胶原蛋白酶是一种大分子蛋白质，分子量大于300000，无法直接被人体吸收。但是，经过消化系统的作用，胶原蛋白酶会被分解成小分子氨基酸，然后被人体吸收利用。它能够在不同环境中被分解，促进体内蛋白质的分解与生长，为衰老的组织提供补充。此外，蛋白酶还有助于皮肤吸收蛋白质，使皮肤充满弹性和光泽。

胶原蛋白酶的功效

摄入胶原蛋白酶后，人体会吸收所需的蛋白酶，多余部分会被排出体外。胶原蛋白酶能够支撑脂肪组织和皮肤的弹性架构，具有改善功能，可以与手术效果媲美。它能有效消除肥胖臃肿和脸部衰老下垂，紧致和提升皮肤。

选择胶原蛋白酶的原因是它具有高安全级别和良好的相容性，效果明显自然。它的非生物源性确保不会引起过敏等危险症状。蛋白酶参与人体内的酶化作用，保证了无排异性。胶原蛋白酶的螺旋结构对衰老和下垂的肌肤有提升作用，广泛应用于美容领域。其网状物理结构确保不会因剧烈运动而移位或流失。

胶原蛋白酶在工业、美容和医药领域有广泛应用。在工业领域，它被用于皮革制造厂，用于脱毛和软化皮质产品，提高工作效率和改善工作环境。在医学领域，胶原蛋白酶可用于治疗支气管炎、消化不良、肠胃不适、血管炎和口腔净化处理。在美容方面，静脉注射胶原蛋白酶可以补充皮肤水分、平滑皱纹、淡化疤痕和去除色斑。然而，过度使用可能引起副作用，如腹泻和腹痛。此外，胶原蛋白酶还在日常生活中用于嫩化肉类、澄清酒类和蚕丝脱胶。

胶原蛋白酶是一种能在特定的pH和温度下切割胶原蛋白的酶类，主要用于水解结缔组织中的胶原蛋白，适用于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。当需要解离含有大量结缔组织或胶原成分的硬组织时，胰蛋白酶效果较差，可以考虑使用胶原酶。

胶原蛋白酶的分类

胶原蛋白酶来源于许多动物的组织细胞和微生物，其中细菌是主要来源，已发现40多种。商业化提供的细菌胶原酶主要分为4种类型，根据其活性的差异进行分类。

（1）胶原酶Ⅰ型：含有各种酶活力，通常用于制备上皮细胞、肝、肺等组织来源的细胞。

（2）胶原酶Ⅱ型：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于制备心脏、骨、肌肉等组织来源的细胞。

（3）胶原酶Ⅲ型：含有较低的蛋白酶活性，常用于制备乳腺细胞。

（4）胶原酶Ⅳ型：含有低胰酶活性，通常用于制备胰岛细胞或需要维持受体完整性的细胞。

胶原蛋白酶在细胞培养中的应用

原代培养是从供体获取组织或细胞进行的首次培养，也称为初代培养。胶原蛋白酶在原代细胞培养中的酶消化培养法中使用，有助于将组织块分散成细胞团或单个细胞，促进细胞快速生长。

新教材、老教材中其实对于细胞培养用"胰蛋白酶"还是"胶原蛋白酶"这一问题均有直接阐述，但没有说明二者区别并辨析相关原因：

——选择性必修三P44

——选择性必修三P45

尽管胰蛋白酶和胶原蛋白酶都是细胞培养中常用于将体积较小的组织块分散成细胞团或单细胞的消化液，但它们的作用机制及适用情况并不相同。

胶原蛋白酶的作用特点

胶原蛋白酶是能在一定的pH和温度下切割胶原蛋白主体螺旋多肽链的酶类，主要用于水解结缔组织中的胶原蛋白，适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。当拟消化的组织较硬，内含较多的结缔组织或胶原成分时，用胰蛋白酶解离细胞效果较差，可采用胶原酶解离细胞法。钙、镁离子以及血清不会影响胶原酶的消化作用，其消化作用缓和，且无需机械振荡。

