首页
寡寒.
影响力0.00
经验值0.00
粉丝8
设备维修
含有三叔胺化合物的提纯? 为什么TCL上爬得很开的点,上硅胶柱子后一起出来了。过柱前还特意用洗脱剂爬了板,与先前小试的展开剂展开效果一样。 查看更多 1个回答 . 9人已关注
傅克反应溶剂硝基苯怎么分离产物,都是有机物? 最近设计一个傅克反应制备羧基化聚醚砜,反应物是聚醚砜和邻苯二甲酸酐,打算采用硝基苯作为溶剂,请问这个反应怎么分离产物,生成的产率咋样?溶剂换成DMF或者DMAC可行么?哪位朋友有好的建议啊,万分感激!查看更多 1个回答 . 11人已关注
NaBH4还原之前的前驱盐溶液中NaCl的作用? 系统总是说我有敏感词汇,故上传图片,如图。 查看更多 2个回答 . 17人已关注
仲胺和酚羟基选择性? 我的东西有一个仲胺和酚羟基,想让仲胺和卤代烃反应,怎么控制?谢谢!!! 查看更多 2个回答 . 3人已关注
管道末端的分支用弯头还是三通? 查看更多 1个回答 . 8人已关注
三元卷绕机张力怎么设定?解决电芯s型弯曲和气泡问题? 化成后发现电池超厚,析锂 s型弯曲,张力应该怎么设定来解决这些问题?查看更多 6个回答 . 1人已关注
5-氨基荧光素激发和发射? 最近想用5-氨基荧光素标记一种物质,求告知这种荧光染料的激发和发射波长大概在哪。 查看更多 1个回答 . 7人已关注
三氧化钼? 三氧化钼做电极用电化学工作站测试CV和充放电,参数怎么设置 查看更多 1个回答 . 2人已关注
浅析细胞转染效率低的原因? 影响细胞转染效率低下的原因主要有: 1、细胞太少或细胞密度太大 细胞密度对转染效率有一定的影响。不同的转染试剂,要求转染时的最适细胞密度各不相同,即使同一种试剂,也会因不同的细胞类型或应用而异。转染时过高或者过低的细胞密度会导致转染效率降低,乃至表达水平偏低。因此如果选用新的细胞系或者新的转染试剂,最好能够进行优化实验并为以后的实验建立一个稳定方法,包括适当的接种量和培养时间等。 阳离子脂质体具有微量的细胞毒性而往往需要更高的铺板密度或者更多的悬浮细胞数,有的要求细胞90%汇片;而有些多胺或者非脂质体的配方则要求在40%-80%之间,尽量在细胞最适的生理状态下转染,以求最佳的转染效果。 2、电压过大 做电转的时候,如果电压太大,往往会发生细胞大量死亡的情况。不同的细胞,需要的电压是不一样的。 3、未加血清 血清一度曾被认为会降低转染效率,老一代的转染方法往往要求转染前后洗细胞或者在无血清培养基条件下转染,但有些对此敏感的细胞如原代细胞会受到损伤,甚至死亡导致转染效率极低。不过转染产品配方几经革新后的今天,对于主流的转染试剂来说,血清的存在已经不会影响转染效率,甚至还有助于提高转染效率,如阳离子聚合物等。 转染后未及时加入血清,会导致细胞大量死亡。一般要在转染后的4-6小时换液且换为有血清的培养基。也可以在原来的无血清培养基里面滴加血清。 4、细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。 如果同一个实验室同时培养不同种类的细胞,那就可能发生交叉污染,即使遵循最严格的分离操作规程这种情况也有可能发生。 5、 转染载体的构建 转染载体的构建(病毒载体,质粒DNA,RNA,PCR产物,寡核苷酸等)也影响转染结果。病毒载体对特定宿主细胞感染效率较高,但不同病毒载体有其特定的宿主,有的还要求特定的细胞周期,如逆转录病毒需侵染分裂期的宿主细胞,此外还需考虑一些安全问题(如基因污染)。除载体构建外,载体的形态及大小对转染效率也有不同的影响,如前面提到的超螺旋及线性DNA对瞬时和稳定转染的影响。如果基因产物对细胞有毒性作用,转染也很难进行,因此选择组成或可调控,强度合适的启动子也很重要,同时做空载体及其它基因的相同载体构建的转染正对照可排除毒性影响的干扰。 转染用的质粒首先要保证数量,一般为2μg以上。质粒纯度不够或者含有细菌LPS或其他对细胞有毒害作用的物质,也会影响转染效率。这个时候,就应该对质粒进行纯化和浓缩。 6、试剂毒性大 有时候转染效率低下,是脂质体试剂毒性大的原因。推荐是非脂质体的转染试剂,如Entranster试剂。 