四驹--盖德问答-化工人互助问答社区

四驹

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给排水工程师

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他的提问 2311 他的回答 13801

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化学学科

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DMF？ 反应液中有DMF的话，在点板时吹干再放入展开剂。查看更多

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生物医学工程

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如何用明胶包被细胞培养板？ 1.我用的0.5%明胶，ddH20配置，高压灭菌锅灭菌即可。 2.6孔板一孔1ml0.5%明胶，使其均匀铺于板底，37℃培养箱放置。二十分钟即可，把多余明胶吸弃，无需风干或洗涤。3.293A怎么会状态不好，这个太好养了查看更多

#细胞培养板

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生物医学工程

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这细胞是污染了吗? 感觉细胞状态不好。应该没有污染查看更多

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生物医学工程

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集装进口机械密封改国产机械密封怎么做啊? 还是直接测绘备用密封好，对机械密封来说，测绘的精度足以保证满足使用要求。测密封腔不方便，要是没测准确更容易出问题。查看更多

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生物医学工程

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想将细胞培养上清中的蛋白浓缩10倍，应该采用什么方法比较好? （一）透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6 000－12 000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30％－40％浓度的溶液，将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后，仍可再用。（二）冷冻干燥浓缩法。这是浓缩蛋白质的一种较好的办法，它既使蛋白质不易变性，又保持蛋白质中固有的成分。它是在冰冻状态下直接升华去除水分。具体做法是将蛋白液在低温下冰冻，然后移置干燥器内（干燥器内装有干燥剂，如NaOH、CaCl2和硅胶等）。密闭，迅速抽空，并维持在抽空状态。数小时后即可获得含有蛋白的干燥粉末。干燥后的蛋白质保存方便，应用时可配成任意浓度使用。也可采用冻干机进行冷冻干燥。（三）吹干浓缩法，将蛋白溶液装入透析袋内，放在电风扇下吹。此法简单，但速度慢，且温度不能过高，最好不要超过15℃。（四）超滤膜浓缩法，此法是利用微孔纤维素膜通过高压将水分滤出，而蛋白质存留于膜上达到浓缩目的。有两种方法进行浓缩：一种是用醋酸纤维素膜装入高压过滤器内，在不断搅拌之下过滤；另一种是将蛋白液装入透析袋内置于真空干燥器的通风口上，负压抽气，而使袋内液体渗出。（五）凝胶浓缩法，选用孔径较小的凝胶，如SephadexG25或G50，将凝胶直接加入蛋白溶液中。根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。放入冰箱内，凝胶粒子吸水后，通过离心除去。（六）浓缩胶浓缩法，浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物，具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml～150ml。它能吸收低分子量的物质，如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等，适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后，蛋白质的回收率可达80％～90％。比浓缩胶应用方便，直接加入被浓缩的溶液中即可。必须注意，浓缩溶液的pH值应大于被浓缩物质的等电点，否则在浓缩胶表面产生阳离子交换，影响浓缩物质的回收率。这些都是常用的蛋白浓缩方法，你可以系统参考学习下，但要适用到你的实验要求里，不仅要浓缩蛋白还要除去小分子蛋白，但我不知道你所说的小分子蛋白是多大分子量的？小于20KD的可以选择0.45um的透析袋除去，挺便宜也很好用，但稍微大点的话，恐怕就不行了，这时恐怕用商品化的超滤管才是有效的方法，虽然贵点，但效果比较好，但它还要求离心机的转速能够达到150000RPM以上为好，祝顺利查看更多

#细胞培养

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生物医学工程

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拟南芥转染农杆菌后只开花不结夹? 长势太弱，不是有结的吗查看更多

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生物医学工程

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荧光定量PCR结果如何分析? 相对定量就得找到对照组作为参照，一般把对照组作为1其他的再进行相对比。这些过程一般都可以在仪器自带软件上实现，最好用自带软件分析，而不是自己去换算。而且每次拍板，最好有一个相同的样本作为一个参照，这样所有的都与同一个做比，就有可比性，否则没有多大意义。查看更多

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生物医学工程

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电极入水后，方波异常怎么办? 堵了。电极液充灌前端要加过滤器。查看更多

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生物医学工程

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材料科学

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继电器串联容性负载如何防止触点发生焊接粘连事故? 继电器吸合和释放时间受多方面的影响,不过,吸合时,我们可以先用小功率可控硅将继电器触电间电压降低,然后在短时间内将继电器吸合,之后释放可控硅;释放前,先将可控硅吸合,在释放继电器,最后再将可控硅断开,就可以大大延长继电器的寿命,而且可控硅可以用的功率小一点,但是,控制起来有点负载,要有时序控制！查看更多

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化药

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如何让溶出介质在37度澄清? 配置时采用烧开的配，放冷后定容试试。查看更多

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生物医学工程

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信号通路抑制剂使用后如何确定抑制效率? 一般是检测下游蛋白，如果下游蛋白因为抑制剂处理而未被激活，说明可能走的这个分子路径查看更多

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化学学科

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工艺技术

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苯甲酸会氧化成过氧苯甲酸吗？ 打一个红外看看有没有O-O 查看更多

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生物医学工程

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离心泵边界层网格总是出现错误，是怎么回事啊? 你说的加prism边界层，我试了下还是不理想，网格质量只有0.013，还是用全六面体或者全四面体网格做吧查看更多

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生物医学工程

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血清MiroRNA提取，OD值总是很低，怎么办? 使用是mirVana? PARIS? Kit 提取血清MicroRNA的260/280就是在1.3到1.4左右，这个不奇怪查看更多

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生物医学工程

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ls-dyna中用隐式-显式进行船撞斜拉桥分析，碰撞之前桥应力为何会发生较大变化? 一般有些波动是正常的，但是有大福波动就有问题，你需要确保，准静态的边界条件，重力等载荷在准静态和动力学中的设置完全一致，这一点很重要！查看更多

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化学学科

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化合物的HPLC含量已经达到99.0%，NMR积分比例严重不符是怎么回事? 3.59(br.)是水峰，对3.0（s)峰的积分值会略有干扰，更重要的因素应该来自CHO和CH2驰豫时间的差别，这样的例子也常见，需要改变参数测定，再仔细积分。这个图谱测定的还是挺好的。查看更多

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化学学科

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有机相中的化合物TLC检测不动，怎么会出现这种情况? 这和你的产品有关，板不大符合不要紧，你要过柱的话，可选用Rf值在0.1至0.3的展开剂过柱。多展开体系尝试不行的话就要小心了，最好还是先做个HPLC，可能就清楚了，有些东西正相不行，反相却很好。我们曾经做过一个化合物，闹了半天才搞清楚，原来目标产物是碰到玻璃就易分解的，更不用说TLC板上了。结果板也跑不好，柱又过不了。最后不得不先做个液相才成。查看更多

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化学学科

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催化剂的活性位点与金属分散性有什么关系? 先确定活性位点是什么？金属中心？酸碱中心？如果是金属的话，催化剂用量X活性金属负载量X分散度，就是活性中心的量。查看更多

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化学学科

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如何用XRD测量膜厚？使用掠入射衍射来做薄膜衍射检查薄膜结晶质量。固定X光入射角为一个小角度，比如1°，然后检测器大幅度旋转来收集信号。使用XRR来测试膜厚，你会看到一个衰减的震荡峰。这个震荡周期和膜厚有关。当然也可以利用软件来拟合求出膜厚。不过XRR光路调整不那么好做哦。如果是金属膜，并且只是单纯测试膜厚，XRF是更好的选择。查看更多

#XRD

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