表皮癌，又称Bowen病，是一种慢性病程的皮肤疾病，常表现为有鳞屑或结痂的单个斑块。该疾病可能发生恶变或转移，但其病因尚未明确，可能与日光和砷剂慢性刺激有关。多数患者年龄在60岁以上，男性患者较多。初发时，表皮癌呈淡玫瑰色或红褐色小片，边界鲜明而不规则，随后逐渐扩张隆起，形成大的斑块。损害的形态可以是环状、匐行状或不规则状，表面常附有粘连较紧的褐色或灰色鳞屑或厚痂。表皮癌可以发生在身体的任何部位，但常见于头面部。一般来说，患者没有自觉症状，治疗以手术切除为最佳选择，也可以使用激光、冷冻、电凝固等方法进行治疗。A431/表皮癌细胞是一种细胞株，源自一位85岁女性，属于D.J.Giard等人建立的细胞株系列之一。

表皮癌的相关研究

A431/表皮癌细胞A431在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤，在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。A431/表皮癌细胞A431是一个超三倍体人细胞株。有研究评价茅莓总皂苷对三种皮肤肿瘤的体外抗肿瘤药效作用。用A375黑色素瘤细胞、Hut-78人皮肤T细胞淋巴瘤细胞和A431/表皮癌细胞A431为癌细胞株，观察茅莓总皂苷的体外抗肿瘤作用。结果显示茅莓总皂苷对A375黑色素瘤细胞和Hut-78人皮肤T细胞淋巴瘤两种皮肤肿瘤细胞的增殖有明显的抑制作用，与对照组比较差异有显著性(P0.05)；对A431/表皮癌细胞A431无明显抑制作用。

主要参考资料

[1] 中国卫生管理辞典

[2] 茅莓总皂苷对三种皮肤肿瘤的体外抗肿瘤作用

利用细菌、酵母、藻类和植物成功合成了金、银、镉、铂、锌、铜等多种纳米粒子。细菌合成的纳米颗粒可以是胞外的，也可以是胞内的。硫化镉（CdS）纳米颗粒或量子点广泛应用于太阳能电池、电池和各种电子设备。镉纳米晶体由于具有独特的荧光性质而被用作荧光团和生物标记剂。然而，由于合成过程繁琐和各种有毒化学物质的使用，使这些量子点在生物领域的应用受到了限制。

在该研究中，日本九州科学技术大学的研究人员利用生物合成技术，通过细菌酶硫酸盐还原酶的影响，成功地使大肠杆菌合成了CdS纳米颗粒。他们采用了四种不同比例的氯化镉和硫化钠来合成硫化镉纳米粒子，并对其抗菌活性、溶血活性和细胞毒性进行了研究，为硫化镉纳米粒子在肿瘤治疗中的应用提供了依据。

氯化镉和硫化钠不同配比(a 1:1, b 2:1, c 3:1, d 4:1)合成的CdS纳米粒子的SEM图

实验过程

大肠杆菌的菌种(MTCC 10312)接种在3ml的培养基中，在培养箱（37℃ 160 rpm）中孵化24h 。再取2%转移到50ml的培养基并放入培养箱（37℃ 160 rpm）孵化24h。孵化完成后进行离心，取上清液用于纳米颗粒的合成。配制四种不同比例(1:1、2:1、3:1和4:1)的氯化镉(0.25 M)和硫化钠(0.25 M)分别在不同的试管中反应。在产生橙黄色硫化钠悬浮液后，加入等量的细菌上清液，充分混合。悬浮液在60℃水浴中保持10-20 min，直至试管底部形成蓬松的橙黄色沉积，这表明纳米颗粒的形成。悬浮液冷却后在室温下孵育12h，观察到在试管底部有橙黄色晶体的形成。洗涤CdS纳米颗粒，然后用无菌蒸馏水洗涤，45℃风干，6℃保存。之后对产物使用 SEM、EDX、FTIR、XRD等手段进行表征。后续结果表明，在氯化镉和硫化钠为4:1时，氯化镉与硫化钠的合成度最高，且CdS纳米颗粒对所有菌株的抑制率最高。

 a：CdS 纳米颗粒对 B16F10 细胞的抑制百分比；b：阳性对照 (5-ALA) 对 B16F10 细胞的细胞毒性；
c：CdS 纳米颗粒对 A431 细胞的抑制百分比；d：阳性对照（5-ALA）对 A431 细胞的细胞毒性。

