组织总RNA小量提取试剂盒是一种用于从动物组织、细胞、老鼠尾巴和石蜡包埋组织中提取基因组DNA的试剂盒。它采用硅胶膜纯化技术，能够限度去除蛋白质、多糖、脂类等杂质，从而获得高纯度的RNA。与传统的乙醇沉淀和酚/氯仿抽提方法不同，组织总RNA小量提取试剂盒的提取过程更加简便。该试剂盒还可以快速进行总RNA柱式纯化，仅需不到20分钟即可获得高质量的RNA。每个提取物中可纯化高达1,000微克的RNA。此外，使用该试剂盒提取的总RNA可广泛应用于各种需要高质量RNA的实验和研究领域。

操作步骤

1.将待提取的组织样品在液氮中磨碎成粉末。每20~30mg组织加入600ul的BufferRL（使用前检查是否加入β-巯基乙醇），少于20mg的样品加入350ul的BufferRL。样品体积不应超过BufferRL体积的十分之一。

2.待样品充分裂解后，室温放置5分钟，以确保蛋白质核酸复合物完全分离。

3.以12000rpm离心2~5分钟，取上清进行下一步操作。

4.加入与样品体积相等的70%乙醇（无RNase水配制），充分混匀。

5.将步骤4中得到的溶液全部加入已装入收集管（CollectionTube2ml）的吸附柱（SpinColumnCR）中。如果一次不能将全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入。以12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，然后将吸附柱放回收集管中。

6.向吸附柱中加入350μl的BufferRD，以10000rpm离心15秒，弃废液，然后将吸附柱重新放回收集管中。

7.配制DNaseI混合液：取52μl的DEPC-H₂O，加入8μl的10×DNaseIBuffer和20μl的DNaseI（1U/μl），混匀，配制成终体积为80μl的DNaseI混合液。

8.将80μl的DNaseI混合液直接加入吸附柱中，孵育15分钟，温度保持在20~30℃。

9.向吸附柱中加入350μl的BufferRD，以10000rpm离心15秒，弃废液，然后将吸附柱重新放回收集管中。

10.向吸附柱中加入500μl的BufferRW，以12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，然后将吸附柱放回收集管中。

11.重复步骤10。

12.以12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。

13.将吸附柱置于一个新的无RNase离心管（CollectionTube1.5ml）中，向吸附柱的中间部位悬空加入30~50μl的DEPC-H₂O，室温放置1分钟，以12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液。将RNA保存在-70℃，以防止降解。

主要参考资料

[1] 现代医学实验技巧全书·上册