胰蛋白酶的作用特点

胰蛋白酶分离自牛、猪等动物的胰，作用于与赖氨酸或精氨酸相连接的肽链，除去细胞间黏蛋白及糖蛋白，从而使细胞分离，是应用广泛的消化物，适于消化细胞间质较少的软组织，如胚胎组织、羊膜、上皮组织、肝、肾等软组织以及传代细胞等。胰蛋白酶的消化作用与酶的浓度、pH、温度、组织块的大小以及组织的硬度都有关系。胰蛋白酶浓度过大或消化时间太长，会导致细胞被消化;但反之消化不充分也达不到分散细胞的目的。此外，血清明显抑制胰蛋白酶的活性，Ca2和Mg2+对胰蛋白酶的活性有一定抑制作用。

在细胞培养中的使用方法

原代培养

原代培养是从供体获取组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养。由于取得的组织和细胞刚刚离体，生物性状尚未发生较大变化，具有二倍体遗传性状，在供体来源充分、条件稳定的情况下（年龄、性别），能在一定程度上反映体内状态。原代培养的组织通常由多种细胞成分组成，较为复杂，即使培养较纯的单一类型的细胞，如上皮或成纤维细胞，也仍然存在着异质性。正因如此，胰蛋白酶和胶原酶均可在原代细胞培养中的酶消化培养法中使用，以便将组织块分散成细胞团或单个细胞，使细胞从培养液中摄取营养和排出代谢产物，从而达到细胞快速长成单层的目的。本法尤适用于培养大量组织，细胞产量高。

传代培养

当原代培养成功，细胞生长增殖形成单层细胞后，会进一步扩展汇合，占满一切空间。此时，就需要进行分离培养，这一操作即称为传代或再培养。传代培养一般选择细胞生长的对数期进行。对于贴壁生长细胞的传代培养而言，通常采用酶消化法，且一般选用胰蛋白酶。这是因为传代培养的过程其实就是细胞的分离稀释，此时细胞间质较少，且不含较多的结缔组织或胶原成分。

经常会在网上或者是一些电视情节中说到木瓜的神奇作用，木瓜虽然有丰胸的成分，但是在入口的瞬间就会被唾液分解干净。不过这并不是说木瓜没有任何的作用，通过植物萃取技术，人们可从中获取木瓜蛋白酶这种物质。通过研究发现，在食品行业中，木瓜蛋白酶可用于肉类嫩化、啤酒澄清、饼干松化等用途。那么，木瓜蛋白酶怎么使用？

一、啤酒澄清剂。引起啤酒冷藏混浊的主要原因是啤酒中的蛋白质极易与多元酚结合成大分子的复合物。利用啤酒澄清剂中的木瓜蛋白酶对形成混浊的蛋白质有广泛的特异性，能把大分子的蛋白质降解成小分子的物质，提高了蛋白质与多元酚复合物的溶解度；另一方面，木瓜蛋白酶是一种具有生物活性的蛋白质，该蛋白质可与引起啤酒冷藏混浊的多元酚形成稳定状态平衡，防止了啤酒的冷藏混浊。

二、肉类嫩化剂。利用木瓜蛋白酶能裂解肉类中的胶原蛋白和肌肉纤维，而使肉的结构松散。由于木瓜蛋白酶是半胱氨酰基蛋白酶，能降解胶原纤维和结缔组织蛋白质，它将肌动球蛋白和胶原蛋白降解成为小分子的多肽甚至氨基酸，令肌肉肌丝和筋腰丝断裂，使肉类变得嫩滑，并简化蛋白质结构使人体食用后易于消化吸收。

三、饼干松化剂。利用木瓜蛋白酶的酶促反应，将面团的蛋白质降解为小分子的肤或氨基酶，降低了面团的拉伸阻力，使面团变得柔软、更有可塑性，减少弹性，易于成型。用量视饼干厂的加工方法和面团中蛋白质的含量不同而不同，研究表明每公斤面添加0.6-1.0万单位/克为佳。