在研究中，作者对CdS纳米颗粒对小鼠肌肉样皮肤黑素瘤(B16F10)和人表皮样癌(A431)细胞系的细胞毒性进行了测试，结果显示，0.2 mM浓度对B16F10的抑制率为75.71%，0.1 mM浓度对A431细胞系的抑制率为81.53%。与5-丙烯酸(5-ALA)抗癌药物相比，CdS纳米颗粒对癌细胞的杀伤作用更明显，在1 mM下 5-ALA对B16F10细胞和A431细胞的抑制率分别为31.95%、33.45%。以上结果表明，硫化镉纳米粒子相比于标准的抗癌药物有更好的细胞毒性。因此，硫化镉纳米颗粒可以与生物组分结合或覆盖，可用于药物靶向、荧光团和生物标记剂的领域。

总结语

在硫酸盐还原酶的作用下，作者利用大肠杆菌合成硫化镉纳米颗粒，并对硫化镉进行了抗菌性能以及细胞毒性的研究，其中对硫化镉的表征手段值得我们借鉴学习。文中关于使用四种不同比例的氯化镉和硫化钠合成硫化镉纳米粒子并且探究出最佳比例的实验方法也值得我们在今后实验中进行参考。

背景及概述^[1]

恶性黑色素瘤细胞株A375是一种快速增长的皮下肿瘤，可在小鼠体内形成类似于恶性黑素瘤的肿瘤。A375细胞主要来源于多个研究机构和大学。

应用研究^[1-2]

一项研究评价了茅莓总皂苷对三种皮肤肿瘤细胞的体外抗肿瘤作用。该研究使用A375细胞、Hut-78皮肤T细胞淋巴瘤细胞和A431表皮癌细胞作为癌细胞株，观察茅莓总皂苷的抗肿瘤效果。结果显示，茅莓总皂苷对A375细胞和Hut-78细胞的增殖有明显的抑制作用，与对照组相比差异显著（P<0.05），但对A431细胞无明显抑制作用。

此外，还有实验研究了三氧化二砷对A375细胞的凋亡诱导作用。通过流式细胞术检测不同浓度的三氧化二砷对A375细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率的影响。结果显示，当三氧化二砷浓度分别为5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L时，A375细胞的早期凋亡率分别为9.75%、50.9%和43.7%，晚期凋亡率分别为2.10%、4.61%和11.2%，总凋亡率分别为11.85%、55.51%和54.9%。因此，三氧化二砷可以诱导A375细胞的早期凋亡和晚期凋亡，特别是在10μmol/L和20μmol/L浓度下，可以显著增加A375细胞的总凋亡率。

主要参考资料

[1] 茅莓总皂苷对三种皮肤肿瘤的体外抗肿瘤作用

[2] 三氧化二砷对恶性黑色素瘤A375细胞株凋亡的诱导作用

英文名称: Geneticin Sulfate\G418 Sulfate (sterile,endotoxin-free, ready to use)

级别: BR级

CAS号: 108321-42-2

分子式: C20H42N4O14S

分子量: 692.71

物理性状: 白色粉末，溶于水。

工作浓度: 遗传霉素的使用浓度跟细胞培养方式、细胞种类、载体DNA有关。 悬浮培养细胞更敏感，使用浓度低，贴壁细胞使用浓度高。

工作浓度范围：100~1000 μg/ml

常用浓度：200~500 μg/ml

CV1细胞：500 μg/ml

CHO细胞：700～800μg/ml

A431细胞：400 μg/ml

植物细胞：10μg/ml

酵母：125~500μg/ml

贮存条件: -20°C保存。

运输方式: 湿冰运输

描述

选择性抗生素（G418 硫酸盐）由细菌红橙小单孢菌生成，通过与原核和真核细胞中的核糖体结合，从而抑制蛋白合成。携带大肠杆菌 APH (3’) – I 和 APH (3’) – II 抗性基因可获得选择性抗生素（G418 硫酸盐）抗性。用于细菌时，选择性抗生素（G418 硫酸盐）用作选择性抗生素的浓度范围为 100 - 200 μg/mL，用于大多数哺乳动物细胞时，浓度范围为 200 – 500 μg/mL。本产品以 50 mg/mL 水溶液形式供应。

