蓝白斑筛选（Blue-White Screening）的原理是什么？它能确保克隆完全正确吗？

这是一种利用 β-半乳糖苷酶 α-互补（α-complementation） 现象的快速筛选方法。原理： 载体上带有 β-半乳糖苷酶的 α 肽段基因，宿主菌带有 ω 肽段基因。两者融合时能分解培养基中的 X-gal 产生蓝色物质（菌落变蓝）。当目的片段成功插入到载体的多克隆位点（MCS）时，破坏了 α 肽段的读码框，无法形成有活性的酶，菌落保持白色。注意： 白斑不等于 100% 正确。 如果片段插入导致移码、或者切口碱基受损导致 α 肽段失活，即使没有连入正确片段，菌落也会呈白色。最终必须通过 PCR 或测序验证。