除了在食品行业，木瓜蛋白酶在医药、化学试剂、饲料、纺织化妆品，特别是科研工程等方面都有广泛的应用，开发前景广阔。

       木瓜蛋白酶，又称为木瓜酶，是一种低特异性的蛋白水解酶，通过潘木瓜中的蛋白水解而制得。那么木瓜蛋白酶具有哪些特点呢？下面我们一起来了解一下。

       木瓜蛋白酶有广泛的应用领域。它可以用作啤酒的抗寒剂，通过水解啤酒中的蛋白质，减少冷藏后出现的浑浊问题。此外，它还可以用作肉类的软化剂，通过水解肌肉中的蛋白质和胶原蛋白，使肉类更加松软。此外，在谷物加工和肉类香料生产中也起到重要作用。

       生产木瓜蛋白酶时，通常使用未成熟的木瓜果实，经过提取乳液、凝固、降尘和干燥等步骤制得粗制品，而工业上主要使用的是粗制品。木瓜蛋白酶的生产方法主要有三种：热风烘干法、喷雾干燥法和膜分离冻干法。

       根据木瓜蛋白酶的特性，它的应用范围非常广泛。不仅可以应用于医药和食品行业，还可以用于饮料、化学试剂、饲料和纺织化妆品等领域。木瓜蛋白酶的发展前景广阔，它是一种不可或缺的化学添加剂，能够为我们的生活增添色彩。

椎间盘是连接相邻椎体两端的软骨盘，起到缓冲和支撑作用。髓核是位于椎间盘内的胶样物质，具有吸收振荡和分散压力的功能。随着年龄的增长，椎间盘发生退行性变化，如髓核钙化和纤维环碎裂，影响脊柱的运动。人椎间盘髓核细胞是通过胶原酶-中性蛋白酶混合消化法和软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，主要用于科学研究。

研究发现，白细胞介素-1β（IL-1β）对人椎间盘髓核细胞的基质金属蛋白酶-3、7、9、13的表达有影响。实验使用重组人IL-1β刺激体外培养的髓核细胞，通过甲苯胺蓝、番红-O染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行鉴定，以及RT-PCR和定量PCR检测基质金属蛋白酶的表达。结果显示，IL-1β的存在可以促进基质金属蛋白酶-3、7、9、13的表达，其中基质金属蛋白酶-7、13的表达增加明显。这表明IL-1β加速了椎间盘基质的分解，可能主要通过基质金属蛋白酶-7、13的作用。

主要参考资料

[1] 兽医大辞典

[2] 中国骨伤科学辞典

[3] 杨冬发, 叶伟, 王新光, 等. 白细胞介素-1β 对髓核细胞基质金属蛋白酶-3, 7, 9, 13mRNA 表达的影响[D]. , 2009.

野樱莓粉是由野樱莓磨成的粉末，不仅是一种水果，还可以直接入药。许多女性喜欢喝野樱莓粉，因为它富含花青素，这是一种天然的抗氧化成分。除了对皮肤有护理作用外，野樱莓粉还对身体其他方面有好处。那么野樱莓粉有哪些功效？是否有禁忌使用的情况呢？

野樱莓粉的功效与作用

1、延缓衰老

野樱莓粉富含强效抗氧化剂花青素，能够清除体内自由基，提高细胞活性，从而延缓肌肤衰老，特别是对女性来说，可以减缓衰老进程。

2、预防近视

野樱莓粉中的花青素还能保护眼睛，促进视网膜中视紫质的生成，提高视力和暗视力，减少眼干、眼涩、眼疲劳和视力下降等问题。

3、促进食欲

野樱莓粉的酸甜口味可以刺激胃液和唾液淀粉酶的分泌，促进胃消化，减少积食，增加食欲，对于胃口不好的人有帮助。

4、美容肌肤

野樱莓粉富含强效抗氧化剂花青素，可以提高弹性蛋白酶和胶原蛋白酶的活性，增加肌肤弹性，使肌肤光泽动人。

野樱莓粉的禁忌

野樱莓粉可以直接冲饮，也可以用于烘焙。然而，由于野樱莓粉味道偏酸，胃酸过多的人不建议饮用。此外，婴幼儿、孕妇和哺乳期妇女也不建议食用野樱莓粉。

野樱莓粉对人体有许多好处，适量饮用可预防近视，女性服用还可美容养颜，延缓衰老。然而，由于野樱莓粉口感酸，需注意禁忌人群的使用。购买野樱莓粉产品时，请选择品质可靠的品牌，只有优质产品才能发挥最大功效。