7、不注意细节 在转染之前更换一次37℃预温的培养基,可提高转染效率。脂质体和DNA/RNA混合物应当一滴一滴地滴下来,从培养皿一边滴到另一边,边滴边轻摇培养皿,以确保均匀分布和避免局部高浓度。这些都是一些细枝末节,但是,如果不注意的话,也会造成转染效率低下。 8、细胞状态不好 有时会存在不恰当的细胞密度,转染时融合度应为70%-90%。细胞状态不好,会导致转染效率低下。一般进行转染的细胞应该处于对数生长期。如果是贴壁细胞的话,贴壁率应该在70-80%;如果是悬浮细胞的话,应该是6X105个/孔(24孔板),一般是转染前一天换液,转染前用无血清培养基或PBS洗细胞一次。转染的整个过程都不应该有抗生素。查看更多 1个回答 . 12人已关注
求助 ,如何降低乳化油的粘度? 采用的基础油黏度高了,生产的乳化油粘稠不易乳化,如何才能降低成品乳化油的稠度 查看更多 1个回答 . 19人已关注
碘帕醇注射液质量标准? 求助:美国上市的碘帕醇注射液50ml:18.5g(I),未进口,想查到质量标准,请问大家怎么在USP41上查? 查看更多 4个回答 . 10人已关注
钙钛矿? 有没有做钙钛矿吸氧材料的,可以一起讨论呀 查看更多 2个回答 . 16人已关注
胃酶(pepsin A )? 目前见的多的均是从猪胃粘膜提取出来的胃酶。那有没有牛胃酶或重组的胃酶产品呢?虫子们有知道的分享一下信息就好 查看更多 2个回答 . 9人已关注
锂离子电池负极材料容量极低? 我目前做的是铁酸锌负极材料,电镜拍了大概是1-2微米的球。测出来容量只有200-300mAh/g。我每次实验都做了商业石墨做对比,商业石墨容量很稳定的在370mAh/g左右。 电池材料负极我用的泡沫铜,隔膜2400,电解液就是最普通的1:1:1 极片的工艺是 1.浆料是活性材料:导电炭黑:CMC=7:1.5:1.5 搅拌12h 2.涂极片后80℃真空干燥12h 3.压极片:10Mpa保持1分钟 4.放入手套箱过夜 电池工艺 装电池:正极壳-负极极片-隔膜-120ul电解液-锂片-泡沫镍-120ul电解液-负极壳 静置12h后从手套箱取出测试。 电池我重复做了几次,容量都很低,最开始我以为是我颗粒大的原因,后面我就拿去球磨,磨完大概是500nm左右,做出的电池容量依然只有250mAh/g左右。 我查了很多文献之后,个人觉得压极片的压力可能对于我的材料来说大了。其他原因真想不出来了。现在我很迷茫~求分析。 查看更多 1个回答 . 19人已关注
求教换热器的一个问题? 贫富液换热器。贫液入口温度120,出口温度73。富液50升温至93。我不太明白为什么贫液温度出口能比富液出口温度低?查看更多 2个回答 . 19人已关注
膨胀机性能曲线解读? 请教各位大神,膨胀机的两张性能曲线,其中横坐标U/Co,还有另外一张的纵坐标isentropic head分别指的什么意思,与机器的进出口压力、温度、转速是什么关系,要怎么换算。查看更多 1个回答 . 4人已关注
苯酚的反应? 想问一下下面这个题 查看更多 4个回答 . 11人已关注
润滑油和润滑脂有必要用进口品牌吗? 润滑油和润滑脂有必要用进口品牌吗?不就是随便加一点液体 能润滑就行查看更多 3个回答 . 1人已关注
求JCPD0706S 卡片 44-0706? 物相: CuO 编号: 44-0706 需要txt版本 衍射角度 晶面间距 晶面指数这几个参数必须要完整查看更多 2个回答 . 18人已关注
DSN双链特异性核酸酶? 请问有人了解DSN酶的作用机制吗?它是怎么切割双链DNA或者DNA/RNA 的呢?作用点是什么呢? 查看更多 2个回答 . 3人已关注
简介
职业:赛得利(江西)化纤有限公司 - 设备维修
学校:郑州大学 - 化学工程学院
地区:辽宁省
个人简介:真实是人生的命脉,是一切价值的根基。查看更多
已连续签到天,累积获取个能量值
  • 第1天
  • 第2天
  • 第3天
  • 第4天
  • 第5天
  • 第6天
  • 第7天
 
这是一条消息提示
 
提醒
您好,您当前被封禁天,这天内您将不能登陆盖德问答,离解封时间还有
我已了解
提醒
提问需要5个能量值,您当前能量值为,请完成任务提升能量值
去查看任务