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生物医学工程

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我养的SD大鼠MSC在P3代就老化了，细胞宽大还有观察到黑胶虫，造成这个原因是? 我的细胞P0长的很好，很明显的集落式的生长。我一般都1传2，原代是用一只3-4周的大鼠，接种两个25CM的培养瓶，即每个培养瓶接种一侧的股骨+胫骨。有的原代细胞长的比较满所以1：3传代我也试过，但是感觉传代后密度有点低了。 1.P2的细胞长的也挺快，有的在传代后第二天就能长到80%，有的瓶子在4-5天长满80%。细胞在瓶底分布不十分均匀，在细胞比较密集的部分感觉形态比较典型，成旋涡状生长，是长纤维状的。但是细胞比较少的部分就觉得有点宽大扁平了，可以看到比较扁平的多边形细胞。-------------------不知道这个是不是因为细胞密度低，充分舒展而至。最让人郁闷的是P3代细胞长的就很慢了，传代后有的瓶子里悬浮细胞很多，贴壁细胞比较少。贴壁的细胞有的比以前变小了，类似圆形，好像是凋亡回缩了。 2.细胞老化。不知道你有没有仔细看过你的细胞里有没有黑色的颗粒，我的有的细胞里就有，查资料说这是老化的标志，甚至有的细胞里有空泡形成，有人说这是脂肪分化了，但是我也没有做红油染色，也不知道是不是这样。我也不太清楚为什么这么快就老化了，我们学校普外实验室的同学传到第六代状态都还是很好的 3.血清问题。我的血清虽然是进口的，可是我觉得周围人用这个牌子的不太多，所以我就担心是血清的问题。但是楼上说用Giboco的血清也有点问题，我就怀疑是不是血清浓度的问题。不知道你是不是也是用10%的特级胎牛血清。不知道有没有可能是营养太好的原因，记得之前看过原代用10%的，传代后用8%的，我没这样用过，但是很多人没有改变血清浓度照样细胞养的很好！ 4.黑胶虫。我培养瓶里的黑点点仔细看的话，有少数确实在原地翻动。但是很多人的确不认同黑胶虫这个说法。查看更多

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生物医学工程

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使用蛋白质亲和层析法将目标蛋白从混合物中分离出来，但是我的杂质和标签蛋白结合要怎么处理呀? 你用的是常用的这些His tag、GST tag、MBP tag、NusAtag、Strep tag标签吗？每个标签是不同的查看更多

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化学学科

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哪两个发色基团（或染料分子）在靠近后可以有颜色的改变? 我想是不是可以这样：找两种带荧光基团的分子A和B，如果你在国外的话可以直接买，如果在国内可以合成，文献很多的。然后测它们混合后的荧光。然后把你的分子胶水和A混合，测荧光。然后测分子胶水和B混合的荧光。最后把你的分子胶水和A及B混合,如果出现荧光不是以上的三种，说明有可能是你的分子胶水把AB粘起来了。当然还要考虑溶剂效应等很多因素。查看更多

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生物医学工程

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影像无法镶嵌，提示波段数不同，这要怎么办? 数据缺失的话基本上没办法，不过高分数据应该不会出现这样的情况吧。缺失数据就算是坏点修复也没法对大片区域进行效果好的修正，看看自己的研究区和缺失的区域有没有交集，有的话最好换影像吧，没有的话先裁剪再进行相关的操作查看更多

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生物医学工程

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250kd大蛋白制6%的胶适合吗？湿转液是不是不加SDS? 280KD的蛋白7.5%的胶也能跑，大分子蛋白主要在转膜，转膜缓冲液甲醇含量适当降低到10%~15%，其他不变，采用冰浴低电压湿转，40mA恒流12h左右，应该没有问题的。查看更多

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生物医学工程

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工艺技术

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操作一样，为什么这次色谱图中出现鬼峰? 该峰时有时无的话，怀疑是鬼峰。一般地，色谱柱本身不会引入鬼峰，但色谱柱可对流动相或系统流路内的强保留污染组分起到富集作用，在有机相比例随梯度程序变化的过程中而被冲洗出来。这一点，在使用较长的色谱柱的时候尤其值得关注，因为色谱柱本身较长，在HPLC上其允许的操作流速较小，需要的平衡时间较长。查看更多

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生物医学工程

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微生物

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如何构建shRNA的质粒? Sigma有经典的protocol，还有新技术talen，尤其是CRISPER-Cas9技术。查看更多

#RNA

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生物医学工程

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材料科学

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20CrMnTi球化退火后的金相怎样评级? 没有见过评金相等级的，只有晶粒度评级吧？可能只是有限查看更多

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仪器设备

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单管程换热器不设置膨胀节，怎么消除管壳程膨胀变形？ 是否可以适当缩短换热器长度、增加筒体直径，来降低膨胀量从而减小拉脱应力。查看更多

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材料科学

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滴涂法直接制备薄膜怎样才能均匀？ 刮涂并不好控制查看更多

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生物医学工程

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开关电源噪声问题? 环路有些振荡? 我想一般是由变压器或者是电感产生的.用示波器可以看到这个低频信号.其实这个一般是可以通过优化你的环路来消除的. 查看更多

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生物医学工程

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PD98059怎么使用? 先用DMSO溶解到10mM，然后，再用培养液稀释，不同的细胞对PD的IC50不一样，我做的乳腺癌大约是30uM，仅供参考查看更多

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电池充放电过程极化与电压关系图绘制? 楼主能发一下论文标题么？查看更多

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工艺技术

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锂片DSC测试290℃左右出现较大放热峰，是哪些反应引起？ 印象中会和氮气反应，和氩气不知道查看更多

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化学学科

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过柱后样改变，求支招？ 重结晶，换查看更多

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仪器设备

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双吸泵与电机可以采用直连方式连接吗? 若是有能力就直接整一个，别忘了发上来分享撒。查看更多

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化学学科

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工艺技术

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金属盐与对苯二甲酸经过超声合成超薄MOF？ Ni Co ... 这两种金属混合一起，反应的查看更多

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化学学科

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工艺技术

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关于反应物多卤素的suzuki反应？传统的PPh3，dppf等芳基膦配体参与的suzuki反应，一般氧化加成是决速步，芳基卤代物氧化加成的活性次序是I Br Cl F，而大位阻富电子的膦配体(主要是大位阻)会极大的促进氧化加成和还原消除，同时抑制转金属化，使转金属化成为决速步，而氧化加成得到的芳基卤化钯进行转金属化的活性次序是F Cl Br I，也就是说大位阻膦配体有利于氯代物优先反应，而传统的非大位阻的膦配体有利于溴代物优先反应查看更多

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生物医学工程

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水流在管道里流动，水和管道(钢)之间换热系数怎么设置呀? 导热系数默认是定值，因为一般情况下温度变化不是很大的时候，导热系数都可以看做定值的，但是你如果要考虑它随温度的变化就要将它改为变量. 查看更多

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化学学科

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求助解释？ The missing FCF reflections below theta(min) were caused by the high beamstop theta(min) limit set.查看更多

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简介

职业：浙江众立合成材料科技股份有限公司 - 设备工程师

学校：云南民族大学 - 民族文化学院

地区：浙江省

个人简介：爱情究竟是精神** 还是世纪末的无聊消遣查看更多

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