背景^[1-3]

半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体是一种多克隆抗体，能够特异性结合半胱胺酸蛋白酶蛋白-12，并广泛应用于体外检测半胱胺酸蛋白酶蛋白-12的免疫实验。

半胱氨酸蛋白酶（Caspases）是一类半胱氨酸蛋白酶家族，对于细胞的程序性死亡或凋亡起着重要作用，是活细胞通向死亡的关键因素。半胱氨酸蛋白酶的活化受到多种刺激的调控，包括配体-受体相互作用、生长因子剥夺和细胞功能抑制剂等。

所有已知的半胱氨酸蛋白酶都需要在天冬氨酸附近发生裂解，释放出一个大亚基和一个小亚基，然后这些亚单位结合成a2b2四聚体形成活性酶。

半胱氨酸蛋白酶包括组织蛋白酶B、H、L等，在溶酶体中广泛存在，主要参与细胞吞噬和细胞内多余物质的清除和消化。近年来，组织蛋白酶B（Cathepsin B，CB）的作用受到了广泛关注。在正常组织中，CB在酸性条件下活性最高，而在中性或碱性条件下无活性。然而，在肿瘤组织中，CB在中性或碱性条件下的活性更高，这似乎更适合于恶性肿瘤的代谢紊乱。

CB能够降解Ⅰ型胶原、LN、PG，并能够活化间质胶原酶原和Ⅳ型胶原酶原，从而降解基质中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原纤维，参与肿瘤的浸润转移。

应用^[4][5]

α-硫辛酸对糖尿病大鼠内质网应激相关分子GRP78和Caspase-12表达的影响

本研究旨在探讨α-硫辛酸（alpha lipoic acid,A-LA）对内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）介导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响。

实验采用SD大鼠，随机分为3组：对照组、糖尿病模型组和α-硫辛酸组。通过一次性注射链脲佐菌素（60 mg/kg）在左下腹腔建立大鼠糖尿病模型。

α-硫辛酸组每天按照60mg/kg的剂量灌胃，对照组和糖尿病组每天灌胃等量的0.9%氯化钠注射液。在12周后，检测血糖和心功能状态；使用原位末端转移酶标记技术（TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测细胞凋亡；使用Western Blot和免疫组织化学法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和半胱胺酸蛋白酶蛋白-12（Caspase-12）的蛋白表达水平。

结果显示，与对照组相比，糖尿病模型组大鼠的血糖明显增高（P<0.05），心功能受损；而α-硫辛酸组对糖尿病大鼠的血糖和心功能有一定程度的改善。与对照组相比，糖尿病组大鼠的心肌细胞凋亡明显增加（P<0.05），GRP78和Caspase-12的蛋白表达也增加。而α-硫辛酸组的心肌细胞凋亡明显降低，GRP78和Caspase-12的蛋白表达有所减少。

结论：α-硫辛酸对糖尿病心肌组织具有保护作用，其机制可能与降低GRP78的表达、拮抗Caspase-12以及阻断ERS启动的凋亡通路有关。

参考文献

[1] Ferri K F, Kroemer G. Organelle-specific initiation of cell death pathways. Nature Cell Biology. 2001.

[2] Min N, Amy SL. ER chaperones in mammalian development and human diseases. FEBS Letters. 2007.

[3] Szegezdi E, Logue SE, Gorman AM, et al. Mediators of endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis. EMBO Reports. 2006.

[4] Paschen W, Mengesdorf T. Cellular abnormalities linked to endoplasmic reticulum dysfunction in cerebrovascular disease-therapeutic potential. Pharmacology and Therapeutics. 2005.

[5] 王国贤, 李瑞芳, 商淑慧, 李飞, 李兆刚, 刘珊珊. α-硫辛酸对糖尿病大鼠内质网应激相关分子GRP78和Caspase-12表达的影响[J]. 解放军医学院学报, 2013, 34(01): 82-85.