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我打算转染LncRNA到巨噬细胞,和CD4T细胞获得稳定表达,探讨其功能,要考虑做过表达和干扰实验,由于LncRNA基因长度比较长,从200到几千都有,请问是不是选择腺病毒包装比较好呢?
RAW246.7 是单核 - 巨噬细胞,如果培养条件不好,就容易被诱导分化,这也直接影响转染效率,我们实验室一般都会选择 RFect-siRNA 瞬时转染,本身 RAW264.7 巨噬细胞也是比较皮实的 , 比普通贴壁细胞略微难度要大一点
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也没有查过相关文献,siRNA的体内注射,在不同的组织中可能转染效率差别很大,?能否告知哪些组织的转染效率高,哪些低?
针对具体的组织器官,不同的注射方法会明显影响效果。比如,大脑神经细胞的体内转染,可以采用尾静脉注射和侧脑室注射,用侧脑室的方法就好得多。 Elite Fect-II 具有卓越的小核酸转染性能,用 Elite Fect-II 包裹 ApoB siRNA ,可抑制小鼠肝脏 90% 的 ApoB mRNA 表达。与此同时,小鼠外周血内胆固醇的浓度下降 60% ,持续时间长达 7 天以上。 干扰效率可以理解为干扰的细胞数量和全部细胞的数量的比例。
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