产品用途

在使用带有NeoR筛选标记的载体DNA转染真核细胞时，向培养基加入遗传霉素 可以杀死没有被转染的细胞，筛选出阳性转染细胞，建立稳定细胞系。遗传霉素可以在10到14 天时间内筛选出稳定细胞系。

本产品仅用于科研实验，不能用于临床治疗。

配制方法

1. 先将使用到的所有器具去除内毒素和其它污染源，仪器表面、工作台面消毒。

2. 在分析天平上称取G418粉末0.100 g，加10 mL无菌水溶液溶解。

3. 用0.2微米滤膜过滤除菌到无菌容器中，然后分装到 1.5 mL EP管中。

不建议使用螺旋盖管子，容易污染。-20度保存。

为避免污染和反复冻融，建议分装成小规格的，如500 uL。

波奇替尼是一种新型口服癌细胞抑制剂，用于治疗NSCLC、乳腺癌和胃癌，具有靶向性的酪氨酸激酶小分子抑制剂。对于吉非替尼和厄洛替尼耐药性EGFR L858R/T790M双突变细胞有很强的抑制作用。

波奇替尼和5-氟脲嘧啶，铂化合物，紫杉醇或吉西他滨的联合使用对于2号人体表皮(HER2)的过度表达显示出很好的协同抑制效果，是继第二代酪氨酸激酶抑制剂阿法替尼之后的一种新型第三代抗肿瘤细胞抑制剂。

波奇替尼的药理作用是什么？

波奇替尼特异性抑制HER2扩增的胃癌细胞生长，并抑制EGFR的磷酸化和下游信号级联放大的关键组分，比如STAT3，AKT 和ERK。波奇替尼也会通过激活HER2扩增的胃癌细胞中线粒体途径，诱导细胞凋亡和G1细胞周期阻滞。此外，在HER2诱发的和HER2非扩增的胃癌细胞中，波奇替尼与化疗剂发挥出协同作用。

在负荷N87人胃癌异种移植物的裸鼠体内，波奇替尼 (0.5 mg/kg p.o.)单独使用显著抑制肿瘤生长，波奇替尼与 5-FU联合使用显示出更有效的肿瘤抑制。此外，在各种EGFR和HER-2依赖性肿瘤异种移植模型，包括erlotinib敏感的HCC827 NSCLC细胞，erlotinib耐药的NCI-H1975 NSCLC细胞，HER-2过表达的Calu-3 NSCLC细胞，NCI-N87胃癌细胞，SK-Ov3卵巢癌细胞和EGFR过表达的A431表皮样癌细胞中，波奇替尼显示出优良的抗肿瘤活性。

波奇替尼的剂量方案是怎样的？

波奇替尼的最大耐受剂量是每天24mg一次，服用二周停一周或每天18mg一次，连续服用。标准给药方案是每天16mg一次（约等于17mg波奇替尼盐酸盐，换算比例为1:1.07，随餐或空腹，连续服用。无法耐受不良反应时，减量至14mg每天一次，甚至12mg每天一次。如果想采用间歇给药方式，可使用波奇替尼盐酸盐，24mg服用3天，停药一天；无法耐受不良反应时，则减量至18mg服用3天，停药一天。

波奇替尼的药代动力学特点是什么？

波齐替尼符合二室模型一级消除动力学，半衰期6.6小时，平均分布体积164升，平均表观清除率34.5升每小时，口服1.75小时后达到血药浓度峰值。随餐或空腹不影响Poziotinib的血药浓度。患者的体重对Poziotinib的吸收和血药浓度有影响。

波奇替尼的副作用有哪些？

波齐替尼的常见不良反应类似于阿法替尼，主要的3级不良反应为腹泻（10%）、口腔炎（18%）、粘膜炎症（26%）、皮疹（59%）、食欲下降（13%）、瘙痒（5%）、甲沟炎（5%）、低钾血症（10%）和痤疮性皮炎（10%），没有发生4级和5级不良反应。38%的患者需要一次减量，38%的患者需要二次减量，2名患者因为不良反应永久停药。