在做实时荧光定量 PCR（qPCR）时，SYBR Green 和 TaqMan 探针法有什么区别？

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张

上海普优文生物科技有限公司进入商铺

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张

，暂无简介 2026-06-07回答

这是两种最主流的荧光定量技术：SYBR Green（染料法）：非特异性地结合到所有双链 DNA 的小沟中。只要有双链形成就发光。优点：成本低，不需要针对每个基因设计探针，通用性好。缺点：特异性稍差，如果引物有非特异性扩增或引物二聚体，也会被算入荧光信号（必须通过熔解曲线/Melting Curve来检查纯度）。TaqMan（探针法）：使用一条特异性结合在目的片段中间的荧光探针（带有荧光基团和淬灭基团）。当 Taq 酶延伸到此处时，利用其 5' → 3' 外切酶活性将荧光基团切下，使其远离淬灭基团而发光。优点：特异性极高，只有目的片段被扩增时才发光，可用于多重 PCR。缺点：成本高，合成探针周期长。

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