法医物证鉴定 X-STR 检验规范》)以减少误差。?
六、报告生成:
最终,将分析结果整理成报告,包括样本的STR基因分型结果附表、峰图等,用于验证样本的身份或识别潜在的交叉污染。?
STR分型技术的检测流程清晰且高度自动化,主要包括DNA提取、PCR扩增、电泳分离和数据分析四个关键步骤。每一步都有多种方法可选,具体取决于样本类型和检测目的。该技术在法医学、医学遗传学和细胞鉴定中具有重要应用价值 。?